Kontrola kvality a účinnosť sterilizácie. Fyzická kontrola režimu sterilizácie. Metódy kontroly účinnosti sterilizácie Metódy kontroly sterilizácie zdravotníckych pomôcok

V komplexe opatrení na sterilizáciu zdravotníckych pomôcok je dôležitá organizácia a sledovanie jej účinnosti. Doposiaľ používané metódy a prostriedky kontroly nie vždy umožňujú odhaliť defekty sterilizácie, čo má za následok nárast nozokomiálnych nákaz.

Kontrola účinnosti sterilizačného zariadenia sa vykonáva fyzikálnymi, chemickými a biologickými (bakteriologickými) metódami. Spoľahlivosť týchto metód je rôzna.

Kontrola sterilizácie

Fyzikálne a chemické metódy sú určené na prevádzkovú kontrolu a umožňujú kontrolovať dodržiavanie parametrov pary, plynu, sterilizácie vzduchu, teploty, tlaku, expozície.

Nevýhodou týchto metód je, že nemôžu poskytnúť dôkaz o účinnej sterilizácii. Spoľahlivá na určenie účinnosti je iba bakteriologická metóda.

Fyzikálne metódy

Fyzikálne metódy riadenia sa vykonávajú pomocou prostriedkov na meranie teploty (teplomery, termočlánky), tlaku (manometre, kombinované tlakomery a vákuomery) a času (časovače). Moderné sterilizátory sú vybavené aj záznamovými zariadeniami, ktoré zaznamenávajú jednotlivé parametre každého sterilizačného cyklu.

Chemické metódy

Už desaťročia sa chemická kontrola vykonáva pomocou chemikálií, ktoré menia svoj stav agregácie alebo farby pri teplote blízkej teplote sterilizácie (kyselina benzoová na kontrolu sterilizácie parou, sacharóza, hydrochinón a množstvo ďalších látok na kontrolu sterilizácie vzduchom).

So zmenou farby a topením týchto látok bol výsledok sterilizácie považovaný za uspokojivý.

Dlhodobé pozorovania a literárne údaje však naznačujú, že pri uspokojivých výsledkoch chemickej kontroly s použitím týchto indikátorov bakteriologická kontrola v mnohých prípadoch (až 12 %) odhalí neuspokojivý výsledok sterilizácie.

Okrem toho majú tieto látky významnú nevýhodu. Ich prechod do iného stavu agregácie nedáva predstavu o trvaní vystavenia teplote, pri ktorej sa topia.

Berúc do úvahy nedostatočnú spoľahlivosť použitia týchto ukazovateľov na kontrolu, ako aj značnú pracnosť a nepohodlnosť ich praktické uplatnenie V 70-tych rokoch boli vyvinuté chemické indikátory, ktorých farebná zmena nastáva pri vystavení teplote prijatej pre tento režim počas doby potrebnej na sterilizáciu.

Zmenou farby týchto indikátorov možno usúdiť, že hlavné parametre sterilizačného procesu - teplota a čas - sú zachované. Dlhodobé používanie takýchto indikátorov ukázalo ich vysokú spoľahlivosť.

Sofistikovanejšie indikátory sú určené na sledovanie kritických parametrov sterilizačného procesu.

Až do konca 80. rokov 20. storočia neexistovali normy pre chemické ukazovatele vyrábané rôznymi spoločnosťami a neexistovali žiadne pokusy o ich klasifikáciu. Až v roku 1995 vydala Medzinárodná organizácia pre normalizáciu (ISO) dokument „Sterilizácia zdravotnícke prístroje. Chemické indikátory. Časť 1".

Od januára 2002 platí GOST R ISO 11140-1 „Sterilizácia zdravotníckych výrobkov. Chemické indikátory. Všeobecné požiadavky". Podľa tohto dokumentu sú chemické ukazovatele rozdelené do šiestich tried.

Ukazovatele 1. trieda sú indikátormi („svedkami“) procesu.

Príkladom takéhoto indikátora je páska indikujúca teplo, ktorá sa pred sterilizáciou nalepí na textilné obaly alebo sterilizačné boxy.

Zmena farby pásky znamená, že balenie bolo podrobené procesu sterilizácie. Rovnaké indikátory môžu byť umiestnené v súpravách chirurgických nástrojov alebo chirurgickej bielizne.

2. stupeň indikátor je určený na použitie v špeciálnych testovacích postupoch, ako je Bowie-Dick test. Tento test nekontroluje parametre sterilizácie, hodnotí účinnosť odvodu vzduchu z komory parného sterilizátora.

Ukazovatele 3. trieda sú indikátory jedného parametra. Odhadujú maximálnu teplotu, ale nedávajú predstavu o čase jej vystavenia. Príkladmi takýchto indikátorov sú chemikálie opísané vyššie.

4. trieda sú multiparametrové indikátory. Obsahujú farbivá, ktoré menia svoju farbu spoločným vplyvom viacerých parametrov sterilizácie, najčastejšie teploty a času. Príkladom takýchto indikátorov sú termo-časové indikátory na monitorovanie sterilizácie vzduchu.

5. trieda— integrujúce ukazovatele. Tieto indikátory reagujú na všetky kritické parametre sterilizačnej metódy. Charakteristika tejto triedy indikátorov sa porovnáva s inaktiváciou vysoko odolných mikroorganizmov.

6. trieda— emulátory indikátorov. Tieto indikátory by mali reagovať na všetky kontrolné hodnoty kritických parametrov sterilizačnej metódy.

biologická metóda

Spolu s fyzikálnymi a chemickými metódami sa používa bakteriologická metóda kontroly sterilizácie. Je určený na monitorovanie účinnosti sterilizačného zariadenia.

Až donedávna sa vzorky používali na kontrolu sterilizácie parou a vzduchom. záhradná pôda obsahujúce mikroorganizmy vysoko odolné voči účinkom sterilizačných faktorov.

Odolnosť mikroorganizmov v rôznych vzorkách však nie je rovnaká, čo neumožňuje štandardizáciu výsledkov kontroly.

V súčasnosti sa na bakteriologickú kontrolu používajú biotesty, ktoré majú dávkované množstvo spór testovanej kultúry. Odporúča sa kontrolovať účinnosť sterilizácie pomocou biotestov raz za 2 týždne. V zahraničnej praxi je zvykom aplikovať biologické testovanie aspoň raz týždenne.

V niektorých prípadoch je potrebné kontrolovať každú náplň sterilizátora pomocou biotestov. v prvom rade rozprávame sa o sterilizácii nástrojov používaných na vykonávanie zložitých chirurgických zákrokov vyžadujúcich použitie vysoko spoľahlivých sterilných materiálov.

Každá dávka implantovateľných zariadení musí byť tiež podrobená bakteriologickej kontrole. Súčasne sa odkladá použitie sterilizovaných materiálov, kým sa nedosiahnu negatívne výsledky kontroly.

Rovnaké zásady pri určovaní frekvencie kontroly sa odporúčajú dodržiavať aj v súvislosti so sterilizáciou plynom, ktorá je zložitejšia ako iné metódy.

Zdroj: http://steriliz.narod.ru/07contr.htm

Sterilizácia: koncepty, metódy, spôsoby

Sterilizácia – (z lat. Defertilita) – je úplné zničenie m/o a ich spór vplyvom fyzikálnych faktorov aj chemických prípravkov. Sterilizácia sa vykonáva po dezinfekcii PSO a kontrole kvality PSO. Sterilizácia je najdôležitejším článkom, poslednou bariérou prevencie nozokomiálnych nákaz v zdravotníckych zariadeniach. Chráni pacienta pred akoukoľvek infekciou.

Dokumenty upravujúce metódy sterilizácie.

Treba pamätať na to, že na vykonávanie sterilizácie je potrebné poznať a vedieť aplikovať zákony, pokyny, pravidlá a iné poučné a metodické dokumenty v oblasti infekčnej bezpečnosti. V súčasnosti je v platnosti priemyselná norma (odst. 42-21-8-85, ktorá definuje metódy, prostriedky a spôsoby sterilizácie a dezinfekcie zdravotníckych produktov.

účel, ktorý je doplnený objednávkou č.408 "Metodické usmernenia pre dezinfekciu, PSO a sterilizáciu, zdravotnícky materiál", schválenú Ministerstvom zdravotníctva Ruska dňa 30.12.1998. č. MU-287-113.

Tieto dokumenty sú záväzné a určujúce pre všetky zdravotnícke zariadenia a poskytujú možnosť širokého výberu prostriedkov a metód, ktoré sú v podmienkach daného zdravotníckeho zariadenia najvhodnejšie. Všetky produkty, ktoré sú v kontakte s povrchom rany, v kontakte s krvou alebo injekčne a niektoré druhy medu, sa podrobujú sterilizácii.

nástroje, ktoré sa počas prevádzky dostanú do kontaktu so sliznicami, môžu spôsobiť ich poškodenie. „Sterilita“ je stav zdravotníckej pomôcky, keď neobsahuje životaschopný m/o.

Metódy sterilizácie rozlišujú:

  • fyzikálne (tepelné): para, vzduch, glasperleny;
  • chemikálie: plyn, chemikálie, žiarenie;
  • plazma a ozón (skupina chemikálií).

Výber jednej alebo druhej metódy sterilizácie závisí od vlastností objektu a samotnej metódy - jej výhod a nevýhod.

Balené výrobky sa sterilizujú v decentralizovaných alebo centralizovaných systémoch, ako aj v priemyselných podnikoch, ktoré vyrábajú zdravotnícke pomôcky na jedno použitie.

Produkty bez obalu sú sterilizované iba decentralizovaným systémom zdravotnej starostlivosti. V zdravotníckych zariadeniach sú najčastejšie metódy sterilizácie parou a vzduchom.

Sterilizátory: parný, vzduchový, plynový.

Metóda pary:

Spoľahlivý netoxický, lacný, zaisťuje sterilitu nielen povrchu, ale celého produktu. Vykonáva sa pri relatívne nízkej teplote, pôsobí šetrne k spracovávanému materiálu, umožňuje sterilizáciu produktov v obale, čím sa predchádza riziku opätovnej kontaminácie m/o.

Sterilizačným činidlom pri tejto metóde je stlačená nasýtená vodná para.

Režimy sterilizácie:

  • 1. režim (hlavný) - t 1320, 2 atm., 20` - je určený pre výrobky z hrubého kalika, gázy, skla, vrátane striekačiek s označením "2000C", výrobky z kovu odolného voči korózii.
  • 2. režim (jemný) - t 1200, 1,1 atm., 45` - odporúčaný pre výrobky z tenkej gumy, latexu, polyetylénu s vysokou hustotou.
  • 3. režim - t 1340, 2 atm., 5`.

Podmienky sterilizácie: všetky produkty sterilizované parou pod tlakom, vopred pripravené balenie - sterilizačné boxy (boxy alebo nádoby). S filtrami alebo bez nich, kraftové vrecká a iné obaly určené na sterilizáciu parou.

Čas použiteľnosti sterilizovaných výrobkov závisí od balenia:

  1. produkty sterilizované v sterilizačných boxoch bez filtra (CS) - 3 dni (72 hodín);
  2. v sterilizačných boxoch s filtrom (CF) - do 20 dní, s výhradou mesačnej výmeny filtrov;
  3. v dvojitom mäkkom obale z bavlnenej tkaniny, kraft papiera - 3 dni. (72 hodín).

Nevýhody metódy:

  • spôsobuje koróziu nástrojov vyrobených z nestabilných kovov;
  • mení sa na kondenzát, zvlhčuje sterilizované produkty, čím zlepšuje podmienky skladovania a zvyšuje riziko opätovnej kontaminácie m/o.

vzduchová metóda.

Sterilizačným prostriedkom je suchý horúci vzduch. Charakteristickým znakom metódy je, že nedochádza k zvlhčovaniu obalov a produktov as tým súvisiacemu skráteniu doby sterility, ako aj korózii kovov.

Režimy sterilizácie:

  • 1. režim (hlavný) - t 1800 - 60 min. - určený na sterilizáciu sklenených výrobkov vrátane injekčných striekačiek s označením "2000C", kovových výrobkov vrátane kovov odolných voči korózii.
  • 2. režim (jemný) - t 1600 - 150 min. - je určený na sterilizáciu výrobkov zo silikónovej gumy, ako aj častí niektorých prístrojov a zariadení.

Podmienky sterilizácie: produkty sú sterilizované bez obalu na sieťkach balených v baliacom papieri, ktorý spĺňa požiadavky súčasnej priemyselnej normy.

Nevýhody metódy: pomalé a nerovnomerné zahrievanie sterilizovaných výrobkov; potreba použitia vyšších teplôt; nemožnosť použitia na sterilizáciu výrobkov z gumy, polymérov; nepraktickosť použiť všetky dostupné obalové materiály.

Poznámky: suché výrobky sa podrobia sterilizácii; produkty sterilizované v kraftovom vrecku, balenie bez vrecového papiera s pevnosťou za mokra, skladovanie - 3 dni.

(72 hodín); v 2-vrstvovom balení krepového papiera na med.

ciele - do 20 dní; produkty sterilizované bez obalu treba použiť ihneď po sterilizácii počas pracovnej zmeny (6 hodín) za aseptických podmienok.

Glasperlenova metóda. Celokovové dentálne a kozmetické nástroje sa sterilizujú ponorením sklenených guľôčok zahriatych na 190-2500 °C do média.

Zdroj: https://megaobuchalka.ru/8/32842.html

Kontrola kvality sterilizácie

Spoľahlivosť sterilizácie je určená nasledujúcimi faktormi;

  • schopnosti a technický stav sterilizačných zariadení;
  • dodržiavanie pravidiel a režimov sterilizácie;
  • kvalita predsterilizačného čistenia“,
  • kvalifikácia zdravotníkov;
  • výber spôsobu sterilizácie.

V Ruskej federácii sa, žiaľ, dodnes stále používajú ukazovatele topenia. Medzi nevýhody patrí ich približná evidencia dosiahnutia požadovanej teploty.

Napriek zložitej finančnej situácii v krajine si zdravotnícke zariadenia osvojujú moderné termočasové sterilizačné indikátory jednorazového použitia - Vinar, Steriking, Medtest, ktoré umožňujú dostatočnú kontrolu sterilizačného procesu.

Metódy kontroly sterilizácie môžu byť:

  1. operatívne;
  2. dlhý termín.

1. Prevádzkové metódy riadenia- Tí, ktorí vykonávané priamo po sterilizácii.

Prevádzkové ovládacie prvky:

  • vizuálne pomôcky;
  • manometre;
  • teplomery;
  • Vákuomery;
  • maximálne teplomery;
  • chemikálie - sklenené indikátory (vo vnútri sú chemikálie, ktoré pri určitej teplote menia farbu). Hmota by mala byť natretá rovnomerne!

Pre parné sterilizátory:

  1. « Sterikont", "Steritest" (páska) - 132 ° C - 20 min;
  2. "Vinar" (páska) - 120 ° C - 45 min.

Pre vzduchové sterilizátory:

  • "Vinar" (páska) -180 ° С - farba "khaki";
  • "Steriking" - 180 °C - čierna.

Málo používané:

  • kyselina vínna - 170 ° C - steká a stáva sa bielou;
  • hydrochinón -169 -171 ° C - čierny;
  • tiomočovina - 180 ° C - jasne žltá farba.

V súčasnosti sa okrem termočasových ukazovateľov kontroly sterilizácie "Vinar", "Steriking" používa veľké množstvo modernejších termočasových ukazovateľov.

Zdroj: https://studopedia.net/3_77236_kontrol-kachestva-sterilizatsii.html

Kontrola kvality a účinnosť sterilizácie

Kontrola umožňuje zlepšiť kvalitu sterilizácie v zdravotníckych zariadeniach. Zabezpečuje stanovenie účinnosti a parametrov sterilizácie.

Spoľahlivosť sterilizácie vzduchu závisí od konštrukcie sterilizátora, jeho prevádzkyschopnosti, schémy a objemu náplne, použitého ochranného obalu, použitých spôsobov prevádzkovej a periodickej kontroly a zaškolenia personálu obsluhujúceho sterilizátor.

Problém spoľahlivosti je obzvlášť dôležitý pri prevádzke zariadení zastaraných typov pri absencii dostupných metód na kontrolu sterilizácie.

Kontrola účinnosti sterilizácie vo vzduchovom sterilizátore sa vykonáva bakteriologickou metódou a chemickými termo-časovými indikátormi.

Bakteriologická metóda kontroly sa vykonáva pomocou biotestu - predmetu vyrobeného z určitého materiálu, kontaminovaného testovacími mikroorganizmami. Ako nosiče sa používa malá liekovka obsahujúca spóry B. Licheniformis.

Kontrolná úloha sa vykonáva v súlade so schválenou metodikou. Existujú aj hotové certifikované testy so spórami B.

Licheniformis s farebnými živnými pôdami, umožňujúcimi bakteriologickú kontrolu priamo v CSO za prítomnosti termostatu.

Riadenie sterilizácie vzduchu chemickými termo-časovými indikátormi. Na prevádzkovú kontrolu sa predtým odporúčalo množstvo chemikálií, ktorých teplota topenia zodpovedá sterilizačnej teplote.

Dnes je však každému jasné, že ich nemožno považovať za spoľahlivé ukazovatele, pretože nedávajú predstavu o čase, keď je výrobok vystavený horúcemu vzduchu.

Takáto kontrola je orientačná a nezaručuje dosiahnutie sterility v procese sterilizácie.

Spoľahlivosť prevádzkovej kontroly sa výrazne zvyšuje pri použití indikátorov integrovaného pôsobenia, najmä IS-160 a IS-180 NP od Vinar, ktoré menia farbu na farbu štandardu len vtedy, keď sú vystavené sterilizačnej teplote počas celej doby sterilizačná expozícia.

Indikátorové prúžky sa vkladajú do kontrolných bodov sterilizátora počas každého sterilizačného cyklu. Ak je farba indikátora po sterilizácii v ktoromkoľvek bode svetlejšia ako štandard, všetky produkty sa považujú za nesterilné.

Vrecia z pergamenového papiera používané na balenie, keď sú sterilizované v moderných sterilizačných zariadeniach, majú podobný indikátor aplikovaný vo výrobe.

Spoľahlivosť parnej sterilizácie závisí od niekoľkých faktorov:

  • dodržiavanie prevádzkových podmienok;
  • presnosť ovládania meracie prístroje inštalované na sterilizátore;
  • úplnosť odstraňovania vzduchu zo sterilizovaných výrobkov;
  • tesnosť komory sterilizátora.

Metódy periodickej kontroly parných sterilizátorov sú uvedené v systéme „čistého nástroja“. Tie obsahujú:

  • kontrola presnosti manometra;
  • kontrola presnosti zaznamenávania teploty a tlaku zapisovačmi;
  • kontrola tesnosti komory sterilizátora;
  • kontrola kvality automatického vákuového testu;
  • kontrola účinnosti sušenia textilných materiálov;
  • kontrola úplnosti odstraňovania vzduchu zo sterilizovaných produktov. Stanovenie účinnosti bakteriologickou metódou v parnom sterilizátore sa vykonáva skúškami obsahujúcimi spóry B. Stearothermophilus v súlade s metodikou schválenou Ministerstvom zdravotníctva Ruskej federácie.

Prevádzková kontrola parnej sterilizácie sa vykonáva chemickými indikátormi integrovaného pôsobenia (termo-časové).

Indikátory topenia (tiomočovina, kyselina benzoová atď.), ktoré sa v niektorých nemocniciach stále používajú, nie sú indikátormi sterility, pretože zaznamenávajú iba teplotu, ale nezohľadňujú sterilizáciu (čas sterilizácie).

Indikátory Vinar IS-120 a IS-132, ako aj vo vzduchovom sterilizátore, menia farbu tak, aby zohľadňovali štandard iba pri vystavení sterilizačnej teplote počas celej sterilizačnej expozície.

Pri každom cykle sa indikačné prúžky umiestnia do kontrolných bodov sterilizátora. Ak je farba indikátora v ktoromkoľvek bode svetlejšia ako štandard, všetky produkty sa považujú za nesterilné.

Zdroj: https://vuzlit.ru/828921/kontrol_kachestva_effektivnost_sterilizatsii

Chemická sterilizácia

Chemická sterilizácia je najproblematickejšia a časovo najnáročnejšia metóda sterilizácie materiálu. Používa sa len vtedy, keď nie je možné použiť iné metódy. Chemická sterilizácia sa v zásade používa na spracovanie zariadení s jemnou vláknovou optikou (endoskopické zariadenia, laryngeálne čepele atď.).

Požiadavky na podmienky chemickej sterilizácie:

  • Samostatná miestnosť s povrchovou úpravou, ktorá umožňuje mokrú dezinfekciu: obkladové steny v plnej výške, dlažba, stropná krytina odolná voči vlhkosti.
  • Baktericídne ožarovanie sa vykonáva podľa režimu pre miestnosti s aseptickým režimom.
  • Prítomnosť 2 umývadiel (na ruky, na vybavenie).
  • Prítomnosť aspoň 3 tabuliek (oddelenie tokov technologického procesu).
  • Všetky nádoby a ďalšie nástroje (striekačky, pinzety, kliešte) musia byť sterilné a musia sa použiť iba na jednu spracovanú dávku. Nádoby sa používajú zo skla, kovov, žiaruvzdorných plastov, ktoré vydržia autoklávovanie.
  • Personál musí používať sterilné kombinézy a ochranné prostriedky.

Na chemickú sterilizáciu sa nástroje, ktoré boli dezinfikované, predsterilizované vyčistené, dodávajú do kancelárie v suchej forme. Nástroje a zariadenia sú ponorené do nádoby s chemickým sterilizačným prostriedkom. Sterilizácia sa vykonáva úplným ponorením. Voľné rozloženie nástrojov, naplnenie kanálov roztokom pomocou injekčnej striekačky.

Pri veľkej dĺžke výrobku sú umiestnené v nádobe v špirále. Odnímateľné výrobky sa sterilizujú v nezmontovanom stave. Po uplynutí expozičného času sa produkty vyberú z nádoby pomocou sterilnej pinzety, pričom sa vypustia zvyšky sterilizačného prostriedku a prenesú sa do nádoby so sterilnou destilovanou vodou.

Kanály a nádoby sa premyjú sterilnou vodou pomocou injekčnej striekačky tak, aby sa premývacia voda nedostala do nádoby so sterilnou vodou. Potom sa kanály naplnia sterilnou vodou a produkt sa nechá vo vode 10-15 minút (doba umývania je určená pokynmi pre prípravu). Po uplynutí času sa proces úplne zopakuje v ďalšej nádobe.

V každej nádobe pracujú so samostatnými striekačkami a pinzetou. Potom sa výrobky rozložia na samostatný stôl v sterilnom liste. Kanál a dlhé nástroje je vhodné vysušiť sterilným alkoholom (oplachovanie, utieranie). V liekopise je recept etylalkohol v sterilnej vode za aseptických podmienok.

Po dokončení sušenia sa sterilné produkty zabalia do sterilného bixu vyloženého sterilnou fóliou alebo do 2-vrstvového kaliko obalu.

Skladovateľnosť materiálu, ktorý prešiel chemickou sterilizáciou, nie je dlhšia ako 3 dni od okamihu sterilizácie obalu.

Kontrola kvality sterilizácie:

  • Vizuálna kontrola. Kontrolujú správne použitie obalových materiálov, úroveň naloženia obalov a sterilizačných komôr, platnosť zvoleného spôsobu sterilizácie.
  • Fyzická kontrola. Vyhodnoťte ukazovatele kontrolných a meracích zariadení sterilizačných zariadení: maximálne teplomery, monometre a úroveň odchýlky od noriem. Mimo umiestnenia obalu a testovacích indikátorov vo vnútri umiestnenia obalu.
  • Chemická kontrola. Vykonáva sa pomocou chemických testovacích indikátorov. K dnešnému dňu je potrebné používať testovacie indikátory 4. generácie, ktoré umožňujú kontrolovať všetky parametre sterilizácie (tlak, teplota, čas). Vonku a vo vnútri balenia sú testovacie indikátory na ovládanie.

Malo by sa pamätať na to, že interné a externé testovacie indikátory sa musia používať striktne na určený účel.

Vnútorné indikátory sú umiestnené vo vnútri balenia v 3 úrovniach s rovnomerným ukladaním (pri zmiešanom ukladaní - dodatočný test je umiestnený v každom type sterilizovaného materiálu).

Interné indikátory testu umožňujú kontrolovať parametre sterilizácie vo vnútri balenia. Externé testovacie indikátory monitorujú parametre sterilizácie vo vnútri sterilizačnej komory a sú umiestnené na určitých miestach v komore.

Testovacie indikátory sa vyhodnocujú ihneď po ukončení sterilizácie (externé testovacie indikátory) a po otvorení balenia (interné testovacie indikátory).

Vyhodnocujú sa všetky testovacie ukazovatele. Ak existuje jeden indikátor testu, ktorý nezodpovedá norme, materiál sa považuje za nesterilný a nemožno ho použiť.

Pravidlá pre umiestnenie testovacích indikátorov do sterilizačných obalov:

  • v homogénnom štýle sú testovacie indikátory položené na troch úrovniach (down-mid-top);
  • pri kombinovanom ukladaní sú testovacie indikátory položené na troch úrovniach (dole-stred-hore) a navyše v strede každého druhu materiálu;
  • v mäkkých baleniach s malým objemom je prípustné položiť jeden testovací indikátor do stredu balenia.

Testovacie indikátory sú uložené počas celej operácie kladenia.

Prevádzka sterilizačnej parnej komory je štvrťročne monitorovaná pomocou štandardného modulu - rovnobežnostenu zo 17 listov s veľkosťou 300-300-900mm - "bábiky".

"Bábika" - 9 interných testovacích indikátorov. Ktorý ležal uprostred 17 listov (medzi 8 a 9 listami). Plachty sú zabalené do dvojvrstvovej fólie a celý cyklus sterilizácie sa vykonáva v autokláve.

bakteriologická kontrola. Na vyhodnotenie účinnosti sterilizácie sa uskutočňujú bakteriologické štúdie pomocou biotestov a štúdia premývania na sterilitu.

Výplachy na sterilitu sa odoberajú z nástrojov ihneď po vypracovaní sterilizačného režimu az nástrojov pripravených na prácu (zo sterilného stola alebo podnosu). Odber sterov vykonáva sestra priamo zapojená do práce so sterilným materiálom.

Množstvo štúdií je určené požiadavkami vyhlášky Ministerstva zdravotníctva ZSSR č. 254 "O vývoji dezinfekcie v krajine." Pre operačnú jednotku, resuscitačné oddelenia sa kvalita sterilizácie testuje raz za 10 dní, pre ostatné citlivé miestnosti - raz za mesiac.

Kontrola sterilizácie pomocou biotestov sa vykonáva v rámci kontroly výroby – štvrťročne. Po oprave sterilizačného zariadenia je povinná kontrola biotestmi.

Účinnosť sterilizácie je kontrolovaná fyzikálnymi, chemickými a bakteriologickými metódami.

Fyzikálne metódy kontroly zahŕňajú: meranie teploty, tlaku a času aplikácie sterilizácie.

Po desaťročia sa na chemickú kontrolu používali chemikálie, ktoré majú bod topenia blízko sterilizačnej teplote. Boli to tieto látky: kyselina benzoová - na sterilizáciu parou; sacharóza, hydrochinón a niektoré ďalšie - na kontrolu sterilizácie vzduchu. Ak došlo k roztaveniu a zmene farby týchto látok, potom sa výsledok sterilizácie považoval za uspokojivý. Keďže použitie vyššie uvedených indikátorov nie je dostatočne spoľahlivé, do praxe kontroly tepelných sterilizačných metód sa teraz zaviedli chemické indikátory, ktorých farba sa mení pod vplyvom teploty primeranej pre konkrétny režim na určitý čas potrebný na implementáciu tento režim. Zmenou farby indikátorov sa posudzujú hlavné parametre sterilizácie - teplota a trvanie sterilizácie. Od roku 2002 GOST RISO 11140-1 „Sterilizácia zdravotníckych výrobkov. Chemické indikátory. Všeobecné požiadavky“, v ktorých chemický ukazovatele distribuovaný na šesť triedy:

Komu 1 trieda ukazovatele vonkajších a interný proces, ktoré sú umiestnené na vonkajšom povrchu obalu so zdravotníckymi pomôckami alebo vo vnútri súpravy nástrojov a chirurgickej bielizne. Zmena farby indikátora znamená, že balenie prešlo procesom sterilizácie.

Co. 2 trieda zahŕňajú indikátory, ktoré nekontrolujú parametre sterilizácie, ale sú určené na použitie pri špeciálnych testoch, napríklad na základe takýchto indikátorov vyhodnocujú účinnosť vákuovej pumpy a prítomnosť vzduchu v komore parného sterilizátora.

Komu 3 trieda zahŕňajú indikátory, ktoré určujú jeden parameter sterilizácie, napríklad minimálnu teplotu. Neposkytujú však informácie o čase vystavenia teplote.

Komu 4 trieda zahŕňajú multiparametrové indikátory, ktoré menia farbu, keď sú vystavené niekoľkým parametrom sterilizácie. Príkladom takýchto indikátorov sú indikátory sterilizácie parou a vzduchom na jednorazové použitie IKPVS-"Medtest".

Komu 5 trieda zahŕňajú integrujúce indikátory, ktoré reagujú na všetky kritické parametre sterilizačnej metódy.

Komu 6 trieda zahŕňajú indikátory-emulátory. Indikátory sú kalibrované podľa parametrov sterilizačných režimov, v ktorých sa používajú. Tieto indikátory reagujú na všetky kritické parametre sterilizačnej metódy. Emulujúce indikátory sú najmodernejšie. Jasne registrujú kvalitu sterilizácie pri správnom pomere všetkých parametrov – teploty, nasýtenej pary, času. Ak nie je dodržaný jeden z kritických parametrov, indikátor nefunguje. Medzi domácimi termočasovými ukazovateľmi sú ukazovatele "IS-120", "IS-132", "IS-160", "IS-180" spoločnosti "Vinar" alebo ukazovatele pary ("IKPS-120/45", " IKPS-132 / 20") a vzduchom ("IKPVS-180/60" a "IKVS-160/150") jednorazová sterilizácia IKVS spoločnosti Medtest.

Všetky operácie s indikátormi - extrakcia, vyhodnotenie výsledkov - vykonáva personál vykonávajúci sterilizáciu.

Vyhodnotenie a účtovanie výsledkov kontroly sa vykonáva vyhodnotením farebných zmien počiatočného stavu štítku tepelného indikátora každého indikátora v porovnaní s farebným štítkom porovnávacieho štandardu.

Ak farba konečného stavu štítku tepelného indikátora všetkých indikátorov zodpovedá farebnému štítku porovnávacieho štandardu, znamená to, že požadované hodnoty parametrov sterilizačného režimu v sterilizačnej komore sú splnené.

Rozdiely v intenzite farebnej hĺbky štítku tepelného indikátora indikátorov sú povolené v dôsledku nerovnomernosti prípustných hodnôt teploty v rôznych zónach sterilizačnej komory. Ak si štítok tepelného indikátora aspoň jedného indikátora úplne alebo čiastočne zachováva farbu, ktorá je ľahko odlíšiteľná od farby referenčného stavu, znamená to, že nie sú dodržané požadované hodnoty parametrov sterilizačného režimu v sterilizačnej komore.

Indikátory a porovnávacie štandardy sa musia zhodovať v číslach šarží. Je zakázané vyhodnocovať výsledky kontroly sterilizácie pomocou indikátorov rôznych šarží.

Posúdenie zhody zmeny farby štítku tepelného indikátora v porovnaní s normou sa vykonáva pri osvetlení minimálne 215 luxov, čo zodpovedá matnej žiarovke 40 W, zo vzdialenosti maximálne ako 25 cm.Na bakteriologickú kontrolu sa v súčasnosti používajú biotesty, ktoré majú dávkované množstvo spór testovacej kultúry . Existujúca metóda umožňuje vyhodnotiť účinnosť sterilizácie najskôr po 48 hodinách, čo neumožňuje použitie už sterilizovaných produktov až do získania výsledkov bakteriologickej kontroly.

Biologický indikátor je prípravok patogénnych mikroorganizmov tvoriacich spóry, o ktorých je známe, že sú vysoko odolné voči tomuto typu sterilizačného procesu. Účelom biologických indikátorov je potvrdiť schopnosť sterilizačného procesu zabíjať rezistentné mikrobiálne spóry. Je to najkritickejší a najspoľahlivejší test sterilizačného procesu. Biologické indikátory sa používajú ako kontrola záťaže: ak je výsledok pozitívny (mikrobiálny rast), potom túto záťaž nemožno použiť a všetky predchádzajúce záťaže je potrebné vyvolať až do posledného negatívneho výsledku. Na získanie spoľahlivej biologickej odpovede by sa mali používať len tie biologické indikátory, ktoré sú v súlade s medzinárodnými normami EC 866 a ISO 11138/11135. Pri používaní biologických indikátorov vznikajú určité ťažkosti - potreba mikrobiologického laboratória, vyškolený personál, dĺžka inkubácie mnohonásobne presahuje dobu sterilizácie, nutnosť karantény (nemožnosť použitia) sterilizovaných produktov až do získania výsledkov. Vzhľadom na vyššie uvedené ťažkosti pri uplatňovaní biologická metóda v ambulantnej stomatologickej praxi sa bežne používa fyzikálna a chemická metóda na kontrolu účinnosti sterilizácie.

Indikátory sterilizácie sú zariadenia, ktoré slúžia na kontrolu kvality sterilizácie v sterilizačných zariadeniach.

Na ničenie mikroorganizmov, húb, plesní, vírusov, infekcií, prístupných a efektívna metóda- sterilizácia. Na zabezpečenie sterility zdravotníckych výrobkov sa používajú špeciálne zariadenia, ktoré sa líšia dizajnom, typom nárazu a princípom činnosti: para, suché teplo, ultrafialové, ultrazvukové sterilizátory.

Kvalita sterilizácie závisí od niekoľkých faktorov:

  • výber vybavenia v súlade s vlastnosťami súpravy nástrojov;
  • správna organizácia procesov spracovania, dezinfekcie;
  • kontrola sterilizácie;
  • dodržiavanie pravidiel balenia a skladovania výrobkov.

Kontrola sterilizácie zahŕňa vykonávanie rôznych úloh – dodržiavanie parametrov, evidencia priechodu, sledovanie účinnosti a kvality sterilizačnej liečby. V závislosti od úloh a cieľov si môžete vybrať požadovaný indikátor sterilizácie alebo ich kombináciu.

Metódy sledovania účinnosti sterilizácie a klasifikácia ukazovateľov

Objektívne hodnotenie účinnosti sterilizácie zahŕňa integrovaný prístup s použitím nasledujúcich metód kontroly:

  • fyzické;
  • chemický;
  • biologické.

Fyzikálna metóda - zahŕňa prítomnosť meracích prístrojov, snímačov (teplomer, tlakomer, časovač), pomocou ktorých sa merajú parametre prístroja: teplota, tlak, čas. Porušenie štandardných prevádzkových režimov (nízka teplota, nejednotnosť trvania sterilizačného účinku alebo tlaku a pod.) indikuje možnú poruchu v prevádzke zariadenia.

Chemická metóda - vykonáva sa pomocou chemických indikátorov, ktoré menia farbu alebo fyzikálne vlastnosti v závislosti od podmienok a parametrov sterilizácie: teplota, trvanie expozície, nasýtenie parou, relatívna vlhkosť.

Chemické ukazovatele kontroly kvality sú rozdelené do 6 tried.

Prvou triedou sú tepelne indikačné pásky sterilizačného procesu, ktoré sa pred spracovaním lepia na obaly, škatule so zdravotníckym textilom, chirurgické potreby. Zmena farby indikuje prítomnosť sterilizačného účinku.

Druhý hodnotí kvalitu pary či odvod vzduchu v parných sterilizátoroch. Tento jednorazový indikátor je určený pre špeciálne testovacie postupy, ako je Bowie-Dick test.

  • Tretím sú termochemické prístroje, ktoré dokážu stanoviť iba jeden kritický parameter: kyselinu benzoovú, maximálnu teplotu, hydrochinón, tlak.
  • Po štvrté - multiparametrové ukazovatele, možno použiť vo vnútri fotoaparátu alebo obalu. Schopný opraviť a zobraziť dva alebo viac parametrov spracovania (teplota, trvanie expozície).
  • Piatou triedou sú integrátory, ktorých farba sa mení iba vtedy, ak sú splnené všetky kritické parametre spracovania. Sú tiež schopné zobraziť úroveň smrti biologických testov.
  • Šiesty sú najpresnejšie emulátory schopné zafixovať prísne dodržiavanie regulovaných hodnôt všetkých kritických parametrov.

Biologická metóda je vysoko účinný, spoľahlivý spôsob kontroly kvality sterilizačného zariadenia, vykonáva sa pomocou biotestov, na ktoré sa aplikuje dávkované množstvo spór konkrétnej testovacej kultúry. Táto vysoko spoľahlivá testovacia metóda je určená na použitie s výrobkami vyžadujúcimi vysoký stupeň sterility: chirurgické nástroje, materiály, prevádzkové príslušenstvo. Vykonáva sa 1-krát za 2 týždne alebo 1-krát týždenne (v súlade so zahraničnou praxou).

Prvé dve metódy sú pomerne populárne a používajú sa na rýchle posúdenie prevádzkových parametrov parných, plynových, vzduchových zariadení, nedokážu však poskytnúť presné informácie o účinnosti vykonanej sterilizácie. Spoľahlivé informácie o kvalite vykonanej sterilizácie poskytuje iba biologická metóda.

Kontrola kvality sterilizácie je zárukou sterility a bezpečnosti zdravotníckych nástrojov, príslušenstva a zariadení. Udržiavanie sterility produktov si vyžaduje aj vhodné podmienky skladovania: neprítomnosť hmyzu, malých hlodavcov; vylúčenie kolísania teploty a vlhkosti; predchádzanie poškodeniu, zalomeniu, škrabancom na balíkoch, krabiciach.

Rôzne typy indikátorov si môžete pozrieť na stránke polihrom.com Spoločnosť sa špecializuje na poskytovanie spotrebných materiálov a zariadení laboratóriám.

Zborník z druhého vedeckého sympózia o význame biologických indikátorov pre kontrolu sterilizácie, ktoré sa konalo v Moskve 9. decembra 1998.

M.I. Levy, Yu.G. Suchkov, V.Ya. Bessonová, Yu.S. Zueva, V.G. Slížková, M.M. Livshits, N.N. Pánková, G.I. Ruban, S.M. Savenko, A.P. Mityukov, I.I. Kornev, A.I. Voronkov
Centrum skúšobného laboratória MGTSD, KB UD prezidenta Ruskej federácie,
Moskovská lekárska akadémia. Sechenov, Centrálna klinická nemocnica MC UD Prezident Ruskej federácie

Na výpočet priemernej hodnoty počtu životaschopných spór na jeden biologický ukazovateľ je vhodné použiť Poissonovo rozdelenie. Výsledky experimentu nepotvrdzujú lineárny charakter závislosti logaritmu počtu životaschopných buniek od času sterilizácie. Použitie značného počtu biologických indikátorov v experimentoch na kontrolu sterilizácie, vysoko informatívneho živného média a dlhé obdobia kultivácie biologických indikátorov umožnili v nich odhaliť životaschopné spóry po sterilizácii častejšie ako zvyčajne a takmer vo všetkých používaných režimoch v praxi. Naočkovanie obsahov biologických indikátorov po sterilizácii na hustú živnú pôdu potvrdilo súlad rozloženia Petriho misiek podľa počtu vyrastených kolónií s Poissonovou distribúciou, čo znamená náhodné a izolované rozloženie životaschopných spór v biologických indikátoroch. V niektorých experimentoch počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami po relatívne dlhých sterilizačných obdobiach prevýšil počet indikátorov po krátkych sterilizačných obdobiach, čo nebolo možné vysvetliť v rámci prijatých predstáv o sterilizácii. Predpokladali sme, že sterilizácia je tlmený zvlnený samooscilačný proces, a to je podstatou závislosti logaritmu počtu životaschopných spór v biologických ukazovateľoch od času sterilizácie.
Kontrola sterilizátorov prevádzkovaných v zdravotníckych zariadeniach v Moskve ukázala, že vo všetkých prípadoch existujú biologické indikátory obsahujúce životaschopné spóry po sterilizácii. Pravdepodobnosť neuspokojivých výsledkov analýzy biologických ukazovateľov (10 -6) odporúčaných v normách je oveľa menšia ako v našich štúdiách.
Experimentálna parná sterilizácia segmentov tubulov vyrobených zo syntetických materiálov po predsterilizačnom čistení bola sprevádzaná nepriaznivými výsledkami podobnými tým, ktoré sa dosiahli s biologickými indikátormi.
Počet životaschopných spór v biologickom indikátore po sterilizácii je pravdepodobnostná hodnota a ich zistenie závisí od počtu indikátorov v sterilizačnej komore, kvality živného média a dĺžky kultivácie pri vhodnej teplote.

Adekvátnym nástrojom na hodnotenie účinnosti sterilizácie sú biologické ukazovatele, ktoré do značnej miery napodobňujú zdravotnícke produkty kontaminované mikroorganizmami, ktoré sú sterilizované. Ten je nadbytočný v tom zmysle, že je určený na zničenie takého počtu mikróbov, ktoré sa zvyčajne nenachádzajú na výrobkoch, ale ktoré v zásade, aj keď v zriedkavých prípadoch, nemožno vylúčiť. Preto biologické indikátory obsahujú spóry odolné voči sterilizačnému činidlu v množstvách o 2 až 3 rády vyšších, ako sa zvyčajne nachádzajú na sterilizovaných výrobkoch. Tento prístup je diktovaný masívnym využívaním sterilizácie v lekárska prax a potrebu eliminovať riziko nákazy chorých a zdravých ľudí v dôsledku neúčinnej sterilizácie.

Vzhľadom na to, že väčšina výskumníkov sa drží presvedčenia, že logaritmus počtu mikroorganizmov v biologickom indikátore alebo na zdravotníckych pomôckach je lineárnou funkciou času sterilizácie, možno časový rámec vypočítať s dostatočnou istotou. V súčasnosti sa v praxi používa niekoľko druhov sterilizácie - parná, teplovzdušná, plynová, radiačná, radiačná a niektoré ďalšie. známy hlavných výrobcov sterilizačné zariadenie - "MMM", "Looks", "Johnson and Johnson" atď.

Zamerali sme sa na stanovenie optimálnych podmienok pre použitie biologických indikátorov v procese sterilizácie. Hlavným predmetom výskumu boli biologické ukazovatele na hodnotenie parnej sterilizácie. Biologické indikátory boli pripravené a vyhodnotené v našom laboratóriu v súlade s akceptované normy. Metodologické črty tejto štúdie sú popísané v priebehu prezentácie získaných výsledkov.

Vždy, keď sa pripravuje dávka spór Bacillus stearothermophilus pre bioindikátory kontrolujúce sterilizáciu parou, testuje sa ich tepelná stabilita. Hotové biologické indikátory (asi 106 spór na indikátor) musia obsahovať životaschopné spóry po 5 minútach sterilizácie parou pri 120-121 °C, ale nie po 15 minútach sterilizácie za špecifikovaných podmienok. Výrobné série biologických indikátorov vyrábané našou inštitúciou spĺňajú tieto požiadavky. Naše skúsenosti zahŕňajú viac ako 70 výrobných šarží spór B. stearothermophilus, z ktorých boli vyrobené milióny biologických indikátorov. Každá séria biologických indikátorov bola opakovane testovaná na tepelnú stabilitu, v súvislosti s ktorou sa nahromadilo značné množstvo materiálu. Podarilo sa nám uistiť sa, že po 15 minútach autoklávovania pri 121 °C sa v biologických indikátoroch zvyčajne nezistili životaschopné spóry, avšak v ojedinelých prípadoch z 10 indikátorov (spravidla sa takýto počet indikátorov bral na expozícia), 1 alebo 2 testy obsahovali živé spory.

Podľa medzinárodných noriem sa odporúča určiť počet spór v biologických indikátoroch po rôznych expozíciách pri 120-121 ° C, aby sa obsah indikátorov naočkoval na pevnom živnom médiu, a potom sa kultivuje v termostate a spočíta sa počet kolónie. Táto technika sa odporúča pri tých expozíciách, kde sa očakáva, že počet jednotiek tvoriacich kolónie (CFU) bude väčší ako 50 a menší ako 1000.

Pre tie expozície, pri ktorých sa očakáva, že priemerný počet spór v biologickom indikátore bude menší ako 1 (t. j. nie každý indikátor bude obsahovať životaschopné spóry), sa odporúča použiť rozdelenie vzácnych a náhodné udalosti je Poissonovo rozdelenie.

Nasleduje spôsob, ako použiť Poissonovu distribúciu na uvedené účely.
P x \u003d e -m * m x / x!
kde P x ​​je podiel biologických indikátorov so špecifickým počtom životaschopných spór x;
x je konkrétny počet sporov v ukazovateli;
X! — súčin celých čísel v postupnosti x (x-1) (x-2) ... [x-(x-1)];
m je priemerný počet spór v skupine biologických ukazovateľov;
e je exponent.

Ak určitý počet biologických indikátorov neobsahuje životaschopné spóry (x = 0), potom
P 0 \u003d k / n,
kde k je počet biologických indikátorov, ktoré neobsahujú živé spóry;
n je počet biologických ukazovateľov v skupine.

Zoberme si logaritmus danej Poissonovej distribučnej rovnice:
ln P x \u003d ln (e -m * m x / x!).

Vzhľadom na to, že 0! \u003d 1 a m 0 \u003d 1, potom (ln k - ln n) \u003d -m; m = log n — log k.

Inými slovami, priemerný počet spór na biologický ukazovateľ v skupine sa rovná rozdielu medzi prirodzenými logaritmami počtu všetkých biologických ukazovateľov a počtom biologických ukazovateľov bez živých spór. Platnosť vyššie uvedenej metódy na stanovenie priemerného počtu spór na biologický indikátor je potvrdená naočkovaním na agar (obr. 8).

Ryža. 8. Výsledky testovania biologických indikátorov so spórami sušenými na chromatografickom papieri (10 6 spór biologického indikátora, sterilizácia parou 121 °C - 45 min., typ indikátora Attest). Na osi y je znázornený počet biologických ukazovateľov. V ľavom stĺpci sú výsledky testov pre konvenčné biologické indikátory, v pravom stĺpci sú pre biologické indikátory s novým živným médiom. Tieňovaná časť stĺpcov predstavuje počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami.

Uvádzame príklad výpočtov. Do sterilizačnej komory sa umiestnilo 20 biologických indikátorov a po expozícii sa do každého biologického indikátora nalialo farebné živné médium (séria živných pôd používaných v našom laboratóriu reagovala zmenou farby na prítomnosť jednotlivých živých spór v biologickom indikátore, keď kultivované v termostate pri 55 o C). Z 20 biologických indikátorov použitých v príklade bola v 14 zaznamenaná zmena fialovej farby živného média na žltú a v 6 indikátoroch zostala farba média po kultivácii v termostate rovnaká. Preto m \u003d (ln 20 - ln 6) \u003d 2,996 - 1,792 \u003d 1,204. Teraz, ak chceme túto hodnotu m zahrnúť do súradnicového systému dekadického logaritmu počtu spór v biologických ukazovateľoch a čase, musíme vziať lg m = lg 1,204 = 0,081.

Pri početných stanoveniach tepelnej odolnosti spór bol príležitostne pozorovaný jav, keď 1-2 biologické indikátory z 10 obsahovali životaschopné spóry po 15-minútovom autoklávovaní. V niektorých experimentoch sme rozšírili množinu expozícií o expozície 20, 25, 30 a 35 minút. autoklávovanie. V niektorých, hoci zriedkavých prípadoch, sme zaznamenali existenciu živých spór v biologických ukazovateľoch po relatívne dlhých expozíciách autoklávovaním. Interpretáciu takýchto neočakávaných výsledkov ako náhodných nebolo možné uznať za legitímnu, pretože nemala žiadne vysvetlenie. Najpravdepodobnejším predpokladom bola existencia tepelne odolných jedincov v populácii spór, ktoré preto zostávajú životaschopné po dlhodobých expozíciách. Tento predpoklad sa však nepotvrdil, pretože potomstvo spór zo zažltnutých biologických indikátorov po 20-40 minútach autoklávovania malo rovnakú úroveň tepelnej stability ako počiatočná suspenzia spór.

K opísanému problému pribudol ďalší, spojený s pochybnosťami o lineárnej závislosti logaritmu počtu spór v biologickom ukazovateli od času sterilizácie. Človek nadobudol dojem, že ak je pozorovaná lineárna závislosť, potom sa objavuje len v určitých častiach grafu. Pokiaľ ide o podmienky zmeny farby živného média v biologických indikátoroch po autoklávovaní, v praxi boli obmedzené na 48 hodín (táto lehota sa odporúča v pokynoch, ktoré sú v obehu v Rusku, USA a európskych krajinách, hoci 10 rokov predtým, keď sa nepoužívali farebné médiá, pozorovanie výskytu zákalu v živnom bujóne trvalo najmenej 7 dní). V našich experimentoch sa však zistilo, že k zmene farby živnej pôdy počas kultivácie v termostate dochádza nielen v prvých 48 hodinách, ale aj v nasledujúcich dňoch, najmä v tých biologických ukazovateľoch, ktoré boli v sterilizačnej komory na pomerne dlhú dobu.

Ak sme v minulých rokoch používali ako nosič spór inzulínové liekovky, tak v nedávne časy prešiel na skúmavky Eppendorf vyrobené z polypropylénu s objemom 1,5 ml. Táto nádoba sa ukázala ako oveľa vhodnejšia ako nosič spór ako injekčné liekovky s inzulínom.

Vzhľadom na vyššie uvedené sme sa v tejto štúdii rozhodli použiť biologické indikátory pripravené nasledovne. Suspenziu spór, ktorú sme použili na výrobu výrobnej série biologických indikátorov, sme zriedili destilovanou vodou tak, aby sa požadovaný počet spór objavil v 0,02 ml, ktoré bolo pridané do každej skúmavky Eppendorf. Potom sa biologické indikátory nechali 24 hodín. pri 37 °C, aby sa spóry vysušili, potom sa biologický indikátor (Eppendorfova skúmavka zostala otvorená) vložil do špeciálneho vrecka od Wipack medical, vybaveného papierovým včasným indikátorom procesu sterilizácie. Po autoklávovaní sa do každého indikátora nalialo 0,5 ml farebného živného média a umiestnilo sa do termostatu pri 55 °C na 7 dní s dennou registráciou zmeny farby živného média na žltú. Ak sa tak stalo, existencia životaschopných spór bola rozpoznaná na konci doby autoklávovania.

Je ľahké vidieť, že počet biologických indikátorov, v ktorých bolo možné detekovať životaschopné spóry, závisel od počiatočného počtu indikátorov umiestnených v sterilizačnej komore. Ak biologické indikátory napodobňujú zdravotnícke pomôcky kontaminované mikroorganizmami, potom môžeme mať podozrenie, že podiel biologických indikátorov s životaschopnými spórami po sterilizácii môže zodpovedať podielu zdravotníckych pomôcok, ktoré zostávajú nesterilné. To je pointa použitia kontroly sterilizácie pomocou biologických indikátorov. Ale ich počet sa nedá zvýšiť na veľké počty, aspoň nie na počet sterilizovaných zdravotníckych pomôcok. S normami prijatými v Rusku sa 5 biologických indikátorov umiestňuje do relatívne malých autoklávov a až 13 do veľkých autoklávov. Zdá sa nám, že uvedený počet biologických indikátorov na štúdium defektov sterilizácie zjavne nestačí, preto sa v nižšie uvedených experimentoch použilo oveľa väčšie množstvo indikátorov na kontrolu sterilizácie.

V našich experimentoch sme teda použili nielen väčší počet biologických indikátorov ako je bežné, ale ich aj dlhšie pozorovali po sterilizácii počas kultivácie v termostate. Nakoniec sme použili nielen počet spór v ukazovateli, ktorý sa odporúča v normách (10 6 spór), ale aj o niečo menej (10 5) a o niečo viac (10 7). V sterilizačnej komore autoklávu sa vo väčšine prípadov neumiestňovalo nič iné ako biologické indikátory, aby sa predišlo obvineniam z preplnenia komory.

Údaje uvedené na obr. 1 ukazujú, že jednotlivé indikátory obsahovali životaschopné spóry aj po 120 minútach autoklávovania (je samozrejmé, že ak by sa použilo 5 alebo 10 biologických indikátorov, táto skutočnosť by nebola „zaznamenaná“). V tomto experimente sme použili spóry dvoch kmeňov B. stearothermophilus - VKM-718 (produkčný kmeň používaný nielen v Rusku, ale aj v iných krajinách, ako aj nedávno izolovaný kmeň KK so zvýšenou tepelnou odolnosťou). Prekvapivo sa niekedy po 45 alebo 60 minútach stretli indikátory s životaschopnými spórami. autoklávovanie aspoň po 30 minútach sterilizácie.

spóry B. stearothermophilus
VK-718 QC
10 7 2,2*10 6
10 6 1,1*10 6
10 5 0,7*10 6

Ryža. Obr. 1. Vplyv parnej sterilizácie v autokláve VK-75 (121 o C bez vákua v sterilizačnej komore) na životaschopnosť spór B. stearothermophilus (kmeň VK-718 a KK). Na zvislej osi je počet biologických ukazovateľov pre každú expozíciu (25 biologických ukazovateľov), na vodorovnej osi je čas sterilizácie (min.). Tieňovaná časť stĺpcov predstavuje počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami.

Rozpor medzi získanými údajmi a predpokladanými údajmi nás prinútil vyvinúť nové živné médium, ktorého možnosti v prejave životaschopných spór v biologických ukazovateľoch, ktoré prešli sterilizáciou, boli oveľa vyššie ako u predchádzajúcej živnej pôdy.

Spolu s predchádzajúcim živným médiom boli testované dve nové formulácie a jedna z nich sa ukázala ako veľmi informatívna (obr. 2).


Ryža. Obr. 2. Vplyv živnej pôdy na prejav životaschopnosti spór B. stearothermophilus v biologických indikátoroch (nosiče - inzulínové ampulky alebo Eppendorfove skúmavky) po sterilizácii parou (121 o C - 45 min.). n je počet biologických indikátorov v každej expozícii, tieňovaná časť stĺpcov je počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami. A — pokusy s výrobnou dávkou 71, počet spór v biologickom ukazovateli 3,4*10 5 , B — pokusy s výrobnou dávkou 69, počet spór v biologickom ukazovateli 10 6 . Čísla 1, 2, 3 označujú vzorky s rôznymi živnými médiami.

Spolu so zvýšeným počtom biologických indikátorov, predĺžením doby pozorovania indikátorov kultivovaných v termostate, sa teda použilo nielen akceptované živné médium, ale aj nové médium, ktoré sa ukázalo byť informatívnejšie ako predchádzajúce. Za zmienku stojí, že do jedného vrecka boli vložené tri biologické indikátory s rôznym počtom spór, vrecká boli náhodne umiestnené do sterilizačnej komory, po sterilizácii boli biologické indikátory súčasne naplnené rovnakou sériou živného média a ponechané v rovnakom termostate . Ak sa použili staré a nové živné médiá, počet paketov sa zdvojnásobil.

Ak boli v predchádzajúcich experimentoch biologické indikátory autoklávované pri 121 o C počas 45 minút, potom v experimente znázornenom na obr. 3 boli biologické indikátory sterilizované parou pri teplote 132 o C (oba režimy boli realizované v autokláve domácej výroby — VK-75).

Ryža. 3. Vplyv parnej sterilizácie pri 132 o C na biologické ukazovatele v závislosti od počiatočného počtu spór v nich (10 5, 10 6 a 10 7 a času autoklávovania biologických ukazovateľov (5, 10, 20, 40) Obr. a 60 min.). Na osi y - počet biologických indikátorov v experimente. V každom páre stĺpcov vľavo - výsledky stanovenia počtu biologických indikátorov s životaschopnými spórami, keď boli kultivované v normálnom živnom médiu , vpravo - počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami, keď boli kultivované v novom živnom médiu.počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami.

V znázornenom na obr. 3 údaje využívali rôzne expozície vrátane tej (20 min.), ktorá sa odporúča v príslušnom režime. Je možné poznamenať, že pomocou nového živného média a niekedy aj s použitím predchádzajúceho bolo možné po autoklávovaní počas 20–60 minút detegovať životaschopné spóry v biologických indikátoroch. Okrem toho sa zdá, že čas autoklávovania uvedený na obr. 3 limity, významne neovplyvnili podiel biologických ukazovateľov s životaschopnými spórami.

Získané výsledky analýzy biologických ukazovateľov po sterilizácii nás podnietili charakterizovať režimy parnej sterilizácie, ktoré sú akceptované v Rusku (obr. 4). Prvé dva režimy boli vykonané v prístroji VK-75 a tretí a štvrtý - v prístroji spoločnosti "MMM" (Nemecko). Je samozrejmé, že všetky sterilizačné prístroje použité v našich štúdiách boli v bezchybnom technickom stave.

Ryža. 4. Vplyv živného média na výsledky bakteriologickej kontroly sterilizácie. Na osi y je znázornený počet biologických indikátorov v experimente. Nad každým párom stĺpcov je uvedený počiatočný počet spór v biologických indikátoroch. V každom páre stĺpcov vľavo - výsledky stanovenia počtu biologických indikátorov s životaschopnými spórami, keď boli kultivované v normálnom živnom médiu, vpravo - počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami, keď boli kultivované v novom živné médium. Tieňovaná časť stĺpca je počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami. Režimy sterilizácie sú uvedené nad stĺpcami.

Je ľahké vidieť, že žiadny z testovaných sterilizačných režimov nebol sprevádzaný úplným uvoľnením biologických indikátorov z životaschopných spór B. stearothermophilus, najmä pri použití nového živného média. Je potrebné poznamenať, že percento biologických indikátorov s životaschopnými spórami sa mierne zvyšuje, ak sa pozorovanie farby predchádzajúceho živného média v termostate nevykonáva počas 48 hodín, ale počas 72 hodín. (obr. 5, podľa obr. 1 pre kmeň VKM-718).

Ryža. 5. Dynamika klíčenia biologických indikátorov (10 5, 10 6, 10 7 spór v biologických indikátoroch) po autoklávovaní pri 121 o C 30, 45, 60, 90 a 120 min. Pre každú vzorku bolo odobraných 25 biologických indikátorov. Klíčenie biologických indikátorov bolo zaznamenané po 18, 24, 48 a 72 hodinách ich kultivácie pri 55 o C. Stĺpce označujú počet biologických indikátorov s životaschopnými spórami za dané obdobie zaznamenávania výsledkov.

Použitie nového živného média jednoznačne urýchľuje objavenie sa maximálneho počtu biologických indikátorov s životaschopnými spórami po sterilizácii pri kultivácii v termostate pri 55 o C (obr. 6).

Ryža. 6. Dynamika klíčenia biologických indikátorov (10 5 alebo 10 6 spór v biologických indikátoroch) po autoklávovaní (121 o C, 45 min.). Pre každú vzorku bolo odobraných 20 biologických indikátorov. Klíčenie bolo zaznamenané po 18, 24, 48 alebo 120 hodinách. kultiváciu pri 55 o C v rôznych živných médiách.

Ukázalo sa, že sterilizácia plynom s formaldehydom (MMM, Nemecko) neuvoľňuje biologické indikátory z životaschopných spór B. stearothermophilus (obr. 7.)

Sterilizácia formaldehydom 75 o C - 10 min.




Ryža. 7. Vplyv živnej pôdy na výsledky bakteriologickej kontroly sterilizácie. Označenia v hornej časti obrázku sú rovnaké ako na obr. 4. Dynamika rastu biologických ukazovateľov je znázornená v spodnej časti obrázku. Pod stĺpcami je čas kultivácie v dňoch. Označenia sú rovnaké ako na obr. 5.

Zdá sa však, že výsledky sterilizácie formaldehydom, prinajmenšom pri použití rovnakého kultivačného média, sú o niečo lepšie ako výsledky kontrol sterilizácie parou.

V našich experimentoch sa spóry v biologických indikátoroch sušili priamo v skúmavkách Eppendorf, zatiaľ čo v amerických biologických indikátoroch (Attest) firmy 3M sa spóry sušili na prúžkoch papiera a v tejto forme sa vložili do plastových nádob. ktoré boli vybavené ampulkou s farebnou živnou pôdou. Po sterilizácii sa ampulka rozbije jednoduchým stlačením tela indikátora, živné médium sa naleje na papier so sušenými spórami a následne pri kultivácii v termostate je možné fixovať životaschopné spóry, ak sa farba média zmení na žltú . Vyrobili sme nejaký druh indikátora Atest a vyvinuli sme ich pomocou starých a nových živných médií. Ukázalo sa, že použitie nového živného média výrazne zlepšilo výsledky biologického indikátora podobného Attestu.

V našich experimentoch sme teda spravidla zaviedli 120 biologických indikátorov (každé balenie s biologickými indikátormi zaberalo objem asi 0,1 l) s rôznymi počiatočnými koncentráciami spór. Polovica ukazovateľov bola študovaná so starým živným médiom a druhá polovica s novým. Vo väčšine prípadov sa tie biologické indikátory, ktoré sa skúmali s použitím nového živného média, po autoklávovaní najskôr naplnili malým objemom kvapaliny. Polovica tohto objemu sa použila na naočkovanie na živný agar a do zvyšku sa pridalo živné médium. Kultivácia sa uskutočňovala v termostate pri 55 °C. Vyrastené kolónie sa spočítali.

Tieto pozorovania tvorili základ pre porovnanie distribúcie agarových Petriho misiek z hľadiska počtu vyrastených kolónií s teoretickou Poissonovou distribúciou (prítomnosť misiek bez pestovaných kolónií umožnila vypočítať priemernú hodnotu počtu kolónií na jednu misku , a potom určte teoretické rozdelenie z tabuliek a porovnajte ho s pozorovaným v experimente) . Vychádzali sme z pozície, že súčet Poissonových rozdelení je tiež Poissonovým rozdelením; do výpočtov boli zahrnuté údaje o všetkých troch skupinách biologických ukazovateľov (105, 106, 107). Preto bolo v každej skupine 60 Petriho misiek.

Z údajov uvedených na obr. 9. vyplýva, že pre všetky študované režimy rozdelenie Petriho misiek podľa počtu vypestovaných kolónií zodpovedalo Poissonovmu rozdeleniu. A to zase naznačuje, že životaschopné spóry, ktoré zostali po sterilizácii, boli samostatné entity nezávislé na sebe. Výnimkou boli údaje o režime parnej sterilizácie 121 o C - 45 min., kde sa teoretická krivka výrazne odchyľovala od získanej v experimente. V tomto druhom prípade treba priznať, že tieto nezrovnalosti sú spôsobené tvorbou hrudiek alebo zhlukov spór v biologickom indikátore, ktoré sa rozpadajú na jednotlivé spóry, keď sa obsah preosieva na povrchu agaru. Tak či onak, ale niet pochýb o tom, že po sterilizácii zostávajú jednotlivé spóry životaschopné v biologických ukazovateľoch, zatiaľ čo drvivá väčšina spór odumrie. Prinajmenšom takýto obraz vzniká pri zvolenom počte biologických indikátorov umiestnených v sterilizačnej komore.

Ryža. 9. Zhoda skutočných materiálov (počet kolónií na agare) pri rôznych režimoch parnej a plynovej sterilizácie s distribúciou zriedkavých a náhodných udalostí. Na osi y je znázornený celkový počet biologických ukazovateľov sterilizácie (súčet výsledkov pre tri skupiny biologických ukazovateľov s 10 5 , 10 6 a 10 7 spórami). Vodorovná os ukazuje počet CFU (jednotky tvoriace kolónie) pestovaných na agare po inokulácii biologického indikátorového materiálu. Plná čiara sú skutočné údaje, prerušovaná čiara je vypočítaná čiara v súlade s rozdelením náhodných a zriedkavých udalostí (neprítomnosť prerušovanej čiary na grafe označuje zhodu vypočítaných a experimentálnych údajov).

Jedným z úžasných paradoxov je výrazná odchýlka experimentálnych údajov od lineárnej závislosti logaritmu počtu spór v biologických ukazovateľoch od času sterilizácie. Údaje o detekcii životaschopných spór v neskoršom termíne zo začiatku sterilizácie vôbec nezodpovedali prevládajúcim predstavám. A údaje o častejšom zisťovaní životaschopných spór v neskoršom termíne ako v skoršom čase, čo bolo zaznamenané v niektorých experimentoch, vôbec nezapadali do povedomia. Stalo sa to dokonca aj vtedy, keď po 15-minútovej expozícii neboli spóry v biologických indikátoroch životaschopné a po 45-minútovej expozícii sa v tom istom experimente našli aj jednotlivé, no životaschopné spóry.

V tomto článku uvádzame našu interpretáciu procesu smrti spór počas sterilizácie. Tu prezentovaný predpoklad ešte nemá dostatočné dôkazy, ale vysvetľuje paradox spomínaný vyššie.

Predpokladáme, že závislosť logaritmu počtu spór v biologických ukazovateľoch od času sterilizácie nie je lineárna, ale zvlnená. Podľa obr. 1 sme uviedli našu interpretáciu závislosti logaritmu počtu spór od času sterilizácie pomocou tých priemerných hodnôt počtu spór v biologických ukazovateľoch, ktoré boli vypočítané pomocou Poissonovho rozdelenia (obr. 11, 12 ). Najprv však uvádzame závislosť zóny na určenie priemerných hodnôt od počtu biologických ukazovateľov (obr. 10).

Ryža. 10. Rozsah Poissonovho rozdelenia na určenie stredných hodnôt (m) pre rôzny počet biologických ukazovateľov v skupine (čísla v strede obrázku).

Ryža. 11. Vplyv parnej sterilizácie v autokláve VK-75 (121 o C bez vákua v sterilizačnej komore) na životaschopnosť spór B. stearothermophilus, kmeň VK-718. Vlnité krivky – interpretácia aktuálnych údajov. Na osi y je znázornený dekadický logaritmus priemernej koncentrácie spór v biologickom indikátore, na vodorovnej osi je zobrazený čas sterilizácie (min.). Horizontálne čiary obmedzujú rozsah Poissonovho rozdelenia na určenie priemerov.

Ryža. 12. Vplyv parnej sterilizácie v autokláve VK-75 (121 o C bez vákua v sterilizačnej komore) na životaschopnosť spór B. stearothermophilus, kmeň KK. Vlnité krivky – interpretácia aktuálnych údajov. Na osi y je znázornený dekadický logaritmus priemernej koncentrácie spór v biologickom indikátore, na vodorovnej osi je zobrazený čas sterilizácie (min.). Horizontálne čiary obmedzujú rozsah Poissonovho rozdelenia na určenie priemerov.

Na stanovenie priemernej hodnoty je potrebné mať biologické ukazovatele bez životaschopných spór a na vyznačenie hraníc pásma priemerných hodnôt je potrebné, aby aspoň jeden biologický ukazovateľ obsahoval životaschopné spóry, alebo naopak, aby aspoň jeden biologický indikátor je bez životaschopných spór. Z porovnania rôznych zón možno usúdiť, že s nárastom počtu biologických ukazovateľov sa v najväčšej miere zvyšujú možnosti spodnej zóny, zatiaľ čo jej horná časť sa mierne rozširuje. Poissonovo rozdelenie je tabuľkové a pomocou vyššie uvedeného je možné vypočítať potrebný počet biologických indikátorov, čo umožňuje dúfať v detekciu oveľa väčšieho počtu životaschopných spór po sterilizácii.

Prezentácia skutočných údajov pomocou zvlnených kriviek umožňuje pochopiť, prečo sa biologické ukazovatele s životaschopnými spórami v niektorých experimentoch tak bizarne zoraďujú na grafoch. Koniec koncov, výber bodov na časovej osi je náhodný, nesúvisí so vzormi smrti spór a nezohľadňuje očakávaný vlnitý charakter. Okrem toho sa môže stať, že dno. časť vlny okolo 15 min. môže byť mimo možnosti detekcie životaschopných spór v biologických ukazovateľoch (s vybraným počtom z nich), zatiaľ čo pri dlhšej expozícii sa výber časového bodu zhodoval s hornou časťou vlny a umožnil zistiť biologické ukazovatele s životaschopné spóry.

Domnievame sa, že závislosť medzi logaritmom počtu spór v biologickom indikátore od času sterilizácie odráža tlmený vlnový samooscilačný proces spojený so skutočnosťou, že nielen spóry, ale aj podmienky, ktoré ich obklopujú, určujú výsledok. sterilizácie.

Nasledujúca tabuľka sumarizuje výsledky kontrol rôzne druhy sterilizácia pomocou biologických indikátorov v zariadeniach používaných v praktických zdravotníckych zariadeniach podľa režimov, ktoré stanovujú existujúce normy. Využili sme celý cyklus sterilizácie, značné množstvo biologických indikátorov, ich dlhodobú kultiváciu po sterilizácii, staré a nové živné pôdy.

Súhrnná tabuľka výsledkov biologickej kontroly sterilizácie

№
p/p 		Sterilizačný prístroj Sterilizácia Biologické ukazovatele
názov pevný-
výrobca,
krajina 		rok
uvoľniť 		objem
sterilizované-
racionálny
kamery 		vyhliadka režim test-
kultúra 		číslo
spor 		číslo
indika-
tori v
sterilizácia 		% S
vitálny
vlastné
spory
po
sterilizácia
obyčajný
živiť.
streda 		Nový
živiť.
streda
1. GK-100-ZM Tyumensky závod
medicínske vybavenie,
Rusko		 1993 100 l Para 121 °C,
45 min.		 B. stearo-
themophilus		 10 6 40 0 10
2. « « « « « « « « 40 10 25
3. BK-75 « « 75 l « « « 3*10 5 120 20 45
4. « « « « « « « 10 6 60 25 65
5. « « « « « « « 10 5 80 25 75
10 6 80 3 100
10 7 80 13 100
6. « « « « « « « 10 5 75 0 7
10 6 75 0 8
10 7 75 20 20
7. « « « « « « « 10 5 75 0 12
10 6 75 0 13
10 7 75 20 22
8. GK-100-ZM « « 100 l « « « 10 5 40 15 20
10 6 40 0 15
10 7 40 0 35
9. BK-75 « 1992 75 l « 121 °C,
45 min.		 « 10 5 40 0 5
10 6 40 0 25
10 7 40 0 25
10. « « « « « « « 10 6 40 20 50
10 7 40 5 60
11. BK-75 « 1992 75 l Para 121 °C,
45 min.		 B. stearo-
themophilus		 10 5 40 30 95
10 6 40 50 90
10 7 40 15 100
12. « « « « « « « 10 4 40 35 75
10 6 40 25 35
10 7 40 50 40
13. GK-100-3M**) « 1988 100 l « « « 10 5 40 10 10
10 6 40 10 10
10 7 40 10 15
14. GK-100-3M**) « « « « « « 10 5 40 5 0
10 6 40 0 10
10 7 40 5 0
15. GKD-560 "LAD"
Rusko		 1996 560 l « 120 °C,
20 minút.		 10 5 40 10 5
10 6 40 55 10
10 7 40 65 55
16. Securox "MMM",
Nemecko		 1993 0,5 m 3 « « « 10 5 40 15 30
10 6 40 20 45
17. « « « « « « « 10 5 40 25 70
10 6 40 10 75
18. « « « « « « « 10 5 40 10 80
10 6 40 0 80
10 7 40 10 75
19. Hrad
m/s 3622		 USA 1997 680 l « « « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 5
10 6*) 0 0 —
10 7 40 0 0
20. Selectomac "MMM",
Nemecko		 1993 100 l Para « « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 10
10 7 40 5 20
21. GK-100-3M**) Ťumen. w-d
medooor.,
Rusko		 1993 100 l « 132 °C,
20 minút.		 « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 5
10 7 40 10 0
22. VK-75 « 1992 75 l « « « 10 5 40 5 40
10 6 40 5 60
10 7 40 5 75
23. Selectomac "MMM",
Nemecko		 1993 100 l Para 134 °C,
5 minút.		 B. stearo-
themophilus		 10 5 40 0 0
10 6 40 0 20
10 7 40 5 10
24. GKD-560 "LAD"
Rusko		 1996 560 l Para 134 °C,
5 minút.		 « 10 5 40 45 25
10 6 40 50 35
10 7 40 35 100
25. Securex "MMM",
Nemecko		 1993 500 l « « « 10 5 40 20 55
10 6 40 20 45
10 7 40 10 70
26. Hrad
m/s 3622		 USA 1997 680 l « 134 °C,
10 min.		 « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 20
10 6*) 20 0 —
10 7 40 20 25
27. « « « « « « « 10 5 40 0 25
10 6 40 5 15
10 7 40 5 30
28. combimak "MMM",
Nemecko		 1993 70 l Plyn
(formálne
dehyd)		 75 °C
10 min.		 « 10 5 40 5 20
10 6 40 10 45
10 7 40 5 20

Poznámka:*) — Na kontrolu sme použili biologické indikátory Biosign od spoločnosti Castle s obsahom značkového živného média.
**) - V predvečer testov bola dodaná nová sterilizačná komora.

Najčastejším príznakom výsledkov kontroly sterilizácie je, že nebolo možné overiť, že všetky biologické indikátory boli na konci sterilizačného času sterilné. Táto najdôležitejšia kontrola teda svedčí o neefektívnosti v akceptovanom zmysle sterilizácie a o najspoľahlivejšej parnej sterilizácii. Keďže dávku 10 7 spór v biologickom indikátore možno rozpoznať ako príliš vysokú, odporúča sa samostatne posudzovať výsledky kontroly sterilizácie s biologickými indikátormi obsahujúcimi 10 5 a 10 6 spór. Pri použití nového živného média obsahovali niektoré biologické indikátory po sterilizácii vo všetkých prípadoch životaschopné spóry. Ak sa použilo rovnaké živné médium, potom v troch prípadoch pri ovládaní prístroja VK-75 (30%) biologické indikátory neobsahovali životaschopné spóry. Častejšie boli podobné výsledky zaznamenané pri kontrole zariadení vyrobených v zahraničí, čo môže slúžiť ako určitý náznak kvalitatívnej prevahy nad ruskými autoklávmi.

Dôvody tohto stavu sú nejasné, rovnako ako možné návrhy na zlepšenie sterilizácie. Čo sa týka používania papierových sterilizačných indikátorov, ťažko možno očakávať viac, ako len sledovanie stavu niektorých technické údaje sterilizačným prístrojom, najmä na začiatku procesu. Úplné spoliehanie sa na papierové indikátory môže viesť k nesprávnym záverom o efektívnej sterilizácii.

Doteraz sme hovorili o osude biologických ukazovateľov v procese sterilizácie, ktoré nemusia vo všetkých prípadoch odrážať znaky samotnej sterilizácie zdravotníckych pomôcok. Na sterilizáciu boli 1 cm dlhé kúsky polyvinylchloridových rúrok brané ako „zdravotnícke produkty“, po dôkladnom umytí boli naočkované spórami B. stearothermophilus v objeme 0,02 ml, vysušené a podrobené predsterilizačnému čisteniu vyvarením v 2. % roztoku sódy počas 15 minút. . Po premytí v sterilnej destilovanej vode sa segmenty skúmavky sterilizovali nasledujúci deň vo vrecúškach (121 °C - 45 minút), potom sa každý segment umiestnil do sterilnej Eppendorfovej skúmavky a naplnil sa živným médiom. Kultivácia segmentov sa uskutočňovala v termostate pri 55 °C. Kontrolné segmenty boli naočkované spórami, ale neboli podrobené predsterilizácii. Inými slovami, v tomto experimente sa napodobňovali experimenty s biologickými indikátormi.

Získané výsledky sú prekvapujúce svojou neočakávanosťou - segmenty skúmaviek ošetrené roztokom sódy pri 100 o C boli po sterilizácii rovnako znečistené, pretože neboli podrobené predbežnému čisteniu, ktoré v súčasnosti zaujíma dôležité miesto v sterilizačnej technike .

Ryža. 13. Výsledky sterilizácie segmentov hadíc z PVC po ich predsterilizačnom čistení a bez neho. V každom páre stĺpcov vľavo - počet segmentov skúmavky s životaschopnými spórami pri kultivácii s obvyklým živným médiom, vpravo - s novým živným médiom. Čísla nad stĺpcami predstavujú počet spór B. stearothermophilus pôvodne aplikovaných vnútorný povrch rúrkové časti.

V inom experimente sa kúsky hadičiek zo silikónovej gumy s veľkosťou 1 cm po dôkladnom umytí v destilovanej vode naočkovali spórami B. stearothermophilus a potom sa nechali 1 hodinu pri teplote miestnosti. Na konci určeného času sa experimentálne segmenty po dobu 30 minút. ponorené do 0,2% roztoku dezinfekčného prostriedku "Septabic" boli segmenty dôkladne umyté v destilovanej vode, vysušené na filtračnom papieri. Kontrolné segmenty boli naočkované spórami, ale neboli ošetrené Septabicom. Nasledujúci deň sa všetky segmenty umiestnili do vreciek a sterilizovali v autokláve (121 °C - 45 minút), potom sa každý segment umiestnil do Eppendorfovej skúmavky, naplnil sa živným médiom a kultivoval sa pri 55 °C.

V experimente (obr. 14) boli výsledky testu o niečo lepšie ako v predchádzajúcom, keďže stále existoval rozdiel v podiele naklíčených experimentálnych a kontrolných rezov hadičiek zo silikónovej gumy, tieto rozdiely však neboli pôsobivé. V každom prípade sa sterilizácia makiet zdravotníckych pomôcok aj po predsterilizačnom čistení ukázala ako neúčinná. A to aj napriek tomu, že je oveľa jednoduchšie spracovať malé kúsky rúrok ako veľké a zložité výrobky, kde sú prípadné miesta kontaminácie mikroorganizmami horšie dostupné pre dezinfekčné roztoky.

Ryža. 14. Výsledky sterilizácie segmentov silikónovej trubice po ich predsterilizačnom čistení a bez neho. V každom páre stĺpcov vľavo - počet segmentov skúmavky s životaschopnými spórami pri kultivácii s obvyklým živným médiom, vpravo - s novým živným médiom. Čísla nad stĺpcami ukazujú počet spór B. stearothermophilus pôvodne aplikovaných na vnútorný povrch segmentov skúmavky.

Vzhľadom na nezvyčajný charakter získaných výsledkov je potrebné zabezpečiť, aby nedošlo k žiadnym technickým chybám. Živné agarové platne boli umiestnené tak v priestoroch, ako aj v digestore s laminárnym prúdením, ale baktérie B. stearothermophilus neboli nikdy izolované, ani neboli izolované zo živného média a iných použitých zložiek (v každom experimente kultivačné médium a destilovaná voda na 10 agare misky a 10 Eppendorfových skúmaviek so živným médiom, ale bezvýsledne). Predpoklad, že počet baktérií v biologických ukazovateľoch sa počas sušenia zvyšuje, sa nepotvrdil (je známe, že B. stearothermophilus sa pri 37 o C nemnoží).

Získané výsledky sú teda sklamaním, no stále, aspoň pre niektorých autorov, očakávaným. Z obrovského množstva literatúry o tepelnej inaktivácii spórových baktérií, vrátane základného výskumu, je našej interpretácii najbližšia monografia Moonblitna, Talrozea a Trofimova, ktorí nerobili experimenty a používali iba literárne údaje. Títo autori, ktorí vysvetľujú tepelnú inaktiváciu spór prostredníctvom tepelného poškodenia životne dôležitých proteínov a subletálneho poškodenia membrány, vyjadrili obavy z účinnosti sterilizácie: „... štandardné podmienky tepelný efekt(120 o C, 30 min.) v niektorých prípadoch neposkytujú vysokú spoľahlivosť sterilizácie“, „... existuje zásadné nebezpečenstvo obnovy a rozmnožovania v ľudskom organizme mikroorganizmov, ktoré boli vyhlásené za mŕtve.“ Podľa našich údajov sú aj také obligátne a nepatogénne termofily ako B. stearothermophilus schopné obmedzeného rozmnožovania pri 37 o C, ak sa do živného média pridá ľudská krv.

Nielen biologické indikátory občas obsahovali životaschopné spóry po sterilizácii, ale aj modely zdravotníckych pomôcok kontaminovaných spórami. Navyše predsterilizačné ošetrenie makiet roztokom vriacej sódy alebo 0,2% roztokom prípravku Septabic nebolo sprevádzané dostatočným efektom - sterilizácia bola neúčinná.

Výzvou je teraz vyvinúť nové metódy, ktoré môžu zaručiť účinnosť sterilizácie. Naše pochopenie kinetiky sterilizačného procesu umožnilo testovať nové metodologické návrhy, ktoré sa ukázali ako sľubné, ale vyžadujú si komplexné overenie.

závery

1. Rozdelenie zriedkavých a náhodných udalostí umožňuje vypočítať priemerný počet spór na biologický indikátor pre podmienky, keď je počet životaschopných spór malý a nenachádzajú sa v každom ukazovateli.

2. Existujú dostatočné dôvody na pochybnosti o lineárnej povahe vzťahu medzi logaritmom počtu spór v biologických indikátoroch a časom od začiatku sterilizácie. Životaschopné spóry boli nájdené v biologických indikátoroch aj po 1-2 hodinách v autokláve pri regulovanej teplote.

3. Kontrolné experimenty parnej sterilizácie využívali značné množstvo biologických indikátorov, vysokoúčinné farebné rastové médiá a jednotýždňovú inkubačnú dobu, čo v konečnom dôsledku umožnilo detekovať životaschopné spóry v biologických indikátoroch po sterilizácii častejšie ako zvyčajne a v takmer väčšina režimov používaných v praxi.

4. Pri výseve obsahu biologických indikátorov po sterilizácii na hustú živnú pôdu sa v niektorých prípadoch našli jednotlivé kolónie B. stearothermophilus a vo väčšine prípadov rozdelenie agarových Petriho misiek podľa počtu kolónií presne zodpovedalo Poissonovmu distribúcia, čo znamenalo, že životaschopné spóry na sebe nezávisia a sú izolované a náhodné.

5. V niektorých experimentoch percento biologických indikátorov s životaschopnými spórami po dlhých obdobiach sterilizácie prevyšovalo percento po krátkych obdobiach sterilizácie, čo nenašlo uspokojivé vysvetlenie. Predpokladali sme vlnový charakter závislosti logaritmu počtu životaschopných spór v biologických ukazovateľoch od času sterilizácie.

6. Kontrola sterilizátorov inštalovaných v praktických zdravotníckych zariadeniach ukázala, že vo všetkých prípadoch jedna alebo druhá časť biologických indikátorov obsahovala životaschopné spóry po sterilizácii a pravdepodobnosť neuspokojivých výsledkov analýzy indikátorov sa ukázala byť oveľa vyššia, ako sa odporúča v r. normy.

7. Experimentálna parná sterilizácia segmentov skúmaviek vyrobených zo syntetických materiálov kontaminovaných spórami po predsterilizačnom čistení viedla k detekcii životaschopných spór vo viac ako polovici vzoriek, t. j. výsledky podobné tým, ktoré sa získali s biologickými indikátormi.

8. Počet životaschopných spór v biologickom indikátore po sterilizácii je pravdepodobnostná hodnota a ich detekcia okrem iného závisí od počtu indikátorov v sterilizačnej komore.

Literatúra

1. Abramová I.M. Nový vývoj v oblasti sterilizácie zdravotníckych pomôcok. Dezinfekčný kufrík, 1998, č. 3, s. 25.
2. Bolšev A.N., Smirnov N.V. Tabuľky matematickej štatistiky. M., 1965.
3. Vaškov V.I. Antimikrobiálne látky a dezinfekčné metódy pre infekčné choroby. M., 1977.
4. Guterman R.L. Prostriedky kontroly tepelnej sterilizácie zdravotníckych produktov. Diss. cand. med. vedy. M., 1993.
5. Kashner D. Život mikróbov v extrémnych podmienkach. M., 1981.
6. Levi M.I., Bessonova V.Ya., Livshits M.M. Použitie farebných kultivačných médií pri kontrole sterilizácie. Klinická laboratórna diagnostika, 1993, č. 2, s. 65-67.
7. Levi M.I. Analýza nepriaznivých účinkov parnej a vzduchovej sterilizácie. Dezinfekcia, 1996, č. 4, s. 58-63.
8. Levi M.I. Význam kontroly sterilizácie pomocou papierových indikátorov a biotestov. Dezinfekcia, 1997, č. 3, s. 24-28.
9. Levi M.I., Suchkov Yu.G., Ruban G.I., Mishchenko A.V. Nové formy bakteriálnych testov na kontrolu rôznych sterilizačných režimov. Tamže, s. 29-33.
10. Levi M.I., Suchkov Yu.G., Livshits M.M. Optimalizácia biologických testov na kontrolu sterilizácie parou. Dezinfekčný kufrík, 1998, č. 2, s. 30-33.
11. Levi M.I. Numerické stanovenie hodnoty D, času sterilizácie a výber kontrolných biotestov. Tamže, s. 34-42.
12. Usmernenia na ovládanie parných a vzduchových sterilizátorov. Ministerstva zdravotníctva ZSSR, zo dňa 28.2.1991 č.15/6-5.
13. Moonblit V.Ya., Talroze V.L., Trofimov V.I. Tepelná inaktivácia mikroorganizmov. M., 1985.
14. Ed. Ozeretskovsky N.A. a Ostanin G.I. Bakteriálne a vírusové terapeutické a profylaktické lieky. Alergény. Režimy dezinfekcie a sterilizácie polikliník. Petrohrad, 1998.
15. Suchkov Yu.G., Levi M.I., Bessonova V.Ya. Nový termofilný kmeň na bakteriologickú kontrolu parnej sterilizácie (správa 1), Dezinfekcia, 1996, č. 3, s. 28-33.
16. Biologické systémy na testovanie sterilizátorov - Časť 1: Všeobecné požiadavky. Európska norma, návrh pr EN 866-1.1995.
17. Farrell J., Rose A.N. vplyv teploty na mikroorganizmy. In: Termobiológia, s. 147-218. Akad. tlač, Londýn-New-York, 1967.
18. Graham G.S. Biologické ukazovatele pre nemocničnú a priemyselnú sterilizáciu, s. 54-72. In: "Sterilizácia medicínskeho produktu". Johnson a Johnson. Moskva, 1991.
19. Greene V.W. Zásady a prax dezinfekcie, konzervácie a sterilizácie. Oxford, 1982.
20. Medzinárodná norma ISO/DIS 14161. Sterilizácia produktov zdravotnej starostlivosti – návod na výber, použitie a interpretáciu výsledkov. 1998.
21. McCormick P.J., Scoville J.R. - Patent USA č. 4.743.537, 1988
22. Zdravotnícke pomôcky - Odhad populácie mikroorganizmov na produkte. Časť 2 návod, pr EN 1174-2.1994
23. Russel A.D. Zničenie bakteriálnych spór. Akad. tlač, Londýn-New-York, 1982.
24. Russel A.D. Základné aspekty mikrobiálnej odolnosti voči chemickým a fyzikálnym faktorom. In: "Sterilizácia zdravotníckeho produktu", v. V, s. 22-42. Johnson a Johnson, 1991.
25. Sussman A., Halvorson H. Spóry, ich dormancia a klíčenie. New-York-Londýn, 1967.
26. Wicks J.H., Foltz W.E. Európsky patent č. 0414 968 Al, 1991
27. Zhuravleva V.I., Bolshedvorskaya Z.F. Hodnotenie živných pôd na kultiváciu testovacích mikroorganizmov používaných na kontrolu účinnosti sterilizácie v autoklávoch. Laboratórne podnikanie, 1988, č. 11, s. 63-64.
28. Kalinina N.M., Shilova S.V., Motina G.L., Čajkovskaja S.M. Štúdium tepelnej odolnosti spórovej kultúry Vas. stearothermophilus používaný na prípravu bioindikátorov. Antibiotiká, 1982, č. 2, s. 117-120.
29. Kalinina N.M., Motina G.L., Čajkovskaja S.M., Shilova S.V. Príprava bioindikátorov na kontrolu účinnosti sterilizačných procesov. Antibiotiká, 1983, č. 10, s. 600-603.

MINISTERSTVO ZDRAVOTNÍCTVA RUSKEJ FEDERÁCIE

VŠEOBECNÉ FARMAKOPICKÉ POVOLENIE

SterilizáciaOFS.1.1.0016.15

Namiesto čl. GFXI, vydanie 2

Táto monografia všeobecného liekopisu stanovuje metódy a podmienky sterilizácie používané pri príprave sterilných liekov.

Sterilitou sa rozumie absencia životaschopných mikroorganizmov a ich spór.

Sterilizácia je overený proces používaný pri príprave sterilných dávkových foriem na uvoľnenie produktu, vybavenia, pomocných látok a obalov od živých mikroorganizmov a ich spór.

Pri zmene podmienok sterilizácie, vrátane zmeny objemu náplne sterilizátora, je potrebné vykonať opätovnú validáciu.

Nižšie opísané metódy sú použiteľné na inaktiváciu baktérií, kvasiniek a plesní.

Ak je to možné, výrobky sa sterilizujú v konečnom balení (konečná sterilizácia).

V prípadoch, keď konečná sterilizácia nie je možná, použite metódu membránovej filtrácie alebo získajte lieky za aseptických podmienok bez následnej sterilizácie konečného produktu. Dodatočne je možné vykonať spracovanie predmetu (napr. sterilizáciu gama žiarením) vo finálnom balení. Vo všetkých prípadoch musia obaly a uzávery zabezpečiť sterilitu lieku počas celej doby použiteľnosti.

ÚROVEŇ ZABEZPEČENIA STERILITY

Pre metódy opísané nižšie sa v prípade potreby uvádza úroveň zabezpečenia sterility (SAL).

Úroveň zabezpečenia sterilizácie sterilizačného procesu je stupeň zabezpečenia, s ktorým proces zabezpečuje sterilitu všetkých položiek v dávke. Pre daný proces je úroveň zabezpečenia sterility definovaná ako pravdepodobnosť prítomnosti nesterilnej položky v dávke. Napríklad SRL 10-6 znamená, že existuje pravdepodobnosť maximálne jedného životaschopného mikroorganizmu v sterilizovanej dávke 106 hotového produktu. Úroveň zabezpečenia sterility procesu sterilizácie pre konkrétny produkt sa stanovuje počas procesu validácie.

METÓDY A PODMIENKY STERILIZÁCIE

Sterilizácia sa môže uskutočniť jedným z nasledujúcich spôsobov alebo ich kombináciou.

  1. Tepelné metódy:
  • nasýtená para pod tlakom (autoklávovanie);
  • horúci vzduch (vzduchová sterilizácia).
  1. Chemické metódy:
  • plyny;
  • antiseptické roztoky.
  1. Sterilizácia filtráciou (cez filtre s požadovanou veľkosťou pórov).
  2. Radiačná sterilizačná metóda.

Použitie modifikácie alebo kombinácie týchto metód je povolené za predpokladu, že zvolený sterilizačný proces je validovaný, aby sa zabezpečila tak účinnosť procesu, ako aj integrita produktu, balenia a uzáverov.

Pre všetky metódy sterilizácie, vrátane použitia štandardných podmienok, potvrdiť ustanovenie nevyhnutné podmienky sterilizácia celého produktového radu, počas celého procesu sterilizácie prebieha monitorovanie v kritických fázach výroby.

Tepelná sterilizácia

Sterilizácia nasýtenou parou pod tlakom (autoklávovanie)

Sterilizácia nasýtenou parou sa vykonáva pri teplote
120 - 122 °C pri tlaku 120 kPa a pri teplote 130 - 132 °C pri tlaku 200 kPa. Táto metóda sa najčastejšie používa pre vodné roztoky a iné kvapalné liekové formy v hermeticky uzavretých, vopred sterilizovaných liekovkách, ampulkách alebo iných typoch obalov. Sterilizácia sa vykonáva v parných sterilizátoroch (autoklávoch). Štandardné podmienky sú zahrievanie pri teplote 120 - 122 °C počas 8-15 minút. Čas sterilizácie závisí od fyzikálno-chemických vlastností a objemu produktu, ako aj od použitého zariadenia (tabuľka 1).

Tabuľka 1 - Časy sterilizácie pre rôzne objemy roztoku

Tuky a oleje sterilizujeme pri teplote 120 - 122 °C 2 hodiny.

Výrobky zo skla, porcelánu, kovu, obväzy a pomocné materiály, v prípade potreby sanitárne technologické odevy, sa sterilizujú pri teplote 120 - 122 °C - 45 minút, pri
130 - 132 ° С - 20 minút. Na sterilizáciu gumených výrobkov použite prvý z týchto režimov.

Iné kombinácie času a teploty sú povolené, ak sa predtým dokázalo, že zvolený režim sterilizácie poskytuje potrebnú a reprodukovateľnú úroveň usmrtenia mikroorganizmov. Použité postupy by mali poskytovať úroveň zabezpečenia sterility maximálne 10-6.

Autokláv sa naplní tak, aby sa zabezpečila rovnomernosť teploty počas celej náplne. Počas procesu autoklávovania by sa mali zaznamenávať podmienky sterilizačného procesu (teplota, tlak a čas). Teplota sa zvyčajne meria pomocou termočlánkov umiestnených v kontrolných obaloch spolu s dodatočnými termočlánkami umiestnenými na najchladnejších miestach sterilizačnej komory, ktoré sú nainštalované vopred. Podmienky každého sterilizačného cyklu sa zaznamenávajú napríklad vo forme grafu teploty a času alebo iným vhodným spôsobom.

Na vyhodnotenie účinnosti každého sterilizačného cyklu je možné použiť chemické (termo-temporálne) aj biologické indikátory.

Sterilizácia horúcim vzduchom (sterilizácia vzduchom)

Pre túto tepelnú sterilizačnú metódu sú štandardnými podmienkami zahrievanie na teplotu aspoň 160 °C po dobu najmenej
2 hodiny

Na sterilizáciu žiaruvzdorných práškových látok (chlorid sodný, oxid zinočnatý, mastenec, biely íl atď.) alebo minerálnych a rastlinné oleje, tuky, lanolín, vazelína, vosk atď. teplota a čas sterilizácie sa nastavujú v závislosti od hmotnosti vzorky (tabuľky 2 a 3).

Tabuľka 2 - Podmienky sterilizácie pre žiaruvzdorné prášky

Tabuľka 3 - Podmienky sterilizácie pre minerálne a rastlinné oleje, tuky, lanolín, vazelínu, vosk atď.

Výrobky zo skla, kovu, porcelánu, sterilizačné filtračné jednotky s filtrami a zberače filtrátu sa sterilizujú pri teplote 180 °C 60 minút, alebo pri teplote 160 °C 2,5 hodiny.

Na sterilizáciu a depyrogenizáciu sklenených obalov sa bežne používa vzduchová sterilizácia nad 220°C. V tomto prípade by sa namiesto biologických indikátorov malo preukázať zníženie množstva tepelne odolných endotoxínov o 3 rády.

Môžu sa použiť kombinácie času a teploty, ak sa predtým dokázalo, že zvolený režim sterilizácie poskytuje potrebnú a reprodukovateľnú úroveň usmrtenia mikroorganizmov. Použité postupy by mali poskytovať úroveň zabezpečenia sterility maximálne 10-6.

Sterilizácia vzduchom sa vykonáva v špeciálnej suchej skrini s núteným obehom sterilného vzduchu alebo na inom zariadení špeciálne určenom na tento účel. Sterilizačná skriňa sa naplní tak, aby bola zabezpečená rovnomernosť teploty počas celej náplne. Teplota v sterilizačnej skrini sa zvyčajne meria pomocou termočlánkov umiestnených v kontrolných obaloch spolu s prídavnými termočlánkami umiestnenými na miestach s najnižšou teplotou sterilizačnej skrine, ktoré sú nainštalované vopred. Počas každého sterilizačného cyklu sa zaznamenáva teplota a čas. Na vyhodnotenie účinnosti každého sterilizačného cyklu je možné použiť chemické (termo-temporálne) aj biologické indikátory.

Chemická sterilizácia

Chemická sterilizácia sa vykonáva plynom alebo roztokmi.

Sterilizácia plynom

Sterilizácia plynom sa používa iba vtedy, ak nemožno použiť iné metódy. Pri tomto spôsobe sterilizácie musí byť zabezpečený prienik plynu a vlhkosti do sterilizovaného produktu, ako aj následné odplynenie a odstránenie produktov jeho rozkladu v sterilizovanom produkte na úroveň, ktorá nespôsobuje toxický účinok pri použití lieku. .

Sterilizácia plynom sa vykonáva v plynových sterilizátoroch alebo mikroanaerostatoch (prenosných prístrojoch) vybavených prívodom plynu a poststerilizačným odplyňovacím systémom. Ako plyn sa zvyčajne používa etylénoxid. Kvôli vysokému nebezpečenstvu požiaru sa môže miešať s akýmkoľvek inertným plynom.

Sterilizácia plynom sa vykonáva v nasledujúcich režimoch:

  • - etylénoxid: sterilizačná dávka 1200 mg / dm 3, teplota nie nižšia ako
    18 °C, relatívna vlhkosť 80 %, výdrž - 16 hodín (prenosné zariadenie);
  • - zmes etylénoxidu a metylbromidu (1:2,5):

a) sterilizačná dávka 2000 mg / dm 3, teplota 55 °C, relatívna vlhkosť 80 %, doba expozície 4 hodiny;

b) sterilizačná dávka 2000 mg/dm 3, teplota najmenej 18 °C, relatívna vlhkosť 80 %, doba expozície 16 hodín.

Je povolené používať iné overené režimy sterilizácie plynom, ktoré zaisťujú sterilitu a bezpečnosť objektu.

Etylénoxid môže byť mutagénny a toxický, najmä ak sa používajú materiály obsahujúce chloridové ióny. Vzhľadom na toxicitu etylénoxidu a metylbromidu je používanie produktov sterilizovaných týmito plynmi povolené až po ich odplynení, t.j. vystavení vo vetranej miestnosti prípustným zvyškovým množstvám uvedeným v regulačnej dokumentácii.

Podmienky odplynenia závisia od účelu, spôsobu aplikácie, rozmerov výrobku, materiálu výrobku a balenia a sú uvedené v regulačnej a technickej dokumentácii k výrobku.

Ak je to možné, počas procesu sterilizácie sa zaznamenávajú tieto ukazovatele: koncentrácia plynu, relatívna vlhkosť, teplota a čas sterilizácie. Merania sa vykonávajú v tých oblastiach, kde sa podmienky sterilizácie dosahujú najhoršie, čo sa stanoví počas procesu validácie.

Sterilizované výrobky sú balené vo vrecúškach z polyetylénovej fólie s hrúbkou 0,06 až 0,20 mm, pergamenu a pod. Metóda sa odporúča pre výrobky z gumy, polymérnych materiálov, skla, kovu.

Účinnosť procesu sterilizácie plynom sa kontroluje pri každej náplni pomocou biologických indikátorov.

Pred uvoľnením každej šarže sa na určitom počte vzoriek kontroluje sterilita.

Chemická sterilizácia roztokmi

Chemická sterilizácia sa vykonáva antiseptickými roztokmi (peroxid vodíka a perkyselina). Účinnosť sterilizácie antiseptickými roztokmi závisí od koncentrácie účinnej látky, času sterilizácie a teploty sterilizačného roztoku.

Pri sterilizácii 6% roztokom peroxidu vodíka musí byť teplota sterilizačného roztoku najmenej 18 °C, doba sterilizácie je 6 hodín; pri teplote 50 °C - 3 hodiny.

Pri sterilizácii 1% roztokom deoxónu-1 (kyselinou peroctovou) musí byť teplota sterilizačného roztoku minimálne 18°C, doba sterilizácie je 45 minút.

Chemická sterilizácia antiseptickými roztokmi sa vykonáva v uzavretých nádobách zo skla, plastu alebo nádobách pokrytých neporušenou sklovinou, pričom produkt je počas sterilizácie úplne ponorený v roztoku. Potom sa produkt premyje sterilnou vodou za aseptických podmienok.

Metóda sterilizácie antiseptickými roztokmi sa používa pre výrobky vyrobené z polymérnych materiálov, gumy, skla, kovov odolných voči korózii.

Sterilizácia filtráciou

Niektoré aktívne zložky a liečivé produkty, ktoré nie je možné terminálne sterilizovať žiadnou z vyššie opísaných metód, možno sterilizovať pomocou membránových filtrov. Takéto výrobky vyžadujú osobitné opatrenia. Výrobný proces a pracovné prostredie by mali zabezpečiť, aby sa riziko mikrobiálnej kontaminácie udržalo na minime a mali by sa pravidelne monitorovať. Vybavenie, obaly, uzávery a, ak je to možné, zložky by mali byť vhodne sterilizované. Bezprostredne pred plnením balenia sa odporúča vykonať filtráciu. Operácie nasledujúce po filtrácii sa uskutočňujú za aseptických podmienok.

Predfiltrácia sa uskutočňuje cez membránové filtre s veľkosťou pórov nie väčšou ako 0,45 μm. Potom roztoky prechádzajú cez membránové filtre s nominálnou veľkosťou pórov nie väčšou ako 0,22 mikrónu, ktoré sú schopné zadržať aspoň 107 mikroorganizmov Pseudomonas diminuta na štvorcový centimeter povrchu. Môžu sa použiť aj iné typy filtrov, ktoré poskytujú rovnakú účinnosť filtrácie.

Vhodnosť membránových filtrov sa zisťuje mikrobiologickým testovaním s použitím vhodných mikroorganizmov, napr. Pseudomonas diminuta(ATCC 19146, NCIMB 11091 alebo CIP 103020). Odporúča sa použiť aspoň 10 7 CFU/cm 2 aktívneho povrchu filtra. Suspenzia mikroorganizmov by sa mala pripraviť v tryptónovo-sójovom bujóne, ktorý sa po prechode filtrom asepticky zachytí a inkubuje za aeróbnych podmienok pri teplote neprevyšujúcej 32 °C.

Úroveň filtrácie je definovaná ako hodnota logaritmu zníženia (LDR) mikrobiálnej kontaminácie. Napríklad, ak sa počas filtrácie cez membránový filter s veľkosťou pórov 0,22 μm zadrží 107 mikroorganizmov, VLS je najmenej 7.

Je potrebné zvážiť úroveň mikrobiálnej kontaminácie pred filtráciou, priepustnosť filtra, veľkosť šarže produktu, trvanie filtrácie a zabrániť kontaminácii produktu mikroorganizmami z filtra. Doba používania filtra by nemala presiahnuť čas stanovený počas validácie tohto filtra v kombinácii s konkrétnym filtrovaným produktom. Nepoužívajte opakovane membránové filtre.

Neporušenosť membránového filtra pripraveného na použitie sa kontroluje pred a po filtrácii skúškami zodpovedajúcimi typu filtra a štádiu overovania, napríklad skúškou saturácie („bod bubliny“) metódou difúzneho toku alebo udržiavacieho tlaku. .

Z dôvodu väčšieho potenciálneho rizika filtračnej sterilizácie v porovnaní s inými metódami sterilizácie sa odporúča predfiltrovať cez membránové filtre v prípadoch, keď nie je možné zabezpečiť nízku úroveň mikrobiálnej kontaminácie inými prostriedkami.

Príjem liekov v aseptických podmienkachbez následnej sterilizácie konečného produktu

Cieľom získania liečivých produktov za aseptických podmienok bez následnej sterilizácie konečného produktu je zachovanie sterility liečiva pomocou zložiek, z ktorých každá bola predtým sterilizovaná jednou z vyššie opísaných metód. To sa dosiahne vykonávaním procesu v miestnostiach určitej triedy čistoty, ako aj použitím podmienok a zariadení, ktoré zabezpečujú sterilitu.

Za aseptických podmienok je možné vykonať nasledovné: proces plnenia obalu, uzáver, aseptické miešanie zložiek, po ktorom nasleduje aseptické plnenie a uzáver. Aby sa zachovala sterilita zložiek a hotového výrobku počas výrobného procesu, osobitná pozornosť by sa mala venovať:

  • – stav výrobného prostredia;
  • – personál;
  • – kritické povrchy;
  • – sterilizácia obalov a uzáverov a postupy prenosu;
  • - maximálny povolený čas skladovania produktu do naplnenia konečného obalu.

Validácia procesu zahŕňa riadne overenie všetkých vyššie uvedených skutočností, ako aj systematické kontroly pomocou simulačných testov s použitím kultivačných médií, ktoré sa inkubujú a skúmajú na mikrobiálnu kontamináciu (testy plnenia média). Pred uvoľnením každej šarže filtrom sterilizovaného a/alebo asepticky vyrobeného produktu by sa malo vykonať testovanie sterility na príslušnom počte vzoriek.

Metóda radiačnej sterilizácie

Metóda radiačnej sterilizácie sa vykonáva ožiarením produktu ionizujúcim žiarením. Táto metóda sa môže použiť na sterilizáciu liečivých rastlinných materiálov, liečivých rastlinných prípravkov, liekov rastlinného pôvodu atď.

γ-žiarenie, ktorého zdrojom môže byť buď rádioizotopový prvok (napríklad kobalt-60) alebo elektrónový lúč dodávaný vhodným urýchľovačom elektrónov.

Pri tomto spôsobe sterilizácie sa nastavuje absorpčná dávka od
10 až 50 kGy. Iné dávky sa môžu použiť, ak sa predtým dokázalo, že zvolený režim poskytuje potrebnú a reprodukovateľnú úroveň letality mikroorganizmov. Použité postupy a preventívne opatrenia by mali zabezpečiť úroveň sterility maximálne 10-6.

Výhodou radiačnej sterilizácie je jej nízka reaktivita a ľahko ovládateľná dávka žiarenia, ktorú možno presne zmerať. Radiačná sterilizácia prebieha pri minimálnej teplote, avšak pri používaní určitých typov sklenených a plastových obalov môžu existovať obmedzenia.

Počas procesu radiačnej sterilizácie by sa žiarenie absorbované hotovým produktom malo neustále monitorovať pomocou zavedených dozimetrických metód bez ohľadu na dávku. Dozimetre sa kalibrujú voči štandardnému zdroju v referenčnom radiačnom zariadení po prijatí od dodávateľa a potom v intervaloch nepresahujúcich jeden rok.

Ak sa poskytuje biologické hodnotenie, vykonáva sa pomocou biologických ukazovateľov.

BIOLOGICKÉ UKAZOVATELE STERILIZÁCIE

Biologické indikátory sú štandardizované prípravky určitých mikroorganizmov používané na hodnotenie účinnosti sterilizačného procesu.

Biologickým indikátorom sú zvyčajne bakteriálne spóry aplikované na inertný nosič, ako je prúžok filtračného papiera, sklenená platňa alebo plastová trubica. Naočkovaný nosič sa izoluje tak, aby sa zabránilo jeho poškodeniu alebo kontaminácii a zároveň sa zabezpečil kontakt sterilizačného prostriedku s mikroorganizmami. Suspenzie spór môžu byť v hermeticky uzavretých ampulkách.

Biologické ukazovatele sa pripravujú tak, aby bola za určitých podmienok zabezpečená ich bezpečnosť; musia mať dátum spotreby.

Rovnaké kmene baktérií, ktoré sa používajú pri výrobe biologických indikátorov, sa môžu naočkovať priamo do tekutého produktu, ktorý sa má sterilizovať, alebo do tekutého produktu podobného tomu, ktorý sa má sterilizovať. V tomto prípade sa musí preukázať, že tekutý produkt nemá inhibičný účinok na spóry, najmä na ich klíčenie.

Pre biologický indikátor sú uvedené tieto charakteristiky: typ baktérií použitých ako referenčné mikroorganizmy; číslo kmeňa v pôvodnej kolekcii; počet životaschopných spór na nosič; hodnotu D.

Hodnota D– hodnota sterilizačného parametra (trvanie alebo absorbovaná dávka), ktorá znižuje počet životaschopných mikroorganizmov na 10 % ich pôvodného počtu. Táto hodnota má zmysel pre dobre definované podmienky experimentálnej sterilizácie. Biologický indikátor musí obsahovať len špecifikované mikroorganizmy. Použitie biologických indikátorov obsahujúcich viac ako jeden typ baktérií na jednom nosiči je povolené. Musia sa poskytnúť informácie o kultivačnom médiu a podmienkach inkubácie.

Odporúča sa umiestniť indikátory do oblastí, ktoré sú najmenej prístupné sterilizačnému prostriedku, určené skôr empiricky alebo na základe predbežných fyzikálnych meraní. Po vystavení sterilizačnému činidlu sa nosič spór prenesie do živného média za aseptických podmienok.

Používanie biologických indikátorov je povolené priemyselná produkcia v uzavretých ampulkách so živnou pôdou, umiestnených priamo v obale, ktorý chráni naočkovaný nosič.

Výber referenčných mikroorganizmov pre biologické ukazovatele sa vykonáva s prihliadnutím na tieto požiadavky:

  • - odolnosť testovaného kmeňa voči špecifickej sterilizačnej metóde by mala byť vyššia ako odolnosť všetkých patogénnych mikroorganizmov a iných mikroorganizmov kontaminujúcich produkt;
  • - testovaný kmeň musí byť nepatogénny;
  • – testovaný kmeň by sa mal dať ľahko kultivovať.

Ak sa po inkubácii pozoruje rast referenčných mikroorganizmov, znamená to neuspokojivý proces sterilizácie.

Vlastnosti použitia biologických indikátorov sterilizácie

Sterilizácia nasýtenou parou pod tlakom

Biologické indikátory na monitorovanie sterilizácie stlačenou nasýtenou parou sa odporúčajú na použitie pri validácii sterilizačných cyklov. Odporúča sa použiť bacil stearothermophilus(napríklad ATCC 7953, NCTC 10007, NCIMB 8157 alebo CIP 52.81). Počet životaschopných spór musí presiahnuť 5 x 105 na nosič. Hodnota D pri teplote 121 ° C by mala byť viac ako 1,5 minúty. Keď sa biologický indikátor ošetrí parou pri teplote (121 ± 1) °C pod tlakom 120 kPa počas 6 minút, malo by sa pozorovať zachovanie životaschopných spór a ošetrenie pri rovnakej teplote počas 15 minút by malo viesť k úplná smrť referenčných mikroorganizmov.

Sterilizácia vzduchom

Odporúča sa na prípravu biologických indikátorov bacil subtilis(napríklad, var. Niger ATCC 9372, NCIMB 8058 alebo CIP 77.18). Počet životaschopných spór musí presiahnuť 1 ∙ 10 5 na nosič, hodnotu D pri teplote 160 °C je 1 - 3 min. Horúci vzduch s teplotou nad 220 °C sa často používa na sterilizáciu a depyrogenizáciu sklenených zariadení. V tomto prípade môže ako náhrada biologických ukazovateľov slúžiť zníženie množstva tepelne odolných bakteriálnych endotoxínov o 3 rády.

Radiačná sterilizácia

Biologické indikátory je možné využiť na sledovanie aktuálnych operácií ako dodatočné hodnotenie účinnosti danej dávky žiarenia, najmä v prípade sterilizácie urýchlenými elektrónmi. Odporúčajú sa spory bacil pumilus(napríklad ATCC 27.142, NCTC 10327, NCIMB 10692 alebo CIP 77.25). Počet životaschopných spór musí presiahnuť 1 ∙ 10 7 na nosič. Hodnota D by mala byť vyššia ako 1,9 kGy. Je potrebné overiť, že po ožiarení biologického indikátora dávkou 25 kGy (minimálna absorbovaná dávka) nie je pozorovaný rast referenčných mikroorganizmov.

Sterilizácia plynom

Používanie biologických indikátorov je nevyhnutné pri všetkých postupoch sterilizácie plynom, a to ako na validáciu cyklu, tak aj na bežné operácie. Odporúča sa použiť spóry bacil subtilis(napríklad, var. Niger ATCC 9372, NCIMB 8058 alebo CIP 77.18) pri použití etylénoxidu. Počet životaschopných spór musí presiahnuť 5 x 105 na nosič. Parametre stability sú nasledovné: D je viac ako 2,5 minúty pre test cyklu pri 600 mg/l etylénoxidu, 54 °C a 60 % relatívnej vlhkosti. Malo by sa overiť, že po 60-minútovom sterilizačnom cykle so špecifikovanými parametrami nie je pozorovaný rast referenčných mikroorganizmov, zatiaľ čo po 15-minútovom sterilizačnom cykle pri nižšej teplote (600 mg/l, 30 °C, 60 % vlhkosť ), životaschopnosť spór je zachovaná.

Biologický indikátor by mal byť schopný odhaliť nedostatočnú vlhkosť v sterilizátore a produkte: keď je vystavený etylénoxidu v koncentrácii 600 mg/l pri teplote 54 °C počas 60 minút bez vlhkosti, mala by byť zachovaná životaschopnosť spór .

Podobné články
Diskutujte:
Kontakty O projekte a vydaní Reklama na webovej stránke mapa stránok

2022 videointercoms.ru. Údržbár - Domáce spotrebiče. Osvetlenie. Kovoobrábanie. Nože. Elektrina.