Nadzor kakovosti in učinkovitost sterilizacije. Fizični nadzor načina sterilizacije. Metode za spremljanje učinkovitosti sterilizacije Metode za spremljanje sterilizacije medicinskih pripomočkov

V kompleksu ukrepov za sterilizacijo medicinskih pripomočkov je pomembna organizacija in spremljanje njene učinkovitosti. Dosedanje metode in sredstva nadzora ne omogočajo vedno odkrivanja napak pri sterilizaciji, kar pomeni povečanje stopnje bolnišničnih okužb.

Kontrola učinkovitosti sterilizacijske opreme se izvaja s fizikalnimi, kemičnimi in biološkimi (bakteriološkimi) metodami. Zanesljivost teh metod je različna.

Kontrola sterilizacije

Fizikalne in kemične metode so zasnovane za operativni nadzor in vam omogočajo nadzor skladnosti s parametri pare, plina, sterilizacije zraka, temperature, tlaka, izpostavljenosti.

Pomanjkljivost teh metod je, da ne morejo dokazati učinkovite sterilizacije. Zanesljivo za določitev učinkovitosti je le bakteriološka metoda.

Fizikalne metode

Fizikalne metode nadzora se izvajajo s pomočjo sredstev za merjenje temperature (termometri, termočleni), tlaka (manometri, kombinirani merilniki tlaka in vakuuma) in časa (števci časa). Sodobni sterilizatorji so opremljeni tudi s snemalnimi napravami, ki beležijo posamezne parametre posameznega sterilizacijskega cikla.

Kemijske metode

Že desetletja se kemični nadzor izvaja s kemikalijami, ki spremenijo agregatno stanje ali barvo pri temperaturi, ki je blizu sterilizacijske temperature (benzojska kislina za nadzor sterilizacije s paro, saharoza, hidrokinon in številne druge snovi za nadzor sterilizacije zraka).

S spremembo barve in taljenjem teh snovi se šteje, da je rezultat sterilizacije zadovoljiv.

Vendar pa dolgoletna opazovanja in literaturni podatki kažejo, da ob zadovoljivih rezultatih kemične kontrole s temi indikatorji bakteriološka kontrola v številnih primerih (do 12%) razkrije nezadovoljiv rezultat sterilizacije.

Poleg tega imajo te snovi pomembno pomanjkljivost. Njihov prehod v drugo agregatno stanje ne daje pojma o trajanju izpostavljenosti temperaturi, pri kateri se stopijo.

Ob upoštevanju nezadostne zanesljivosti uporabe teh kazalnikov za nadzor, pa tudi velike težavnosti in neprijetnosti njihovega praktična uporaba, v 70. letih prejšnjega stoletja so bili razviti kemični indikatorji, katerih sprememba barve se pojavi, ko so izpostavljeni temperaturi, sprejeti za ta način, v času, potrebnem za sterilizacijo.

S spreminjanjem barve teh indikatorjev je mogoče oceniti, da se ohranjata glavna parametra sterilizacijskega procesa - temperatura in čas. Dolgotrajna uporaba takih indikatorjev je pokazala njihovo visoko zanesljivost.

Bolj sofisticirani indikatorji so zasnovani za spremljanje kritičnih parametrov procesa sterilizacije.

Do konca osemdesetih let prejšnjega stoletja ni bilo nobenih standardov za kemijske indikatorje, ki so jih proizvajala različna podjetja, in ni bilo poskusov njihove klasifikacije. Šele leta 1995 je Mednarodna organizacija za standardizacijo (ISO) objavila dokument "Sterilizacija medicinske naprave. Kemični indikatorji. 1. del".

Od januarja 2002 velja GOST R ISO 11140-1 „Sterilizacija medicinskih izdelkov. Kemični indikatorji. Splošni pogoji". Po tem dokumentu so kemični indikatorji razdeljeni v šest razredov.

Indikatorji 1. razred so indikatorji (»priče«) procesa.

Primer takega indikatorja je termoindikacijski trak, ki ga pred sterilizacijo nalepimo na tekstilne embalaže ali sterilizacijske škatle.

Sprememba barve traku pomeni, da je bila embalaža sterilizirana. Enake indikatorje je mogoče namestiti v komplete kirurških instrumentov ali kirurškega perila.

2. razred Indikator je namenjen uporabi v posebnih testnih postopkih, kot je Bowie-Dickov test. Ta test ne kontrolira parametrov sterilizacije, ampak ocenjuje učinkovitost odstranjevanja zraka iz komore parnega sterilizatorja.

Indikatorji 3. razred so indikatorji enega parametra. Ocenjujejo najvišjo temperaturo, vendar ne dajejo pojma o času njene izpostavljenosti. Primeri takih indikatorjev so zgoraj opisane kemikalije.

4. razred so kazalniki z več parametri. Vsebujejo barvila, ki spremenijo svojo barvo pod skupnim vplivom več parametrov sterilizacije, največkrat temperature in časa. Primer takšnih indikatorjev so termotemporalni indikatorji za spremljanje sterilizacije zraka.

5. razred— integracijski kazalniki. Ti indikatorji se odzivajo na vse kritične parametre metode sterilizacije. Značilnost tega razreda indikatorjev primerjamo z inaktivacijo zelo odpornih mikroorganizmov.

6. razred— indikatorji-emulatorji. Ti indikatorji se morajo odzivati ​​na vse kontrolne vrednosti kritičnih parametrov metode sterilizacije.

biološka metoda

Poleg fizikalnih in kemičnih metod se uporablja tudi bakteriološka metoda nadzora sterilizacije. Namenjen je spremljanju učinkovitosti opreme za sterilizacijo.

Do nedavnega so vzorce uporabljali za kontrolo sterilizacije s paro in zrakom. vrtna zemlja ki vsebujejo mikroorganizme, ki so zelo odporni na učinke sterilizacijskih dejavnikov.

Vendar pa odpornost mikroorganizmov v različnih vzorcih ni enaka, kar ne omogoča standardizacije rezultatov kontrole.

Trenutno se za bakteriološki nadzor uporabljajo biološki testi, ki imajo odmerjeno količino spor testne kulture. Učinkovitost sterilizacije je priporočljivo kontrolirati z biotesti enkrat na 2 tedna. V tuji praksi je običajno biološko testiranje izvajati vsaj enkrat na teden.

V nekaterih primerih je potrebno nadzorovati vsako obremenitev sterilizatorja s pomočjo biotestov. predvsem, pogovarjamo se o sterilizaciji instrumentov za izvajanje kompleksnih kirurških posegov, ki zahtevajo uporabo visoko zanesljivih sterilnih materialov.

Vsaka obremenitev pripomočkov za vsaditev mora biti podvržena tudi bakteriološki kontroli. Hkrati je uporaba steriliziranih materialov odložena do negativnih rezultatov kontrole.

Ista načela pri določanju pogostosti nadzora je priporočljivo upoštevati tudi pri plinski sterilizaciji, ki je kompleksnejša od drugih metod.

Vir: http://steriliz.narod.ru/07contr.htm

Sterilizacija: pojmi, metode, načini

Sterilizacija - (iz lat. Neplodnost) - je popolno uničenje m / o in njihovih spor z vplivom fizikalnih dejavnikov in kemičnih pripravkov. Sterilizacija se izvede po PSO dezinfekciji in PSO kontroli kakovosti. Sterilizacija je najpomembnejši člen, zadnja ovira pri preprečevanju bolnišničnih okužb v zdravstvenih ustanovah. Pacienta ščiti pred kakršno koli okužbo.

Dokumenti, ki urejajo metode sterilizacije.

Ne smemo pozabiti, da je za izvajanje sterilizacije potrebno poznati in biti sposoben uporabljati zakone, navodila, pravila in druge inštrukcije in metodološke dokumente s področja nalezljive varnosti. Trenutno je v veljavi industrijski standard (ostal. 42-21-8-85, ki določa metode, sredstva in načine sterilizacije in dezinfekcije medicinskih izdelkov.

namen, ki ga dopolnjuje ukaz št. 408 "Metodološke smernice za dezinfekcijo, PSO in sterilizacijo medicinskih pripomočkov", ki ga je odobrilo Ministrstvo za zdravje Rusije 30. decembra 1998. št. MU-287-113.

Ti dokumenti so obvezni in določajo vse zdravstvene ustanove ter omogočajo široko izbiro sredstev in metod, ki so najbolj primerne v razmerah določene zdravstvene ustanove. Sterilizirani so vsi izdelki, ki so v stiku s površino rane, v stiku s krvjo ali injekcijami ter nekatere vrste medu.

instrumenti, ki med delovanjem pridejo v stik s sluznicami, jih lahko poškodujejo. »Sterilnost« je stanje medicinskega pripomočka, ko ne vsebuje vitalnih m/o.

Metode sterilizacije razlikujejo med:

  • fizični (toplotni): para, zrak, glasperleny;
  • kemični: plin, kemikalije, sevanje;
  • plazma in ozon (skupina kemikalij).

Izbira ene ali druge metode sterilizacije je odvisna od lastnosti predmeta in same metode - njenih prednosti in slabosti.

Pakirani izdelki se sterilizirajo v decentraliziranih ali centraliziranih sistemih, pa tudi v industrijskih podjetjih, ki proizvajajo medicinske pripomočke za enkratno uporabo.

Izdelke brez embalaže steriliziramo le z decentraliziranim zdravstvenim sistemom. V zdravstvenih ustanovah sta najpogostejši parni in zračni način sterilizacije.

Sterilizatorji: parni, zračni, plinski.

Parna metoda:

Zanesljivo nestrupeno, poceni, zagotavlja sterilnost ne samo površine, ampak celotnega izdelka. Izvaja se pri relativno nizki temperaturi, nežno vpliva na predelani material, omogoča sterilizacijo izdelkov v embalaži in s tem preprečuje tveganje ponovne kontaminacije m/o.

Sterilizacijsko sredstvo pri tej metodi je nasičena vodna para pod pritiskom.

Načini sterilizacije:

  • 1. način (glavni) - t 1320, 2 atm., 20` - je namenjen za izdelke iz kaliko, gaze, stekla, vključno z brizgami z oznako "2000C", izdelki iz kovine, odporne proti koroziji.
  • 2. način (nežen) - t 1200, 1,1 atm., 45` - priporočljivo za izdelke iz tanke gume, lateksa, polietilena visoke gostote.
  • 3. način - t 1340, 2 atm., 5`.

Pogoji sterilizacije: vsi izdelki sterilizirani s paro pod pritiskom, predhodno pakiranje - sterilizacijske škatle (bixi ali kontejnerji). S filtri ali brez, kraft vrečkami in drugo embalažo, namenjeno parni sterilizaciji.

Rok uporabnosti steriliziranih izdelkov je odvisen od embalaže:

  1. izdelki sterilizirani v sterilizacijskih škatlah brez filtra (CS) - 3 dni (72 ur);
  2. v sterilizacijskih škatlah s filtrom (CF) - do 20 dni, ob mesečni menjavi filtrov;
  3. v dvojni mehki embalaži iz bombažne tkanine, kraft papirja - 3 dni. (72 ur).

Slabosti metode:

  • povzroča korozijo instrumentov iz nestabilnih kovin;
  • spremeni v kondenzat, vlaži sterilizirane izdelke, s čimer izboljša pogoje shranjevanja in poveča tveganje ponovne kontaminacije m / o.

zračna metoda.

Sterilizacijsko sredstvo je suh vroč zrak. Posebnost metode je, da ni vlaženja embalaže in izdelkov ter s tem povezanega zmanjšanja obdobja sterilnosti ter korozije kovin.

Načini sterilizacije:

  • 1. način (glavni) - t 1800 - 60 min. - zasnovan za sterilizacijo steklenih izdelkov, vključno z brizgami z oznako "2000C", kovinskih izdelkov, vključno s kovinami, odpornimi proti koroziji.
  • 2. način (nežen) - t 1600 - 150 min. - je namenjen za sterilizacijo izdelkov iz silikonske gume, kot tudi delov nekaterih naprav in naprav.

Pogoji sterilizacije: izdelki se sterilizirajo brez embalaže na mrežah, pakiranih v embalažni papir, ki ustreza zahtevam trenutnega industrijskega standarda.

Slabosti metode: počasno in neenakomerno segrevanje steriliziranih izdelkov; potreba po uporabi višjih temperatur; nezmožnost uporabe za sterilizacijo izdelkov iz gume, polimerov; nepraktičnost uporabe vseh razpoložljivih embalažnih materialov.

Opombe: suhi izdelki so podvrženi sterilizaciji; izdelki sterilizirani v kraft vrečki, embalaža brez vrečastega mokrotrdnega papirja, skladiščenje - 3 dni.

(72 ur); v 2-slojni embalaži krep papirja za med.

cilji - do 20 dni; izdelke, sterilizirane brez embalaže, je treba uporabiti takoj po sterilizaciji med delovno izmeno (6 ur) v aseptičnih pogojih.

Glasperlenova metoda. Popolnoma kovinski zobni in kozmetični instrumenti se sterilizirajo s potopitvijo steklenih kroglic, segretih na 190-2500 v medij.

Vir: https://megaobuchalka.ru/8/32842.html

Kontrola kakovosti sterilizacije

Zanesljivost sterilizacije določajo naslednji dejavniki;

  • zmogljivosti in tehnično stanje sterilizacijske opreme;
  • skladnost s pravili in režimi sterilizacije;
  • kakovost čiščenja pred sterilizacijo,
  • kvalifikacije bolničarjev;
  • izbira metode sterilizacije.

Na žalost se do danes v Ruski federaciji še vedno uporabljajo indikatorji taljenja. Pomanjkljivosti vključujejo njihov približen dokaz o doseganju zahtevane temperature.

Zdravstvene ustanove kljub težkim finančnim razmeram v državi pridobivajo sodobne termočasovne sterilizacijske indikatorje za enkratno uporabo - Vinar, Steriking, Medtest, ki omogočajo zadosten nadzor nad potekom sterilizacije.

Metode nadzora sterilizacije so lahko:

  1. operativni;
  2. dolgoročno.

1. Metode operativnega nadzora- Tistih, ki so izvaja neposredno po sterilizaciji.

Operativni nadzor:

  • vizualni pripomočki;
  • manometri;
  • termometri;
  • vakuumski merilniki;
  • maksimalni termometri;
  • kemikalije - stekleni indikatorji (notri so kemikalije, ki pri določeni temperaturi spremenijo barvo). Masa mora biti enakomerno pobarvana!

Za parne sterilizatorje:

  1. « Sterikont", "Steritest" (trak) - 132 ° C - 20 min;
  2. "Vinar" (trak) - 120 ° C - 45 min.

Za zračne sterilizatorje:

  • "Vinar" (trak) -180 ° С - barva "kaki";
  • "Steriking" - 180 °C - črna.

Redko uporabljeno:

  • vinska kislina - 170 ° C - odteče in postane bela;
  • hidrokinon -169 -171 ° С - črna;
  • tiosečnina - 180 ° C - svetlo rumena barva.

Trenutno se poleg indikatorjev termičnega časa za nadzor sterilizacije "Vinar", "Steriking" uporablja veliko število sodobnejših indikatorjev termičnega časa.

Vir: https://studopedia.net/3_77236_kontrol-kachestva-sterilizatsii.html

Nadzor kakovosti in učinkovitost sterilizacije

Nadzor omogoča izboljšanje kakovosti sterilizacije v zdravstvenih ustanovah. Omogoča določanje učinkovitosti in parametrov sterilizacije.

Zanesljivost zračne sterilizacije je odvisna od zasnove sterilizatorja, njegove uporabnosti, sheme in količine polnjenja, uporabljene zaščitne embalaže, uporabljenih metod operativnega in periodičnega nadzora ter usposobljenosti osebja, ki servisira sterilizator.

Problem zanesljivosti je še posebej pomemben pri delovanju naprav zastarelih tipov, če ni razpoložljivih metod za nadzor sterilizacije.

Nadzor učinkovitosti sterilizacije v zračnem sterilizatorju se izvaja z bakteriološko metodo in kemičnimi termo-časovnimi indikatorji.

Metoda bakteriološkega nadzora se izvaja s pomočjo biotesta - predmeta iz določenega materiala, okuženega s testnimi mikroorganizmi. Kot nosilci se uporabi majhna viala, ki vsebuje spore B. Licheniformis.

Nadzorna vloga se izvaja v skladu s potrjeno metodologijo. Obstajajo tudi že pripravljeni certificirani testi s sporami B.

Licheniformis z barvnimi hranilnimi gojišči, kar omogoča bakteriološki nadzor neposredno v CSO ob prisotnosti termostata.

Kontrola sterilizacije zraka s kemičnimi termo-časovnimi indikatorji. Številne kemikalije so bile predhodno priporočene za nadzor delovanja, katerih tališče ustreza temperaturi sterilizacije.

Toda danes je vsem jasno, da jih ni mogoče šteti za zanesljive kazalnike, saj ne dajejo predstave o času, ko je izdelek izpostavljen vročemu zraku.

Takšna kontrola je okvirna in ne zagotavlja doseganja sterilnosti v procesu sterilizacije.

Zanesljivost operativnega nadzora se bistveno poveča z uporabo indikatorjev integriranega delovanja, zlasti IS-160 in IS-180 NP iz Vinarja, ki spremenijo barvo v barvo standarda šele, ko so izpostavljeni temperaturi sterilizacije med celotnim časom. izpostavljenost sterilizaciji.

Indikatorski trakovi se vstavijo v kontrolne točke sterilizatorja med vsakim ciklom sterilizacije. Če je barva indikatorja po sterilizaciji na kateri koli točki svetlejša od standardne, velja, da so vsi izdelki nesterilni.

Vrečke iz pergamentnega papirja, ki se uporabljajo za pakiranje, imajo pri sterilizaciji v sodobni sterilizacijski opremi podoben indikator, uporabljen v tovarni.

Zanesljivost parne sterilizacije je odvisna od več dejavnikov:

  • skladnost s pogoji delovanja;
  • natančnost nadzora merilni instrumenti nameščen na sterilizatorju;
  • popolnost odstranitve zraka iz steriliziranih izdelkov;
  • tesnost sterilizacijske komore.

Metode periodične kontrole parnih sterilizatorjev so določene v sistemu "čisti instrument". Tej vključujejo:

  • preverjanje točnosti manometra;
  • preverjanje točnosti beleženja temperature in tlaka z zapisovalniki;
  • nadzor tesnosti sterilizacijske komore;
  • kontrola kakovosti avtomatskega vakuumskega testa;
  • kontrola učinkovitosti sušenja tekstilnih materialov;
  • preverjanje popolnosti odstranitve zraka iz steriliziranih izdelkov. Določitev učinkovitosti z bakteriološko metodo v parnem sterilizatorju se izvaja s testi, ki vsebujejo spore B. Stearothermophilus v skladu z metodologijo, ki jo je odobrilo Ministrstvo za zdravje Ruske federacije.

Operativni nadzor parne sterilizacije se izvaja s kemičnimi indikatorji integriranega delovanja (termo-časovni).

Indikatorji taljenja (tiosečnina, benzojska kislina itd.), ki jih še vedno uporabljajo v nekaterih bolnišnicah, niso indikatorji sterilnosti, saj beležijo samo temperaturo, ne upoštevajo pa sterilizacijske izpostavljenosti (časa sterilizacije).

Indikatorji Vinar IS-120 in IS-132, pa tudi v zračnem sterilizatorju, spremenijo barvo, da upoštevajo standard, le če so izpostavljeni temperaturi sterilizacije med celotno izpostavljenostjo sterilizaciji.

Pri vsakem ciklu se indikatorski trakovi namestijo na kontrolne točke sterilizatorja. Če je barva indikatorja na kateri koli točki svetlejša od standardne, velja, da so vsi izdelki nesterilni.

Vir: https://vuzlit.ru/828921/kontrol_kachestva_effektivnost_sterilizatsii

Kemična sterilizacija

Kemična sterilizacija je najbolj problematična in dolgotrajna metoda sterilizacije materiala. Uporablja se le, če ni mogoče uporabiti drugih metod. V bistvu se kemična sterilizacija uporablja za obdelavo pripomočkov s finimi optičnimi vlakni (endoskopska oprema, laringealna rezila itd.).

Zahteve za pogoje za kemično sterilizacijo:

  • Ločen prostor z zaključkom, ki omogoča mokro dezinfekcijo: stene v polni višini, tla iz ploščic, stropna obloga odporna na vlago.
  • Baktericidno obsevanje se izvaja v skladu z režimom za prostore z aseptičnim režimom.
  • Prisotnost 2 umivalnikov (za roke, za opremo).
  • Prisotnost vsaj 3 tabel (ločevanje tokov tehnološkega procesa).
  • Vse posode in dodatna orodja (brizgalke, pincete, klešče) morajo biti sterilni in uporabljeni samo za eno obdelano serijo. Posode se uporabljajo iz stekla, kovine, toplotno odporne plastike, ki lahko prenese avtoklaviranje.
  • Osebje mora uporabljati sterilne kombinezone in zaščitno opremo.

Za kemično sterilizacijo se instrumenti, ki so bili razkuženi, predhodno sterilizirani, dostavijo v pisarno v suhi obliki. Orodje in pripomočke potopimo v posodo s kemičnim sterilizatorjem. Sterilizacija se izvaja s popolno potopitvijo. Prosto polaganje instrumentov, polnjenje kanalov z raztopino z brizgo.

Z veliko dolžino izdelka so nameščeni v posodi v spirali. Snemljivi izdelki so sterilizirani nesestavljeni. Po pretečenem času izpostavljenosti produkte poberemo iz posode s sterilno pinceto, odcedimo ostanke sterilanta in prenesemo v posodo s sterilno destilirano vodo.

Kanale in posode speremo s sterilno vodo z brizgo, tako da izpiralna voda ne pride v posodo s sterilno vodo. Nato kanale napolnimo s sterilno vodo in izdelek pustimo v vodi 10-15 minut (čas pranja je določen z navodili za pripravo). Po pretečenem času se postopek v celoti ponovi v naslednji posodi.

V vsaki posodi delajo z ločenimi brizgami in pinceto. Nato se izdelki položijo na ločeno mizo v sterilnem listu. Priporočljivo je, da kanale in dolge instrumente posušite s sterilnim alkoholom (izpiranje, brisanje). V farmakopeji je recept etilni alkohol v sterilni vodi v aseptičnih pogojih.

Po končanem sušenju sterilne izdelke zapakiramo v sterilno biks obloženo s sterilno ponjavo ali v 2-slojno kaliko embalažo.

Rok uporabnosti materiala, ki je bil podvržen kemični sterilizaciji, ni več kot 3 dni od trenutka sterilizacije paketa.

Nadzor kakovosti sterilizacije:

  • Vizualni nadzor. Preverjajo pravilno uporabo embalažnih materialov, stopnjo napolnjenosti paketov in sterilizacijskih komor, veljavnost izbrane metode sterilizacije.
  • Fizični nadzor. Ocenite kazalnike kontrolnih in merilnih naprav sterilizacijske opreme: najvišje termometre, monometre in stopnjo odstopanja od standardov. Zunaj namestitve embalaže in preskusni indikatorji znotraj namestitve embalaže.
  • Kemični nadzor. Izvedeno z uporabo kemičnih indikatorjev. Do danes je treba uporabiti testne indikatorje 4. generacije, ki vam omogočajo nadzor vseh parametrov sterilizacije (tlak, temperatura, čas). Obstajajo testni indikatorji za nadzor zunaj in znotraj paketa.

Ne smemo pozabiti, da je treba notranje in zunanje testne indikatorje uporabljati izključno za predvideni namen.

Notranji indikatorji so nameščeni znotraj embalaže na 3 nivojih z enakomernim polaganjem (pri mešanem polaganju - v vsako vrsto steriliziranega materiala se položi dodaten test).

Notranji testni indikatorji vam omogočajo nadzor sterilizacijskih parametrov znotraj embalaže. Zunanji testni indikatorji spremljajo parametre sterilizacije znotraj sterilizacijske komore in so nameščeni na določenih mestih v komori.

Testni indikatorji se ocenijo takoj po koncu sterilizacije (zunanji testni indikatorji) in po odprtju embalaže (notranji testni indikatorji).

Vsi kazalniki testa so ovrednoteni. Če en indikator testa ne ustreza standardu, se material šteje za nesterilen in ga ni mogoče uporabiti.

Pravila za dajanje testnih indikatorjev v sterilizacijske pakete:

  • v homogenem stajlingu so testni indikatorji položeni na treh ravneh (spodaj-sredina-zgoraj);
  • pri kombiniranem polaganju so testni indikatorji položeni na treh nivojih (spodaj-sredina-zgoraj) in dodatno na sredini vsake vrste materiala;
  • v mehkih paketih majhne prostornine je dovoljeno položiti en testni indikator na sredino paketa.

Testni indikatorji se shranjujejo med celotno operacijo polaganja.

Delovanje sterilizacijske parne komore se spremlja četrtletno s standardnim modulom - paralelopipedom 17 listov velikosti 300-300-900 mm - "lutke".

"Lutka" - 9 notranjih testnih indikatorjev. Ki je ležal na sredini 17 listov (med 8 in 9 listi). Listi so oviti v dvoslojno folijo in celoten cikel sterilizacije se izvede v avtoklavu.

bakteriološki nadzor. Da bi ocenili učinkovitost sterilizacije, se izvajajo bakteriološke študije s pomočjo biotestov in študija izpiranja za sterilnost.

Izpiranje za sterilnost se vzame iz instrumentov takoj po izdelavi režima sterilizacije in iz instrumentov, pripravljenih za delo (s sterilne mize ali pladnja). Odvzem brisov izvaja medicinska sestra, ki neposredno sodeluje pri delu s sterilnim materialom.

Množičnost študij je določena z zahtevami odredbe Ministrstva za zdravje ZSSR št. 254 "O razvoju dezinfekcije v državi." Za operacijsko enoto, oddelke za reanimacijo se kakovost sterilizacije testira enkrat na 10 dni, za druge občutljive prostore - enkrat mesečno.

Kontrola sterilizacije z biotesti se izvaja v okviru kontrole proizvodnje - četrtletno. Po popravilu sterilizacijske opreme je obvezna kontrola z biotestom.

Učinkovitost sterilizacije kontroliramo s fizikalnimi, kemičnimi in bakteriološkimi metodami.

Fizikalne metode nadzora vključujejo: merjenje temperature, tlaka in časa uporabe sterilizacije.

Že desetletja se za kemični nadzor uporabljajo kemikalije, ki imajo tališče blizu temperature sterilizacije. Te snovi so bile: benzojska kislina - za sterilizacijo s paro; saharoza, hidrokinon in nekateri drugi - za nadzor sterilizacije zraka. Če je prišlo do taljenja in razbarvanja teh snovi, je bil rezultat sterilizacije zadovoljiv. Ker uporaba zgornjih indikatorjev ni dovolj zanesljiva, so zdaj v prakso nadzora metod termične sterilizacije uvedeni kemični indikatorji, katerih barva se spremeni pod vplivom temperature, ki je primerna za določen način, za določen čas, potreben za izvedbo. ta način. S spreminjanjem barve indikatorjev se presojajo glavni parametri sterilizacije - temperatura in trajanje sterilizacije. Od leta 2002 velja GOST RISO 11140-1 „Sterilizacija medicinskih izdelkov. Kemični indikatorji. Splošne zahteve", v katerem kemična indikatorji razdeljen na šest razredi:

Za 1 razred kazalniki zunanjega in notranji proces, ki so nameščeni na zunanji površini embalaže z medicinskimi pripomočki ali v notranjosti kompletov instrumentov in kirurškega perila. Sprememba barve indikatorja pomeni, da je bila embalaža sterilizirana.

Co. 2 razred vključujejo indikatorje, ki ne nadzorujejo parametrov sterilizacije, ampak so namenjeni uporabi pri posebnih testih, na primer na podlagi takšnih indikatorjev ocenjujejo učinkovitost vakuumske črpalke in prisotnost zraka v komori parnega sterilizatorja.

Za 3 razred vključujejo indikatorje, ki določajo en parameter sterilizacije, na primer najnižjo temperaturo. Ne dajejo pa podatka o času izpostavljenosti temperaturi.

Za 4 razred vključujejo indikatorje z več parametri, ki spremenijo barvo, ko so izpostavljeni več parametrom sterilizacije. Primer takih indikatorjev so indikatorji sterilizacije s paro in zrakom za enkratno uporabo IKPVS-"Medtest".

Za 5 razred vključujejo integrirane indikatorje, ki se odzivajo na vse kritične parametre sterilizacijske metode.

Za 6 razred vključujejo indikatorje-emulatorje. Indikatorji so kalibrirani glede na parametre sterilizacijskih načinov, v katerih se uporabljajo. Ti indikatorji se odzivajo na vse kritične parametre metode sterilizacije. Emulacijski indikatorji so najsodobnejši. Jasno registrirajo kvaliteto sterilizacije s pravilnim razmerjem vseh parametrov - temperatura, nasičena para, čas. Če eden od kritičnih parametrov ni upoštevan, indikator ne deluje. Med domačimi termo-časovnimi indikatorji so indikatorji "IS-120", "IS-132", "IS-160", "IS-180" podjetja "Vinar" ali parni indikatorji ("IKPS-120/45", " IKPS-132 / 20") in zračna ("IKPVS-180/60" in "IKVS-160/150") sterilizacija za enkratno uporabo IKVS podjetja Medtest.

Vse operacije z indikatorji - ekstrakcija, ocena rezultatov - izvaja osebje, ki izvaja sterilizacijo.

Vrednotenje in obračunavanje rezultatov kontrole se izvaja z vrednotenjem barvnih sprememb začetnega stanja nalepke termičnega indikatorja vsakega indikatorja v primerjavi z barvno oznako primerjalnega standarda.

Če barva končnega stanja nalepke termičnega indikatorja vseh indikatorjev ustreza barvni nalepki primerjalnega standarda, to pomeni, da so izpolnjene zahtevane vrednosti parametrov načina sterilizacije v sterilizacijski komori.

Dovoljene so razlike v intenzivnosti barvne globine oznake toplotnega indikatorja indikatorjev zaradi neenakosti dovoljenih temperaturnih vrednosti v različnih območjih sterilizacijske komore. Če nalepka termičnega indikatorja vsaj enega indikatorja v celoti ali delno ohrani barvo, ki se zlahka razlikuje od barve referenčnega stanja, to pomeni, da zahtevane vrednosti parametrov načina sterilizacije v sterilizacijski komori niso upoštevane.

Indikatorji in primerjalni standardi se morajo ujemati v številkah serij. Prepovedano je ocenjevanje rezultatov kontrole sterilizacije z uporabo indikatorjev različnih serij.

Ugotavljanje skladnosti spremembe barve nalepke termičnega indikatorja v primerjavi s standardom se izvede pri osvetlitvi najmanj 215 luksov, kar ustreza mat žarnici z žarilno nitko 40 W, z razdalje največ kot 25 cm Za bakteriološko kontrolo se trenutno uporabljajo biotesti, ki imajo odmerjeno količino spor testne kulture. Obstoječa metoda omogoča oceno učinkovitosti sterilizacije šele po 48 urah, kar ne dovoljuje uporabe že steriliziranih izdelkov do pridobitve rezultatov bakteriološke kontrole.

Biološki indikator je pripravek patogenih mikroorganizmov, ki tvorijo spore, za katere je znano, da so zelo odporni na to vrsto postopka sterilizacije. Namen bioloških indikatorjev je potrditi sposobnost postopka sterilizacije, da uniči odporne mikrobne spore. Je najbolj kritičen in zanesljiv test postopka sterilizacije. Biološki indikatorji se uporabljajo kot kontrola obremenitve: če je rezultat pozitiven (razrast mikrobov), te obremenitve ni mogoče uporabiti in je treba priklicati vse prejšnje obremenitve do zadnjega negativnega rezultata. Za zanesljiv biološki odziv je treba uporabiti le tiste biološke indikatorje, ki ustrezajo mednarodnim standardom EC 866 in ISO 11138/11135. Pri uporabi bioloških indikatorjev se pojavijo določene težave - potreba po mikrobiološkem laboratoriju, usposobljenem osebju, trajanje inkubacije večkrat presega trajanje sterilizacije, potreba po karanteni (nezmožnosti uporabe) steriliziranih izdelkov do pridobitve rezultatov. Zaradi zgoraj navedenih težav pri prijavi biološka metoda v ambulantni zobozdravstveni praksi se za nadzor učinkovitosti sterilizacije običajno uporablja fizikalna in kemična metoda.

Sterilizacijski indikatorji so naprave, s katerimi kontroliramo kakovost sterilizacije v sterilizacijskih napravah.

Za uničevanje mikroorganizmov, gliv, plesni, virusov, okužb je dostopna in učinkovita metoda- sterilizacija. Za zagotovitev sterilnosti medicinskih izdelkov se uporabljajo posebne naprave, ki se razlikujejo po zasnovi, vrsti udarca in principu delovanja: parni, suhi, ultravijolični, ultrazvočni sterilizatorji.

Kakovost sterilizacije je odvisna od več dejavnikov:

  • izbira opreme v skladu z značilnostmi orodja;
  • pravilna organizacija procesov predelave, dezinfekcije;
  • nadzor sterilizacije;
  • skladnost s pravili pakiranja in skladiščenja izdelkov.

Kontrola sterilizacije obsega izvajanje različnih nalog – skladnost s parametri, dokazovanje pasaže, spremljanje učinkovitosti in kakovosti sterilizacijske obdelave. Glede na naloge in cilje lahko izberete želeni indikator sterilizacije ali kombinacijo le-teh.

Metode spremljanja učinkovitosti sterilizacije in klasifikacija indikatorjev

Objektivna ocena učinkovitosti sterilizacije vključuje celovit pristop z uporabo naslednjih metod nadzora:

  • fizično;
  • kemična;
  • biološki.

Fizična metoda - vključuje prisotnost merilnih instrumentov, senzorjev (termometer, manometer, časovnik), s pomočjo katerih se merijo parametri aparata: temperatura, tlak, čas. Kršitev standardnih načinov delovanja (nizka temperatura, neskladnost v trajanju sterilizacijskega učinka ali tlaka itd.) Kaže na možno okvaro pri delovanju opreme.

Kemična metoda - izvaja se z uporabo kemičnih indikatorjev, ki spreminjajo barvo ali fizikalne lastnosti glede na pogoje in parametre sterilizacije: temperatura, trajanje izpostavljenosti, nasičenost s paro, relativna vlažnost.

Kemični indikatorji kontrole kakovosti so razdeljeni v 6 razredov.

Prvi razred so termoindikacijski trakovi sterilizacijskega postopka, ki se pred obdelavo lepijo na pakete, škatle z medicinskim tekstilom, kirurški material. Sprememba barve kaže na prisotnost sterilizacijskega učinka.

Drugi ocenjuje kakovost pare oziroma odvajanje zraka v parnih sterilizatorjih. Ta enkratni indikator je zasnovan za posebne testne postopke, kot je Bowie-Dickov test.

  • Tretja so termokemične naprave, ki lahko določijo le en kritičen parameter: benzojsko kislino, najvišjo temperaturo, hidrokinon, tlak.
  • Četrti - večparametrski kazalci, ki se lahko uporabljajo znotraj fotoaparata ali embalaže. Sposoben določiti in prikazati dva ali več parametrov obdelave (temperatura, trajanje izpostavljenosti).
  • Peti razred so integratorji, katerih barva se spremeni le, če so izpolnjeni vsi kritični procesni parametri. Prav tako so sposobni prikazati stopnjo smrti bioloških testov.
  • Šesti so najbolj natančni emulatorji, ki lahko določijo strogo skladnost reguliranih vrednosti vseh kritičnih parametrov.

Biološka metoda je zelo učinkovit in zanesljiv način nadzora kakovosti sterilizacijske opreme, izvaja se z biološkimi testi, na katere se nanese odmerjena količina spor določene testne kulture. Ta zelo zanesljiva testna metoda je indicirana za uporabo z izdelki, ki zahtevajo visoko stopnjo sterilnosti: kirurški instrumenti, materiali, obratovalni pripomočki. Izvaja se 1-krat v 2 tednih ali 1-krat na teden (v skladu s tujo prakso).

Prvi dve metodi sta precej priljubljeni in se uporabljata za hitro oceno parametrov delovanja parnih, plinskih, zračnih naprav, vendar ne moreta zagotoviti natančnih informacij o učinkovitosti opravljene sterilizacije. Zanesljive informacije o kakovosti opravljene sterilizacije daje le biološka metoda.

Kontrola kakovosti sterilizacije je zagotovilo sterilnosti in varnosti medicinskih instrumentov, pripomočkov in opreme. Ohranjanje sterilnosti izdelkov zahteva tudi ustrezne pogoje skladiščenja: odsotnost žuželk, majhnih glodalcev; izključitev nihanj temperature in vlažnosti; preprečevanje poškodb, pregibov, prask na paketih, škatlah.

Različne vrste indikatorjev si lahko ogledate na spletni strani polihrom.com Podjetje je specializirano za oskrbo laboratorijev s potrošnim materialom in opremo.

Zbornik drugega znanstvenega simpozija o pomenu bioloških indikatorjev za nadzor sterilizacije, ki je potekal v Moskvi 9. decembra 1998.

M.I. Levy, Yu.G. Suchkov, V.Ya. Bessonova, Yu.S. Zueva, V.G. Sližkova, M.M. Livshits, N.N. Pankova, G.I. Ruban, S.M. Savenko, A.P. Mityukov, I.I. Kornev, A.I. Voronkov
Preskusni laboratorijski center MGTSD, KB UD predsednika Ruske federacije,
Moskovska medicinska akademija. Sechenov, Centralna klinična bolnišnica MC UD Predsednik Ruske federacije

Za izračun povprečne vrednosti števila živih spor na en biološki indikator je priporočljivo uporabiti Poissonovo porazdelitev. Linearna narava odvisnosti logaritma števila živih celic od časa sterilizacije ni potrjena z eksperimentalnimi rezultati. Uporaba velikega števila bioloških indikatorjev v poskusih za nadzor sterilizacije, visoko informativnega hranilnega medija in dolgih obdobij gojenja bioloških indikatorjev je omogočilo odkrivanje živih spor v njih po sterilizaciji pogosteje kot običajno in v skoraj vseh uporabljenih režimih. v praksi. Setev vsebine bioloških indikatorjev po sterilizaciji na gostem hranilnem mediju je potrdila skladnost porazdelitve petrijevk glede na število zraslih kolonij s Poissonovo porazdelitvijo, kar pomeni naključno in izolirano porazdelitev vitalnih spor v bioloških indikatorjih. V nekaterih poskusih je število bioloških indikatorjev z živimi sporami po relativno dolgih sterilizacijskih obdobjih preseglo število tistih po kratkih sterilizacijskih obdobjih, česar ni bilo mogoče pojasniti v okviru sprejetih predstav o sterilizaciji. Predpostavili smo, da je sterilizacija dušeno valovit samonihajni proces in to je bistvo odvisnosti logaritma števila živih spor v bioloških indikatorjih od časa sterilizacije.
Kontrola sterilizatorjev v zdravstvenih ustanovah v Moskvi je pokazala, da v vseh primerih obstajajo biološki indikatorji, ki po sterilizaciji vsebujejo žive spore. Verjetnost nezadovoljivih rezultatov analize bioloških indikatorjev (10 -6), ki jih priporočajo standardi, je veliko manjša od dosežene v naših raziskavah.
Eksperimentalno parno sterilizacijo segmentov tubulov iz sintetičnih materialov po predsterilizacijskem čiščenju so spremljali neugodni rezultati, podobni tistim z biološkimi indikatorji.
Število živih spor v biološkem indikatorju po sterilizaciji je verjetnostna vrednost, njihova detekcija pa je odvisna od števila indikatorjev v sterilizacijski komori, kakovosti hranilnega medija in trajanja gojenja pri ustrezni temperaturi.

Ustrezno orodje za oceno učinkovitosti sterilizacije so biološki indikatorji, ki v veliki meri posnemajo sterilizirane medicinske izdelke, kontaminirane z mikroorganizmi. Slednje je redundantno v smislu, da je namenjeno uničenju takšnega števila mikrobov, ki jih običajno ni na izdelkih, a jih načeloma, čeprav v redkih primerih, ni mogoče izključiti. Zato biološki indikatorji vsebujejo spore, odporne na sredstvo za sterilizacijo, v količinah, ki so za 2-3 velikosti večje od tistih, ki jih običajno najdemo na steriliziranih izdelkih. Ta pristop narekuje množična uporaba sterilizacije v zdravniška praksa in potrebo po odpravi nevarnosti okužbe bolnih in zdravih ljudi zaradi neučinkovite sterilizacije.

Ker se večina raziskovalcev drži prepričanja, da je logaritem števila mikroorganizmov v biološkem indikatorju ali na medicinskih pripomočkih linearna funkcija časa sterilizacije, je časovni okvir mogoče izračunati z zadostno gotovostjo. Do danes se v praksi uporablja več vrst sterilizacije - parna, vroč zrak, plin, sevanje, sevanje in nekatere druge. znan glavni proizvajalci oprema za sterilizacijo - "MMM", "Looks", "Johnson and Johnson" itd.

Zadali smo si določiti optimalne pogoje za uporabo bioloških indikatorjev v procesu sterilizacije. Glavni predmet raziskav so bili biološki indikatorji za oceno parne sterilizacije. Biološke indikatorje smo pripravili in ovrednotili v našem laboratoriju v skladu z sprejete norme. Med predstavitvijo dobljenih rezultatov so opisane metodološke značilnosti te študije.

Kadarkoli pripravimo serijo spor Bacillus stearothermophilus za bioindikatorje, ki nadzorujejo sterilizacijo s paro, se testira njihova toplotna stabilnost. Končni biološki indikatorji (približno 10 6 spor na indikator) morajo vsebovati žive spore po 5 minutah sterilizacije s paro pri 120–121 °C, vendar ne po 15 minutah sterilizacije pod določenimi pogoji. Proizvodne serije bioloških indikatorjev, ki jih proizvaja naša ustanova, izpolnjujejo te zahteve. Naše izkušnje obsegajo več kot 70 proizvodnih serij spor B. stearothermophilus, iz katerih je bilo proizvedenih na milijone bioloških indikatorjev. Vsaka serija bioloških indikatorjev je bila večkrat testirana na toplotno stabilnost, v zvezi s katero se je nabrala precejšnja količina materiala. Prepričali smo se, da po 15 minutah avtoklaviranja pri 121 ° C v bioloških indikatorjih niso bile odkrite običajno žive spore, vendar v redkih primerih od 10 indikatorjev (praviloma je bilo takšno število indikatorjev vzeto na izpostavljenost), 1 ali 2 testa sta vsebovala žive spore.

V skladu z mednarodnimi standardi je priporočljivo določiti število spor v bioloških indikatorjih po različnih izpostavljenostih pri 120-121 ° C, da se vsebina indikatorjev nacepi na trden hranilni medij, nato pa se goji v termostatu in prešteje število kolonije. Ta tehnika je priporočljiva za tiste izpostavljenosti, pri katerih se pričakuje, da bo število enot, ki tvorijo kolonije (CFU), večje od 50 in manjše od 1000.

Za tiste izpostavljenosti, pri katerih se pričakuje, da bo povprečno število spor v biološkem indikatorju manjše od 1 (tj. ne bo vsak indikator vseboval preživetja sposobnih spor), je priporočljivo uporabiti porazdelitev redkih in naključni dogodki je Poissonova porazdelitev.

Sledi način uporabe Poissonove porazdelitve za navedene namene.
P x \u003d e -m * m x / x!
kjer je P x ​​delež bioloških indikatorjev z določenim številom sposobnih spor x;
x je specifično število sporov v kazalniku;
X! — produkt celih števil v zaporedju x (x-1) (x-2) ... [x-(x-1)];
m povprečno število trosov v skupini bioloških indikatorjev;
e je eksponent.

Če določeno število bioloških indikatorjev ne vsebuje živih spor (x = 0), potem
P 0 \u003d k / n,
kjer je k število bioloških indikatorjev, ki ne vsebujejo živih spor;
n je število bioloških indikatorjev v skupini.

Vzemimo logaritem dane enačbe Poissonove porazdelitve:
ln P x \u003d ln (e -m * m x / x!).

Glede na to 0! \u003d 1 in m 0 \u003d 1, potem (ln k - ln n) \u003d -m; m = log n — log k.

Povedano drugače, povprečno število spor na biološki indikator v skupini je enako razliki med naravnimi logaritmi števila vseh bioloških indikatorjev in števila bioloških indikatorjev brez živih spor. Veljavnost zgornje metode za določanje povprečnega števila trosov na biološki indikator potrjujemo z inokulacijami na agar (slika 8).

riž. 8. Rezultati testiranja bioloških indikatorjev s sporami, posušenimi na kromatografskem papirju (10 6 spor biološkega indikatorja, sterilizacija s paro 121 °C - 45 min., tip indikatorja Attest). Y-os prikazuje število bioloških indikatorjev. Levi stolpec so rezultati testa za običajne biološke indikatorje, desni stolpec pa biološki indikatorji z novim hranilnim medijem. Osenčen del stolpcev je število bioloških indikatorjev z živimi sporami.

Dajemo primer izračunov. V sterilizacijsko komoro smo postavili 20 bioloških indikatorjev, po izpostavitvi pa smo v vsak biološki indikator vlili obarvano hranilno gojišče (serija hranilnih gojišč, uporabljenih v našem laboratoriju, je reagirala s spremembo barve na prisotnost posameznih živih spor v biološkem indikatorju, ko gojijo v termostatu pri 55 o C). Od 20 bioloških indikatorjev, uporabljenih v primeru, smo pri 14 ugotovili spremembo lila barve hranilnega medija v rumeno, pri 6 indikatorjih pa je barva gojišča po gojenju v termostatu ostala enaka. Zato je m \u003d (ln 20 - ln 6) \u003d 2,996 - 1,792 \u003d 1,204. Zdaj, če želimo to vrednost m vključiti v koordinatni sistem decimalnega logaritma števila spor v bioloških indikatorjih in času, moramo vzeti lg m = lg 1,204 = 0,081.

Pri številnih določanjih toplotne odpornosti trosov je bil pojav občasno opažen, ko sta 1-2 biološka indikatorja od 10 vsebovala žive spore po 15-minutnem avtoklaviranju. V nekaterih poskusih smo nabor osvetlitev razširili na 20, 25, 30 in 35 minut. avtoklaviranje. V nekaterih, čeprav redkih primerih, smo opazili obstoj živih spor v bioloških indikatorjih po relativno dolgi izpostavljenosti avtoklaviranju. Razlage takih nepričakovanih rezultatov kot naključnih ni bilo mogoče prepoznati kot legitimno, saj ni imela razlage. Najbolj verjetna domneva je bil obstoj osebkov, odpornih na vročino, v populaciji spor, ki torej ostanejo sposobni preživeti po dolgotrajni izpostavljenosti. Vendar ta domneva ni bila potrjena, saj so imeli potomci spor iz porumenelih bioloških indikatorjev po 20-40 minutah avtoklaviranja enako stopnjo toplotne stabilnosti kot začetna suspenzija spor.

Opisanemu problemu je bil dodan še en, povezan z dvomi o linearni odvisnosti logaritma števila spor v biološkem indikatorju od časa sterilizacije. Dobili smo vtis, da če opazimo linearno odvisnost, se ta pojavi le v določenih delih grafa. Kar zadeva pogoje za spremembo barve hranilnega medija v bioloških indikatorjih po avtoklaviranju, so bili v praksi omejeni na 48 ur (to obdobje je priporočeno v navodilih, ki so v obtoku v Rusiji, ZDA in evropskih državah, čeprav 10 let Ko barvni mediji niso bili uporabljeni, je opazovanje pojava motnosti v hranilni juhi trajalo vsaj 7 dni). Vendar pa smo v naših poskusih opazili, da se sprememba barve hranilnega medija med gojenjem v termostatu ne pojavi samo v prvih 48 urah, ampak tudi v naslednjih dneh, zlasti pri tistih bioloških indikatorjih, ki so bili v sterilizacijski komori razmeroma dolgo.

Če smo prejšnja leta kot nosilec spor uporabljali inzulinske viale, potem v zadnje čase prešli na Eppendorfove epruvete iz polipropilena s prostornino 1,5 ml. Ta posoda se je izkazala za veliko bolj priročno kot nosilec spor kot viale z insulinom.

Glede na vse navedeno smo se odločili, da v tej raziskavi uporabimo biološke indikatorje, pripravljene na naslednji način. Suspenzijo spor, ki smo jo uporabili za izdelavo proizvodne serije bioloških indikatorjev, smo razredčili z destilirano vodo tako, da se je zahtevano število spor pojavilo v 0,02 ml, ki smo ga dodali v vsako Eppendorfovo epruveto. Nato smo biološke indikatorje pustili 24 ur. pri 37°C, da se spore posušijo, nato pa smo biološki indikator (Eppendorfova epruveta je bila odprta) dali v posebno vrečko Wipack Medical, opremljeno s papirnatim zgodnjim indikatorjem procesa sterilizacije. Po avtoklaviranju smo v vsak indikator vlili 0,5 ml obarvanega hranilnega medija in ga postavili v termostat pri 55 °C za 7 dni z dnevno registracijo spremembe barve hranilnega medija v rumeno. Če se je to zgodilo, je bil ob koncu časa avtoklaviranja prepoznan obstoj živih spor.

Preprosto je videti, da je število bioloških indikatorjev, v katerih je bilo mogoče odkriti žive spore, odvisno od začetnega števila indikatorjev, postavljenih v sterilizacijsko komoro. Če biološki indikatorji posnemajo medicinske pripomočke, kontaminirane z mikroorganizmi, potem lahko sumimo, da lahko delež bioloških indikatorjev z živimi sporami po sterilizaciji ustreza deležu medicinskih pripomočkov, ki ostanejo nesterilni. To je smisel uporabe kontrole sterilizacije s pomočjo bioloških indikatorjev. A njihovega števila ni mogoče povečati na velike številke, vsaj ne na število steriliziranih medicinskih pripomočkov. Po standardih, sprejetih v Rusiji, je 5 bioloških indikatorjev nameščenih v relativno majhnih avtoklavih in do 13 v velikih avtoklavih. Zdi se nam, da navedeno število bioloških indikatorjev za preučevanje sterilizacijskih napak očitno ni dovolj, zato je bilo v spodaj predstavljenih poskusih uporabljeno veliko večje število indikatorjev za nadzor sterilizacije.

Tako smo v naših poskusih uporabili ne le večje število bioloških indikatorjev kot običajno, ampak jih tudi opazovali dlje časa po sterilizaciji med gojenjem v termostatu. Končno smo uporabili ne le število trosov pri indikatorju, ki je priporočeno v standardih (10 6 spor), ampak tudi nekaj manj (10 5) in nekaj več (10 7). V sterilizacijsko komoro avtoklava v večini primerov ni bilo nameščeno nič drugega kot biološki indikatorji, da bi se izognili obtožbam o prenapolnjenosti komore.

Podatki, predstavljeni na sl. 1 kažejo, da so posamezni indikatorji vsebovali žive spore tudi po 120 minutah avtoklaviranja (samoumevno je, da če bi uporabili 5 ali 10 bioloških indikatorjev, tega dejstva ne bi "opazili"). V tem poskusu smo uporabili spore dveh sevov B. stearothermophilus - VKM-718 (proizvodni sev, ki se uporablja ne samo v Rusiji, ampak tudi v drugih državah, kot tudi nedavno izoliran sev KK s povečano toplotno odpornostjo). Presenetljivo so bili indikatorji z živimi sporami včasih odkriti po 45 ali 60 minutah. avtoklaviranje vsaj po 30 minutah sterilizacije.

B. stearothermophilus spore
VK-718 QC
10 7 2,2*10 6
10 6 1,1*10 6
10 5 0,7*10 6

riž. Slika 1. Vpliv sterilizacije s paro v avtoklavu VK-75 (121 o C brez vakuuma v sterilizacijski komori) na sposobnost preživetja spor B. stearothermophilus (seva VK-718 in KK). Na ordinati je prikazano število bioloških indikatorjev za vsako izpostavljenost (25 bioloških indikatorjev), na abscisi čas sterilizacije (min.). Osenčen del stolpcev je število bioloških indikatorjev z živimi sporami.

Neskladje med pridobljenimi podatki in pričakovanimi nas je prisililo v razvoj novega hranilnega medija, katerega možnosti za manifestacijo živih spor v bioloških indikatorjih, ki so bili sterilizirani, so bile veliko večje kot pri prejšnjem hranilnem mediju.

Skupaj s prejšnjim hranilnim medijem sta bili testirani dve novi formulaciji, ena od njiju pa se je izkazala za zelo informativno (slika 2).


riž. Slika 2. Vpliv hranilnega medija na manifestacijo viabilnosti spor B. stearothermophilus v bioloških indikatorjih (nosilci - insulinske viale ali Eppendorfove epruvete) po sterilizaciji s paro (121 o C - 45 min.). n je število bioloških indikatorjev pri vsaki izpostavljenosti, zasenčen del stolpcev je število bioloških indikatorjev z živimi sporami. A — poskusi s proizvodno serijo 71, število spor v biološkem indikatorju 3,4*10 5, B — poskusi s proizvodno serijo 69, število spor v biološkem indikatorju 10 6 . Številke 1, 2, 3 označujejo vzorce z različnimi hranilnimi gojišči.

Tako skupaj s povečanim številom bioloških indikatorjev, podaljšanjem obdobja opazovanja indikatorjev, gojenih v termostatu, ni bil uporabljen le sprejeti hranilni medij, temveč tudi nov medij, ki se je izkazal za bolj informativen od prejšnjega. Omeniti velja, da so bili v eno vrečko nameščeni trije biološki indikatorji z različnim številom spor, vrečke so bile naključno postavljene v sterilizacijsko komoro, po sterilizaciji pa so bili biološki indikatorji istočasno napolnjeni z isto serijo hranilnega medija in puščeni v istem termostatu. . Če smo uporabili stare in nove hranilne gojišča, se je število paketkov podvojilo.

Če smo v prejšnjih poskusih biološke indikatorje avtoklavirali pri 121 o C 45 minut, potem smo v poskusu, predstavljenem na sl. 3 so bili biološki indikatorji sterilizirani s paro pri temperaturi 132 o C (oba načina sta bila izvedena v avtoklavu domače proizvodnje — VK-75).

riž. Sl. 3. Učinek sterilizacije s paro pri 132 o C na biološke indikatorje v odvisnosti od začetnega števila spor v njih (10 5 , 10 6 in 10 7 in časa avtoklaviranja bioloških indikatorjev (5, 10, 20, 40 in 60 min.).Na ordinatah osi - število bioloških indikatorjev v poskusu.V vsakem paru stolpcev na levi - rezultati določanja števila bioloških indikatorjev z živimi sporami, ko so bili gojeni v običajnem hranilnem mediju. , na desni - število bioloških indikatorjev z živimi sporami, ko so bili gojeni v novem hranilnem mediju število bioloških indikatorjev z živimi sporami.

V predstavljenem na sl. 3 podatki so uporabili različne osvetlitve, vključno s tisto (20 min.), ki je priporočena v ustreznem načinu. Opozoriti je mogoče, da je bilo s pomočjo novega hranilnega medija in včasih celo z uporabo prejšnjega mogoče odkriti žive spore v bioloških indikatorjih po avtoklaviranju 20–60 minut. Poleg tega se zdi, da je čas avtoklaviranja v prikazanem na sl. 3 meje, ni pomembno vplivalo na delež bioloških indikatorjev z živimi sporami.

Dobljeni rezultati analize bioloških indikatorjev po sterilizaciji so nas spodbudili k karakterizaciji režimov parne sterilizacije, ki so sprejeti v Rusiji (slika 4). Prva dva načina sta bila izvedena v aparatu VK-75, tretji in četrti pa v aparatu podjetja "MMM" (Nemčija). Samoumevno je, da so bile vse sterilizacijske naprave, uporabljene v naših raziskavah, v brezhibnem tehničnem stanju.

riž. 4. Vpliv hranilnega medija na rezultate bakteriološke kontrole sterilizacije. Y-os prikazuje število bioloških indikatorjev v poskusu. Nad vsakim parom stolpcev je navedeno začetno število trosov v bioloških indikatorjih. V vsakem paru stolpcev na levi - rezultati določanja števila bioloških indikatorjev z živimi sporami, ko so bili gojeni v običajnem hranilnem mediju, na desni - število bioloških indikatorjev z živimi sporami, ko so bili gojeni v novem hranilni medij. Osenčen del stolpca je število bioloških indikatorjev z živimi sporami. Načini sterilizacije so podani nad stolpci.

Preprosto je videti, da pri nobenem od preizkušenih sterilizacijskih režimov ni prišlo do popolne sprostitve bioloških indikatorjev iz sposobnih spor B. stearothermophilus, zlasti pri uporabi novega hranilnega medija. Treba je opozoriti, da se odstotek bioloških indikatorjev z živimi sporami nekoliko poveča, če se opazovanje barve prejšnjega hranilnega medija v termostatu ne izvaja 48 ur, ampak 72 ur. (Sl. 5, po Sl. 1 za sev VKM-718).

riž. 5. Dinamika kalitve bioloških indikatorjev (10 5 , 10 6 , 10 7 spor v bioloških indikatorjih) po avtoklaviranju pri 121 o C 30, 45, 60, 90 in 120 min. Za vsak vzorec je bilo odvzetih 25 bioloških indikatorjev. Kalitev bioloških indikatorjev smo zabeležili po 18, 24, 48 in 72 urah njihove kultivacije pri 55 o C. Stolpci označujejo število bioloških indikatorjev z živimi sporami za dano obdobje beleženja rezultatov.

Uporaba novega hranilnega medija očitno pospeši pojav največjega števila bioloških indikatorjev z živimi sporami po sterilizaciji pri gojenju v termostatu pri 55 o C (slika 6).

riž. 6. Dinamika kalitve bioloških indikatorjev (10 5 ali 10 6 spor v bioloških indikatorjih) po avtoklaviranju (121 o C, 45 min.). Za vsak vzorec smo odvzeli 20 bioloških indikatorjev. Kalitev smo zabeležili po 18, 24, 48 ali 120 urah. gojenje pri 55 o C v različnih hranilnih gojiščih.

Izkazalo se je, da plinska sterilizacija s formaldehidom (MMM, Nemčija) ne sprosti bioloških indikatorjev iz sposobnih spor B. stearothermophilus (slika 7.)

Sterilizacija s formaldehidom 75 o C - 10 min.




riž. 7. Vpliv hranilnega medija na rezultate bakteriološke kontrole sterilizacije. Oznake v zgornjem delu slike so enake kot na sl. 4. Dinamika rasti bioloških indikatorjev je prikazana v spodnjem delu slike. Pod črtami je čas gojenja v dnevih. Oznake so enake kot na sl. 5.

Vendar se zdi, da so rezultati sterilizacije s formaldehidom, vsaj pri uporabi istega gojišča, nekoliko boljši od rezultatov kontrol sterilizacije s paro.

V naših poskusih smo spore v bioloških indikatorjih sušili neposredno v Eppendorfovih epruvetah, v ameriških bioloških indikatorjih (Attest) podjetja 3M pa smo spore sušili na trakove papirja in jih v takšni obliki vnašali v plastične posode. ki so bili opremljeni z ampulo z barvnim hranilnim medijem. Po sterilizaciji se ampula razbije s preprostim pritiskom na indikatorsko telo, hranilni medij se vlije na papir s posušenimi sporami, nato pa je pri gojenju v termostatu možno pritrditi žive spore, če se barva medija spremeni v rumeno. . Izdelali smo nekakšne indikatorje Attest in jih razvili s starimi in novimi hranilnimi mediji. Izkazalo se je, da je uporaba novega hranilnega medija pomembno izboljšala rezultate biološkega indikatorja, podobnega Attestu.

Tako smo v naše poskuse praviloma vnesli 120 bioloških indikatorjev (vsak paket z biološkimi indikatorji je zavzemal prostornino približno 0,1 l) z različnimi začetnimi koncentracijami spor. Polovico indikatorjev smo proučevali s starim hranilnim medijem, drugo polovico pa z novim. V večini primerov so bili tisti biološki indikatorji, ki so bili pregledani z novim hranilnim medijem, po avtoklaviranju najprej napolnjeni z majhno količino tekočine. Polovico tega volumna smo porabili za setev na hranilni agar, preostanku pa smo dodali hranilni medij. Gojenje je potekalo v termostatu pri 55 o C. Zrasle kolonije smo prešteli.

Ta opažanja so bila podlaga za primerjavo porazdelitve petrijevk agarja glede na število naraslih kolonij s teoretično Poissonovo porazdelitvijo (prisotnost posod brez naraslih kolonij je omogočila izračun povprečne vrednosti števila kolonij na eno posodo). , nato pa iz tabel določimo teoretično porazdelitev in jo primerjamo z opazovano v poskusu) . Izhajali smo iz stališča, da je vsota Poissonovih porazdelitev tudi Poissonova porazdelitev; v izračune so bili vključeni podatki vseh treh skupin bioloških indikatorjev (105, 106, 107). Zato je bilo v vsaki skupini 60 petrijevk.

Iz podatkov, predstavljenih na sl. 9., izhaja, da je za vse proučevane načine porazdelitev petrijevk glede na število zraslih kolonij ustrezala Poissonovi porazdelitvi. In to po drugi strani nakazuje, da so bile preživetje sposobne spore, ki so ostale po sterilizaciji, ločene entitete, neodvisne druga od druge. Izjema so bili podatki o režimu parne sterilizacije 121 o C - 45 min., kjer je teoretična krivulja pomembno odstopala od tiste, ki smo jo dobili v poskusu. V tem slednjem primeru je treba priznati, da so ta odstopanja posledica tvorbe grudic ali grudic trosov v biološkem indikatorju, ki razpadejo na posamezne spore, ko vsebino presejemo na površini agarja. Tako ali drugače, vendar ni dvoma, da po sterilizaciji posamezne spore ostanejo sposobne preživetja v bioloških indikatorjih, medtem ko velika večina spor umre. Vsaj takšna slika nastane z izbranim številom bioloških indikatorjev, nameščenih v sterilizacijsko komoro.

riž. 9. Ujemanje dejanskih materialov (število kolonij na agarju) pri različnih načinih parne in plinske sterilizacije s porazdelitvijo redkih in naključnih dogodkov. Na osi y je prikazano skupno število bioloških indikatorjev sterilizacije (seštevek rezultatov za tri skupine bioloških indikatorjev z 10 5 , 10 6 in 10 7 sporami). Na abscisi je prikazano število CFU (enot, ki tvorijo kolonije), ki so zrasle na agarju po inokulaciji biološkega indikatorskega materiala. Polna črta je dejanski podatek, črtkana črta je izračunana črta v skladu s porazdelitvijo naključnih in redkih dogodkov (odsotnost prekinjene črte na grafu kaže na sovpadanje izračunanih in eksperimentalnih podatkov).

Eden od osupljivih paradoksov je znatno odstopanje eksperimentalnih podatkov od linearne odvisnosti logaritma števila spor v bioloških indikatorjih od časa sterilizacije. Podatki o odkrivanju vitalnih spor kasneje od začetka sterilizacije sploh niso ustrezali prevladujočim predstavam. In podatki o pogostejšem odkrivanju sposobnih spor v poznejšem času kot prej, kar je bilo ugotovljeno v nekaterih poskusih, se sploh niso prilegali zavesti. Zgodilo se je celo, ko po 15-minutni izpostavljenosti spore v bioloških indikatorjih niso bile sposobne preživetja, po 45-minutni izpostavljenosti pa so bile v istem poskusu najdene celo posamezne, vendar sposobne spore.

V prispevku predstavljamo našo interpretacijo procesa odmiranja trosov med sterilizacijo. Tukaj predstavljena predpostavka še nima zadostnih dokazov, vendar pojasnjuje zgoraj omenjeni paradoks.

Predvidevamo, da odvisnost logaritma števila spor v bioloških indikatorjih od časa sterilizacije ni linearna, temveč valovita. Glede na sl. 1 smo podali našo interpretacijo odvisnosti logaritma števila spor od časa sterilizacije z uporabo tistih povprečnih vrednosti števila spor v bioloških indikatorjih, ki so bile izračunane s Poissonovo porazdelitvijo (sl. 11, 12 ). Najprej pa predstavimo odvisnost območja za določanje povprečnih vrednosti od števila bioloških indikatorjev (slika 10).

riž. 10. Obseg Poissonove porazdelitve za določanje srednjih vrednosti (m) za različno število bioloških indikatorjev v skupini (številke na sredini slike).

riž. 11. Vpliv sterilizacije s paro v avtoklavu VK-75 (121 o C brez vakuuma v sterilizacijski komori) na sposobnost preživetja spor B. stearothermophilus, sev VK-718. Valovite krivulje - interpretacija dejanskih podatkov. Na osi y je decimalni logaritem povprečne koncentracije spor v biološkem indikatorju, na abscisi čas sterilizacije (min.). Vodoravne črte omejujejo obseg Poissonove porazdelitve za določanje povprečij.

riž. 12. Vpliv sterilizacije s paro v avtoklavu VK-75 (121 o C brez vakuuma v sterilizacijski komori) na viabilnost spor B. stearothermophilus, sev KK. Valovite krivulje - interpretacija dejanskih podatkov. Na osi y je decimalni logaritem povprečne koncentracije spor v biološkem indikatorju, na abscisi čas sterilizacije (min.). Vodoravne črte omejujejo obseg Poissonove porazdelitve za določanje povprečij.

Za določitev povprečne vrednosti so potrebni biološki indikatorji brez živih spor, za označitev meja cone povprečnih vrednosti pa je potrebno, da vsaj en biološki indikator vsebuje žive spore ali, nasprotno, vsaj en biološki indikator je brez preživetja sposobnih spor. Iz primerjave različnih con lahko sklepamo, da se s povečevanjem števila bioloških indikatorjev najbolj povečajo možnosti spodnje cone, medtem ko se njen zgornji del nekoliko razširi. Poissonova porazdelitev je prikazana v tabeli in z uporabo zgoraj navedenega je mogoče izračunati potrebno število bioloških indikatorjev, kar omogoča upati na detekcijo veliko večjega števila sposobnih spor po sterilizaciji.

Predstavitev dejanskih podatkov z valovitimi krivuljami omogoča razumevanje, zakaj se biološki indikatorji s preživetjem sposobnimi sporami v nekaterih poskusih tako nenavadno vrstijo na grafih. Navsezadnje je izbira točk na časovni osi naključna, ni povezana z vzorci smrti trosov in ne upošteva pričakovane valovite narave. Poleg tega se prav lahko zgodi, da dno. del vala okoli 15 min. lahko presega možnost detekcije živih spor v bioloških indikatorjih (z izbranim številom le-teh), pri daljši izpostavljenosti pa je izbira časovne točke sovpadala z zgornjim delom vala in omogočala detekcijo bioloških indikatorjev z žive spore.

Verjamemo, da odvisnost med logaritmom števila spor v biološkem indikatorju od časa sterilizacije odraža dušen valovit samonihajni proces, povezan z dejstvom, da ne le spore, ampak tudi pogoji, ki jih obkrožajo, določajo rezultat sterilizacije.

Naslednja tabela povzema rezultate kontrole različne vrste sterilizacija s pomočjo bioloških indikatorjev v napravah, ki se uporabljajo v praktičnih zdravstvenih ustanovah v skladu z režimi, ki jih določajo obstoječi standardi. Uporabili smo celoten cikel sterilizacije, veliko število bioloških indikatorjev, njihovo dolgotrajno gojenje po sterilizaciji, stare in nove hranilne gojišča.

Zbirna tabela rezultatov biološke kontrole sterilizacije

№
št 		Sterilizacijski aparati Sterilizacija Biološki indikatorji
Ime podjetje-
proizvajalec,
država 		leto
sprostitev 		glasnost
steriliziran-
racionalno
kamere 		pogled način test-
kultura 		število
spor 		število
indica-
tori noter
sterilizacijo 		% z
vitalen
lasten
spori
po
sterilizacijo
vsakdanji
hraniti.
sreda 		novo
hraniti.
sreda
1. GK-100-ZM Tjumenski obrat
medicinska oprema,
Rusija		 1993 100 l Steam 121 o C,
45 min.		 B. stearo-
themophilus		 10 6 40 0 10
2. « « « « « « « « 40 10 25
3. BK-75 « « 75 l « « « 3*10 5 120 20 45
4. « « « « « « « 10 6 60 25 65
5. « « « « « « « 10 5 80 25 75
10 6 80 3 100
10 7 80 13 100
6. « « « « « « « 10 5 75 0 7
10 6 75 0 8
10 7 75 20 20
7. « « « « « « « 10 5 75 0 12
10 6 75 0 13
10 7 75 20 22
8. GK-100-ZM « « 100 l « « « 10 5 40 15 20
10 6 40 0 15
10 7 40 0 35
9. BK-75 « 1992 75 l « 121 o C,
45 min.		 « 10 5 40 0 5
10 6 40 0 25
10 7 40 0 25
10. « « « « « « « 10 6 40 20 50
10 7 40 5 60
11. BK-75 « 1992 75 l Steam 121 o C,
45 min.		 B. stearo-
themophilus		 10 5 40 30 95
10 6 40 50 90
10 7 40 15 100
12. « « « « « « « 10 4 40 35 75
10 6 40 25 35
10 7 40 50 40
13. GK-100-3M**) « 1988 100 l « « « 10 5 40 10 10
10 6 40 10 10
10 7 40 10 15
14. GK-100-3M**) « « « « « « 10 5 40 5 0
10 6 40 0 10
10 7 40 5 0
15. GKD-560 "LAD"
Rusija		 1996 560 l « 120 o C,
20 minut.		 10 5 40 10 5
10 6 40 55 10
10 7 40 65 55
16. Securox "MMM",
Nemčija		 1993 0,5 m 3 « « « 10 5 40 15 30
10 6 40 20 45
17. « « « « « « « 10 5 40 25 70
10 6 40 10 75
18. « « « « « « « 10 5 40 10 80
10 6 40 0 80
10 7 40 10 75
19. Grad
m/s 3622		 ZDA 1997 680 l « « « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 5
10 6*) 0 0 —
10 7 40 0 0
20. Selectomac "MMM",
Nemčija		 1993 100 l Steam « « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 10
10 7 40 5 20
21. GK-100-3M**) Tjumen. š-d
medooor.,
Rusija		 1993 100 l « 132 o C,
20 minut.		 « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 5
10 7 40 10 0
22. VK-75 « 1992 75 l « « « 10 5 40 5 40
10 6 40 5 60
10 7 40 5 75
23. Selectomac "MMM",
Nemčija		 1993 100 l Steam 134 o C,
5 minut.		 B. stearo-
themophilus		 10 5 40 0 0
10 6 40 0 20
10 7 40 5 10
24. GKD-560 "LAD"
Rusija		 1996 560 l Steam 134 o C,
5 minut.		 « 10 5 40 45 25
10 6 40 50 35
10 7 40 35 100
25. Securex "MMM",
Nemčija		 1993 500 l « « « 10 5 40 20 55
10 6 40 20 45
10 7 40 10 70
26. Grad
m/s 3622		 ZDA 1997 680 l « 134 o C,
10 min.		 « 10 5 40 0 0
10 6 40 0 20
10 6*) 20 0 —
10 7 40 20 25
27. « « « « « « « 10 5 40 0 25
10 6 40 5 15
10 7 40 5 30
28. kombimak "MMM",
Nemčija		 1993 70 l Plin
(formalno
dehid)		 75oC
10 min.		 « 10 5 40 5 20
10 6 40 10 45
10 7 40 5 20

Opomba:*) — Za kontrolo smo uporabili biološke indikatorje Biosign podjetja Castle, ki vsebujejo blagovno znamko hranilnega medija.
**) - Na predvečer testov je bila dostavljena nova sterilizacijska komora.

Najpogostejši simptom rezultatov kontrole sterilizacije je, da ni bilo mogoče preveriti, ali so bili vsi biološki indikatorji ob koncu časa sterilizacije sterilni. Tako ta najpomembnejša kontrola priča o neučinkovitosti v sprejetem smislu sterilizacije, najbolj zanesljiva pa je sterilizacija s paro. Ker je lahko odmerek 10 7 spor v biološkem indikatorju prepoznan kot previsok, je priporočljivo ločeno obravnavati rezultate sterilizacijske kontrole z biološkimi indikatorji, ki vsebujejo 10 5 in 10 6 spor. Pri uporabi novega hranilnega medija so nekateri biološki indikatorji po sterilizaciji v vseh primerih vsebovali žive spore. Če je bil uporabljen isti hranilni medij, potem v treh primerih pri nadzoru aparata VK-75 (30%) biološki indikatorji niso vsebovali živih spor. Pogosteje so bili podobni rezultati opaženi pri kontroli naprav tuje proizvodnje, kar lahko služi kot pokazatelj kvalitativne superiornosti nad ruskimi avtoklavi.

Razlogi za to stanje so nejasni, prav tako pa tudi možni predlogi za izboljšanje sterilizacije. Pri uporabi papirnatih sterilizacijskih indikatorjev je težko pričakovati kaj več od spremljanja stanja nekaterih specifikacije aparati za sterilizacijo, zlasti na začetku postopka. Popolno zanašanje na papirnate indikatorje lahko vodi do napačnih sklepov o učinkoviti sterilizaciji.

Doslej smo govorili o usodi bioloških indikatorjev v procesu sterilizacije, ki morda ne odražajo v vseh primerih značilnosti dejanske sterilizacije medicinskih pripomočkov. Za sterilizacijo so bili vzeti 1 cm dolgi kosi polivinilkloridnih cevi kot "medicinski izdelki", po temeljitem pranju so bili posejani s sporami B. stearothermophilus v volumnu 0,02 ml, posušeni in izpostavljeni predsterilizacijskemu čiščenju s kuhanjem v 2 % raztopine sode 15 minut. . Po izpiranju v sterilni destilirani vodi smo segmente epruvet naslednji dan sterilizirali v vrečkah (121 o C - 45 min), nakar smo vsak segment dali v sterilno Eppendorfovo epruveto in napolnili s hranilnim medijem. Gojenje segmentov je potekalo v termostatu pri 55 o C. Kontrolni segmenti so bili zasejani s sporami, vendar niso bili obdelani pred sterilizacijo. Z drugimi besedami, v tem poskusu so posnemali poskuse z biološkimi indikatorji.

Dobljeni rezultati so presenetljivi v svoji nepričakovanosti - segmenti epruvet, obdelani z raztopino sode pri 100 o C, so se po sterilizaciji izkazali za enako onesnažene, saj niso bili podvrženi predhodnemu čiščenju, ki trenutno zavzema pomembno mesto v tehniki sterilizacije. .

riž. 13. Rezultati sterilizacije segmentov PVC cevi po njihovem čiščenju pred sterilizacijo in brez njega. V vsakem paru stolpcev na levi - število segmentov cevi z živimi sporami pri gojenju z običajnim hranilnim medijem, na desni - z novim hranilnim medijem. Številke nad stolpci so število spor B. stearothermophilus, ki so bile prvotno uporabljene notranja površina cevni odseki.

V drugem poskusu so bili kosi silikonskih gumijastih cevi velikosti 1 cm po temeljitem pranju v destilirani vodi zasejani s sporami B. stearothermophilus, nato pa puščeni 1 uro pri sobni temperaturi. Ob koncu določenega časa eksperimentalne segmente za 30 minut. potopimo v 0,2% raztopino dezinfekcijskega sredstva "Septabic", segmente temeljito speremo z destilirano vodo, posušimo na filtrirnem papirju. Kontrolni segmenti so bili zasejani s sporami, vendar niso bili obdelani s Septabicom. Naslednji dan smo vse segmente dali v vrečke in sterilizirali v avtoklavu (121 o C - 45 min.), nakar smo vsak segment dali v Eppendorfovo epruveto, napolnili s hranilnim medijem in gojili pri 55 o C.

V poskusu (slika 14) so ​​bili rezultati testa nekoliko boljši kot v prejšnjem, saj je še vedno obstajala razlika v deležu kaljenih poskusnih in kontrolnih odsekov silikonskih gumijastih cevi, vendar te razlike niso bile velike. Vsekakor se je tudi po predsterilizacijskem čiščenju sterilizacija maket medicinskih pripomočkov izkazala za neučinkovito. In to kljub dejstvu, da je veliko lažje obdelati majhne koščke cevi kot velike in kompleksne izdelke, kjer so možna mesta kontaminacije z mikroorganizmi manj dostopna razkužilnim raztopinam.

riž. 14. Rezultati sterilizacije segmentov silikonskih cevi po njihovem čiščenju pred sterilizacijo in brez njega. V vsakem paru stolpcev na levi - število segmentov cevi z živimi sporami pri gojenju z običajnim hranilnim medijem, na desni - z novim hranilnim medijem. Številke nad stolpci kažejo število spor B. stearothermophilus, ki so bile prvotno nanesene na notranjo površino segmentov cevi.

Zaradi nenavadne narave dobljenih rezultatov je treba zagotoviti, da ni prišlo do tehničnih napak. Plošče s hranilnim agarjem so bile nameščene tako v prostorih kot v napi z laminarnim tokom, vendar bakterije B. stearothermophilus niso nikoli izolirali, niti jih niso izolirali iz hranilnega medija in drugih uporabljenih sestavin (v vsakem poskusu gojišče in destilirana voda na 10 agarju). plošče in 10 Eppendorfovih epruvet s hranilnim gojiščem, vendar neuspešno). Domneva, da se med sušenjem poveča število bakterij v bioloških indikatorjih, ni bila potrjena (znano je, da se B. stearothermophilus pri 37 o C ne razmnožuje).

Tako so dobljeni rezultati porazni, a vseeno, vsaj za nekatere avtorje, pričakovani. Od ogromne količine literature o toplotni inaktivaciji spornih bakterij, vključno s temeljnimi raziskavami, je naši interpretaciji najbližja monografija Moonblitna, Talrozeja in Trofimova, ki ni postavljal poskusov in je uporabil le literaturne podatke. Ti avtorji, ki razlagajo toplotno inaktivacijo spor s toplotno poškodbo vitalnih beljakovin in subletalno poškodbo membrane, so izrazili zaskrbljenost glede učinkovitosti sterilizacije: »... standardni pogoji toplotni učinek(120 o C, 30 min.) v nekaterih primerih ne zagotavljajo visoke zanesljivosti sterilizacije", "... obstaja temeljna nevarnost obnove in razmnoževanja v človeškem telesu mikroorganizmov, ki so bili razglašeni za mrtve." Po naših podatkih so tudi obvezni in nepatogeni termofili, kot je B. stearothermophilus, sposobni omejenega razmnoževanja pri 37 o C, če hranilnemu mediju dodamo človeško kri.

Ne samo biološki indikatorji so občasno vsebovali žive spore po sterilizaciji, ampak tudi modeli medicinskih pripomočkov, kontaminiranih s sporami. Poleg tega predsterilizacijska obdelava modelov z raztopino vrele sode ali 0,2% raztopino pripravka Septabic ni imela zadostnega učinka - sterilizacija je bila neučinkovita.

Zdaj je izziv razviti nove metode, ki lahko zagotovijo učinkovitost sterilizacije. Naše razumevanje kinetike sterilizacijskega procesa je omogočilo testiranje novih metodoloških predlogov, ki so se izkazali za obetavne, a zahtevajo celovito preverjanje.

zaključki

1. Porazdelitev redkih in naključnih dogodkov omogoča izračun povprečnega števila spor na biološki indikator za razmere, ko je število sposobnih spor majhno in jih ni v vsakem indikatorju.

2. Obstaja dovolj razlogov za dvom o linearni naravi razmerja med logaritmom števila spor v bioloških indikatorjih in časom od začetka sterilizacije. Viabilne spore smo našli v bioloških indikatorjih tudi po 1-2 urah v avtoklavu pri regulirani temperaturi.

3. Kontrolni poskusi sterilizacije s paro so uporabili precejšnje število bioloških indikatorjev, visoko zmogljive obarvane rastne medije in enotedensko inkubacijsko dobo, kar je na koncu omogočilo odkrivanje sposobnih spor v bioloških indikatorjih po sterilizaciji pogosteje kot običajno in v skoraj večina načinov, ki se uporabljajo v praksi.

4. Pri setvi vsebine bioloških indikatorjev po sterilizaciji na gostem hranilnem mediju so bile v nekaterih primerih ugotovljene posamezne kolonije B. stearothermophilus, v večini primerov pa je porazdelitev agarskih petrijevk glede na število kolonij natančno ustrezala Poissonovi porazdelitev, kar je pomenilo, da spore, ki so sposobne preživetja, niso odvisne ena od druge in so izolirane in naključne.

5. V nekaterih poskusih je odstotek bioloških indikatorjev z živimi sporami po dolgih obdobjih sterilizacije presegel delež po kratkih obdobjih sterilizacije, kar ni našlo zadovoljive razlage. Predpostavili smo valovit značaj odvisnosti logaritma števila živih spor v bioloških indikatorjih od časa sterilizacije.

6. Nadzor sterilizatorjev, nameščenih v praktičnih zdravstvenih ustanovah, je pokazal, da je v vseh primerih en ali drug del bioloških indikatorjev po sterilizaciji vseboval žive spore, verjetnost nezadovoljivih rezultatov analize indikatorjev pa se je izkazala za veliko večjo od priporočene v standardi.

7. Eksperimentalna parna sterilizacija segmentov cevi iz sintetičnih materialov, kontaminiranih s sporami po čiščenju pred sterilizacijo, je povzročila detekcijo vitalnih spor v več kot polovici vzorcev, to je rezultate, podobne tistim, pridobljenim z biološkimi indikatorji.

8. Število živih spor v biološkem indikatorju po sterilizaciji je verjetnostna vrednost, njihova detekcija pa je med drugim odvisna od števila indikatorjev v sterilizacijski komori.

Literatura

1. Abramova I.M. Novosti na področju sterilizacije medicinskih pripomočkov. Primer dezinfekcije, 1998, št. 3, str. 25.
2. Bolšev A.N., Smirnov N.V. Tabele matematične statistike. M., 1965.
3. Vaškov V.I. Protimikrobna sredstva in metode dezinfekcije za nalezljive bolezni. M., 1977.
4. Guterman R.L. Sredstva za nadzor toplotne sterilizacije medicinskih izdelkov. dis. kand. med. znanosti. M., 1993.
5. Kashner D. Življenje mikrobov v ekstremnih razmerah. M., 1981.
6. Levi M.I., Bessonova V.Ya., Livshits M.M. Uporaba barvnih gojišč pri nadzoru sterilizacije. Klinična laboratorijska diagnostika, 1993, št. 2, str. 65-67.
7. Levi M.I. Analiza škodljivih učinkov sterilizacije s paro in zrakom. Dezinfekcijsko poslovanje, 1996, št. 4, str. 58-63.
8. Levi M.I. Pomen kontrole sterilizacije s papirnatimi indikatorji in biološkimi testi. Dezinfekcijska dejavnost, 1997, št. 3, str. 24-28.
9. Levi M.I., Sučkov Yu.G., Ruban G.I., Miščenko A.V. Nove oblike bakterijskih testov za nadzor različnih režimov sterilizacije. Ibid, str. 29-33.
10. Levi M.I., Suchkov Yu.G., Livshits M.M. Optimizacija bioloških testov za nadzor sterilizacije s paro. Primer dezinfekcije, 1998, št. 2, str. 30-33.
11. Levi M.I. Numerično določanje vrednosti D, časa sterilizacije in izbira kontrolnih bioloških testov. Ibid, str. 34-42.
12. Smernice za nadzor parnih in zračnih sterilizatorjev. Ministrstvo za zdravje ZSSR z dne 28. februarja 1991 št. 15/6-5.
13. Moonblit V.Ya., Talroze V.L., Trofimov V.I. Toplotna inaktivacija mikroorganizmov. M., 1985.
14. ur. Ozeretskovsky N.A. in Ostanin G.I. Bakterijska in virusna terapevtska in profilaktična zdravila. Alergeni. Načini dezinfekcije in sterilizacije poliklinik. Sankt Peterburg, 1998.
15. Suchkov Yu.G., Levi M.I., Bessonova V.Ya. Nov termofilni sev za bakteriološko kontrolo parne sterilizacije (poročilo 1), Dezinfekcijsko poslovanje, 1996, št. 3, str. 28-33.
16. Biološki sistemi za testiranje sterilizatorjev – 1. del: Splošne zahteve. Evropski standard, Osnutek pr EN 866-1.1995.
17. Farrell J., Rose A.N. temperaturni učinek na mikroorganizme. V: Termobiologija, str. 147-218. Akad. tisk, London-New-York, 1967.
18. Graham G.S. Biološki indikatorji za bolnišnično in industrijsko sterilizacijo, str. 54-72. V: "Sterilizacija medicinskih izdelkov". Johnson in Johnson. Moskva, 1991.
19. Greene V.W. Načela in praksa dezinfekcije, konzerviranja in sterilizacije. Oxford, 1982.
20. Mednarodni standard ISO/DIS 14161. Sterilizacija izdelkov za zdravstveno nego – navodila za izbiro, uporabo in razlago rezultatov. 1998.
21. McCormick P.J., Scoville J.R. - ZDA patent št. 4.743.537, 1988
22. Medicinski pripomočki - Ocena populacije mikroorganizmov na izdelku. Smernice 2. dela, pr EN 1174-2.1994
23. Russel A.D. Uničenje bakterijskih spor. Akad. tisk, London-New-York, 1982.
24. Russel A.D. Temeljni vidiki odpornosti mikrobov na kemične in fizikalne dejavnike. V: "Sterilizacija medicinskih izdelkov", v. V, str. 22-42. Johnson in Johnson, 1991.
25. Sussman A., Halvorson H. Spore, njihovo mirovanje in kalitev. New-York-London, 1967.
26. Wicks J.H., Foltz W.E. Evropski patent št. 0414.968 A1, 1991
27. Zhuravleva V.I., Bolshedvorskaya Z.F. Vrednotenje hranilnih gojišč za gojenje testnih mikroorganizmov, ki se uporabljajo za kontrolo učinkovitosti sterilizacije v avtoklavih. Laboratorijsko poslovanje, 1988, št. 11, str. 63-64.
28. Kalinina N.M., Shilova S.V., Motina G.L., Chaikovskaya S.M. Študij toplotne odpornosti sporne kulture Vas. stearothermophilus, ki se uporablja za pripravo bioindikatorjev. Antibiotiki, 1982, št. 2, str. 117-120.
29. Kalinina N.M., Motina G.L., Čajkovska S.M., Šilova S.V. Priprava bioindikatorjev za nadzor učinkovitosti sterilizacijskih procesov. Antibiotiki, 1983, št. 10, str. 600-603.

MINISTRSTVO ZA ZDRAVJE RUSKE FEDERACIJE

SPLOŠNO FARMAKOPEJSKO DOVOLJENJE

SterilizacijaOFS.1.1.0016.15

Namesto čl. GFXI, številka 2

Ta splošna farmakopejska monografija določa metode in pogoje sterilizacije, ki se uporabljajo pri pripravi sterilnih zdravil.

Sterilnost razumemo kot odsotnost vitalnih mikroorganizmov in njihovih spor.

Sterilizacija je validiran postopek, ki se uporablja pri pripravi sterilnih dozirnih oblik za osvoboditev izdelkov, opreme, pomožnih snovi in ​​embalaže živih mikroorganizmov in njihovih spor.

Pri spremembi pogojev sterilizacije, vključno s spremembo volumna obremenitve sterilizatorja, je potrebna ponovna validacija.

Spodaj opisane metode so uporabne za inaktivacijo bakterij, kvasovk in plesni.

Če je možno, izdelke steriliziramo v končni embalaži (končna sterilizacija).

V primerih, ko končna sterilizacija ni mogoča, uporabite metodo membranske filtracije ali nabavite zdravila v aseptičnih pogojih brez naknadne sterilizacije končnega izdelka. Dodatno je možno izvesti obdelavo predmeta (npr. sterilizacija z gama sevanjem) v končnem pakiranju. V vseh primerih morajo embalaža in zapirala zagotavljati sterilnost zdravila v celotnem roku uporabnosti.

ZAGOTOVLJENA STOPNJA STERILNOSTI

Za spodaj opisane metode je po potrebi navedena stopnja zagotavljanja sterilnosti (SAL).

Stopnja zagotavljanja sterilizacije postopka sterilizacije je stopnja zagotovila, s katero postopek zagotavlja sterilnost vseh predmetov v seriji. Za dani postopek je stopnja zagotavljanja sterilnosti opredeljena kot verjetnost, da bo v seriji nesterilen izdelek. Na primer, SRL 10 -6 pomeni, da obstaja verjetnost največ enega živega mikroorganizma v sterilizirani seriji 10 6 končnega izdelka. Stopnja zagotavljanja sterilnosti sterilizacijskega postopka za določen izdelek se določi med postopkom validacije.

METODE IN POGOJI STERILIZACIJE

Sterilizacijo lahko izvajamo z eno od naslednjih metod ali kombinacijo le-teh.

  1. Termične metode:
  • nasičena para pod pritiskom (avtoklav);
  • vroč zrak (zračna sterilizacija).
  1. Kemične metode:
  • plini;
  • antiseptične raztopine.
  1. Sterilizacija s filtracijo (skozi filtre z zahtevano velikostjo por).
  2. Metoda radiacijske sterilizacije.

Uporaba modifikacije ali kombinacije teh metod je dovoljena pod pogojem, da je izbrani postopek sterilizacije potrjen, da se zagotovi učinkovitost postopka ter celovitost izdelka, embalaže in zapiral.

Za vse metode sterilizacije, tudi pri uporabi standardnih pogojev, potrdite določbo potrebne pogoje sterilizacija celotne serije izdelkov, skozi celoten proces sterilizacije se izvaja nadzor v kritičnih fazah proizvodnje.

Termična sterilizacija

Sterilizacija z nasičeno paro pod pritiskom (avtoklaviranje)

Sterilizacija z nasičeno paro poteka pri temperaturi
120 - 122 °C pri tlaku 120 kPa in pri temperaturi 130 - 132 °C pri tlaku 200 kPa. Ta metoda se najpogosteje uporablja za vodne raztopine in druge tekoče farmacevtske oblike v hermetično zaprtih, predhodno steriliziranih vialah, ampulah ali drugih vrstah embalaže. Sterilizacija se izvaja v parnih sterilizatorjih (avtoklavih). Standardni pogoji so segrevanje pri temperaturi 120 - 122 ° C 8-15 minut. Čas sterilizacije je odvisen od fizikalno-kemijskih lastnosti in prostornine izdelka ter uporabljene opreme (Tabela 1).

Tabela 1 – Časi sterilizacije za različne količine raztopine

Masti in olja steriliziramo pri temperaturi 120 - 122 °C 2 uri.

Izdelki iz stekla, porcelana, kovine, obloge in pomožni materiali, po potrebi sanitarna tehnološka oblačila, se sterilizirajo pri temperaturi 120 - 122 ° C - 45 minut, pri
130 - 132 ° C - 20 minut. Za sterilizacijo izdelkov iz gume uporabite prvega od teh načinov.

Druge kombinacije časa in temperature so dovoljene, če je bilo predhodno dokazano, da izbrani režim sterilizacije zagotavlja potrebno in ponovljivo raven ubijanja mikrobov. Uporabljeni postopki morajo zagotavljati raven jamstva za sterilnost največ 10 -6.

Avtoklav je obremenjen tako, da je zagotovljena enakomerna temperatura po celotni obremenitvi. Med postopkom avtoklaviranja je treba zabeležiti pogoje postopka sterilizacije (temperaturo, tlak in čas). Temperaturo običajno merimo s termočleni, nameščenimi v kontrolnih paketih, skupaj z dodatnimi termočleni, nameščenimi na najhladnejših mestih sterilizacijske komore, ki so nameščeni vnaprej. Pogoji vsakega sterilizacijskega cikla se zabeležijo npr. v obliki diagrama temperatura-čas ali na drug primeren način.

Za ovrednotenje učinkovitosti posameznega sterilizacijskega cikla je mogoče uporabiti tako kemične (termo-temporalne) kot biološke indikatorje.

Sterilizacija z vročim zrakom (zračna sterilizacija)

Za to metodo termične sterilizacije so standardni pogoji segrevanje pri temperaturi najmanj 160 °C vsaj
2 uri

Za sterilizacijo toplotno odpornih praškastih snovi (natrijev klorid, cinkov oksid, smukec, bela glina itd.) ali mineralnih in rastlinska olja, maščobe, lanolin, vazelin, vosek itd. temperatura in čas sterilizacije se nastavita glede na maso vzorca (tabeli 2 in 3).

Tabela 2 - Pogoji sterilizacije za toplotno odporne praške

Tabela 3 - Pogoji sterilizacije mineralnih in rastlinskih olj, maščob, lanolina, vazelina, voska itd.

Izdelke iz stekla, kovine, porcelana, sterilizacijske filtrirne enote s filtri in sprejemnike filtrata steriliziramo pri temperaturi 180 °C 60 minut oziroma pri temperaturi 160 °C 2,5 ure.

Zračna sterilizacija nad 220°C se običajno uporablja za sterilizacijo in depirogenizacijo steklene embalaže. V tem primeru je treba namesto z biološkimi indikatorji dokazati zmanjšanje količine endotoksinov, odpornih na vročino, za 3 velikosti.

Kombinacije časa in temperature se lahko uporabijo, če je bilo predhodno dokazano, da izbrani režim sterilizacije zagotavlja potrebno in ponovljivo raven ubijanja mikrobov. Uporabljeni postopki morajo zagotavljati raven jamstva za sterilnost največ 10 -6.

Zračna sterilizacija se izvaja v posebni suhogrelni komori s prisilnim kroženjem sterilnega zraka ali na drugi opremi, posebej zasnovani za ta namen. Sterilizacijska omara je naložena tako, da je zagotovljena enakomerna temperatura po celotni polnitvi. Temperaturo v sterilizacijski omarici običajno merimo s termočleni, nameščenimi v kontrolnih paketih, skupaj z dodatnimi termočleni, nameščenimi na najnižjih temperaturnih mestih sterilizacijske omarice, ki so nameščeni vnaprej. Temperatura in čas se zabeležita med vsakim ciklom sterilizacije. Za ovrednotenje učinkovitosti posameznega sterilizacijskega cikla je mogoče uporabiti tako kemične (termo-temporalne) kot biološke indikatorje.

Kemična sterilizacija

Kemična sterilizacija se izvaja s plinom ali raztopinami.

Sterilizacija s plinom

Sterilizacija s plinom se uporablja le, če ni mogoče uporabiti drugih metod. S to metodo sterilizacije je treba zagotoviti prodiranje plina in vlage v steriliziran izdelek ter naknadno razplinjevanje in odstranitev produktov njegove razgradnje v steriliziranem izdelku do stopnje, ki ne povzroča toksičnega učinka pri uporabi zdravila. .

Sterilizacija s plinom se izvaja v plinskih sterilizatorjih ali mikroanaerostatih (prenosni aparati), opremljenih s sistemom za dovod plina in post-sterilizacijskega odplinjevanja. Kot plin se običajno uporablja etilen oksid. Zaradi velike požarne nevarnosti ga lahko mešamo s katerim koli inertnim plinom.

Sterilizacija s plinom se izvaja v naslednjih načinih:

  • - etilen oksid: sterilizacijski odmerek 1200 mg / dm 3, temperatura najmanj
    18 °C, relativna vlažnost 80%, čas zadrževanja - 16 ur (prenosna naprava);
  • - mešanica etilenoksida in metilbromida (1:2,5):

a) sterilizacijski odmerek 2000 mg / dm 3, temperatura 55 ° C, relativna vlažnost 80 %, čas izpostavljenosti 4 ure;

b) sterilizacijski odmerek 2000 mg/dm 3, temperatura najmanj 18 °C, relativna vlažnost 80 %, čas izpostavljenosti 16 ur.

Dovoljena je uporaba drugih validiranih načinov plinske sterilizacije, ki zagotavljajo sterilnost in varnost predmeta.

Etilen oksid je lahko mutagen in strupen, zlasti pri uporabi materialov, ki vsebujejo kloridne ione. Zaradi toksičnosti etilenoksida in metilbromida je uporaba izdelkov, steriliziranih s temi plini, dovoljena šele po njihovem razplinjevanju, to je izpostavljenosti v prezračevanem prostoru dovoljenim preostalim količinam, določenim v regulativni dokumentaciji.

Pogoji razplinjevanja so odvisni od namena, načina uporabe, dimenzij izdelka, materiala izdelka in embalaže ter so določeni v regulativni in tehnični dokumentaciji za izdelek.

Če je mogoče, se med postopkom sterilizacije beležijo naslednji kazalniki: koncentracija plina, relativna vlažnost, temperatura in čas sterilizacije. Meritve se izvajajo na tistih območjih, kjer so najslabše doseženi pogoji sterilizacije, kar se ugotovi v postopku validacije.

Sterilizirani izdelki so pakirani v vrečke iz polietilenske folije debeline 0,06 do 0,20 mm, pergamenta itd. Metoda je priporočljiva za izdelke iz gume, polimernih materialov, stekla, kovine.

Učinkovitost postopka plinske sterilizacije se preverja ob vsaki obremenitvi z biološkimi indikatorji.

Pred sprostitvijo vsake serije se na določenem številu vzorcev preveri sterilnost.

Kemična sterilizacija z raztopinami

Kemično sterilizacijo izvajamo z antiseptičnimi raztopinami (vodikov peroksid in perkislina). Učinkovitost sterilizacije z antiseptičnimi raztopinami je odvisna od koncentracije učinkovine, časa sterilizacije in temperature sterilizacijske raztopine.

Pri sterilizaciji s 6% raztopino vodikovega peroksida mora biti temperatura sterilizacijske raztopine najmanj 18 ° C, čas sterilizacije je 6 ur; pri temperaturi 50 ° C - 3 ure.

Pri sterilizaciji z 1% raztopino deoxona-1 (s perocetno kislino) mora biti temperatura sterilizacijske raztopine najmanj 18 ° C, čas sterilizacije je 45 minut.

Kemična sterilizacija z antiseptičnimi raztopinami se izvaja v zaprtih posodah iz stekla, plastike ali posodah, prekritih z nepoškodovanim emajlom, pri čemer je izdelek v celoti potopljen v raztopino za čas sterilizacije. Po tem izdelek speremo s sterilno vodo v aseptičnih pogojih.

Metoda sterilizacije z antiseptičnimi raztopinami se uporablja za izdelke iz polimernih materialov, gume, stekla, korozijsko odpornih kovin.

Sterilizacija s filtracijo

Nekatere učinkovine in zdravila, ki jih ni mogoče dokončno sterilizirati z nobeno od zgoraj opisanih metod, je mogoče sterilizirati z membranskimi filtri. Takšni izdelki zahtevajo posebne varnostne ukrepe. Proizvodni proces in delovno okolje morata zagotavljati, da je tveganje mikrobne kontaminacije čim manjše in ju je treba redno spremljati. Opremo, embalažo, zapirala in, kjer je mogoče, sestavine je treba ustrezno sterilizirati. Priporočljivo je, da filtracijo izvedete neposredno pred polnjenjem embalaže. Postopki, ki sledijo filtraciji, potekajo v aseptičnih pogojih.

Predfiltracija se izvaja skozi membranske filtre z velikostjo por največ 0,45 μm. Nato se raztopine spustijo skozi membranske filtre z nominalno velikostjo por največ 0,22 mikrona, ki lahko zadržijo najmanj 10 7 mikroorganizmov. Pseudomonas diminuta na kvadratni centimeter površine. Uporabijo se lahko druge vrste filtrov, ki zagotavljajo enako učinkovitost filtracije.

Ustreznost membranskih filtrov se ugotavlja z mikrobiološkim testiranjem z uporabo ustreznih mikroorganizmov, npr. Pseudomonas diminuta(ATCC 19146, NCIMB 11091 ali CIP 103020). Priporočljiva je uporaba vsaj 10 7 CFU/cm 2 aktivne površine filtra. Suspenzijo mikroorganizmov je treba pripraviti v triptonsko-sojini brozgi, ki jo po prehodu skozi filter aseptično zberemo in inkubiramo v aerobnih pogojih pri temperaturi, ki ne presega 32 °C.

Stopnja filtracije je opredeljena kot vrednost logaritma zmanjšanja (LDR) mikrobne kontaminacije. Na primer, če se med filtracijo skozi membranski filter z velikostjo por 0,22 µm zadrži 107 mikroorganizmov, je VLS vsaj 7.

Upoštevati je treba raven mikrobne kontaminacije pred filtracijo, prepustnost filtra, velikost serije izdelka, trajanje filtracije in preprečiti kontaminacijo proizvoda z mikroorganizmi iz filtra. Obdobje uporabe filtra ne sme presegati časa, določenega med validacijo tega filtra v kombinaciji z določenim filtriranim izdelkom. Membranskih filtrov ne uporabljajte ponovno.

Celovitost membranskega filtra, pripravljenega za uporabo, se preveri pred in po filtraciji s preskusi, ki ustrezajo vrsti filtra in stopnji preverjanja, na primer preskus nasičenosti ("točka mehurčkov") z metodo difuzijskega toka ali zadrževalnim tlakom. .

Zaradi večjega možnega tveganja filtracijske sterilizacije v primerjavi z drugimi sterilizacijskimi metodami je priporočljivo predhodno filtriranje skozi membranske filtre v primerih, ko nizke stopnje mikrobne kontaminacije ni mogoče zagotoviti z drugimi sredstvi.

Prejemanje zdravil v aseptičnih pogojihbrez naknadne sterilizacije končnega izdelka

Cilj pridobivanja zdravil v aseptičnih pogojih brez naknadne sterilizacije končnega izdelka je ohraniti sterilnost zdravila z uporabo komponent, od katerih je bila vsaka predhodno sterilizirana z eno od zgoraj opisanih metod. To dosežemo z izvajanjem postopka v prostorih določenega razreda čistosti, pa tudi z uporabo pogojev in opreme, ki zagotavljajo sterilnost.

V aseptičnih pogojih lahko potekajo: postopek polnjenja embalaže, zapiranje, aseptično mešanje sestavin, čemur sledi aseptično polnjenje in zapiranje. Za ohranitev sterilnosti sestavin in končnega izdelka med proizvodnim procesom je treba posebno pozornost nameniti:

  • – stanje proizvodnega okolja;
  • – osebje;
  • – kritične površine;
  • – sterilizacija embalaže ter postopki zapiranja in prenosa;
  • - najdaljši dovoljeni čas skladiščenja izdelka do polnjenja končne embalaže.

Validacija postopka vključuje ustrezno preverjanje vsega zgoraj navedenega, pa tudi sistematične kontrole z uporabo simulacijskih testov z uporabo gojišč, ki so inkubirana in preiskana glede mikrobne kontaminacije (testi polnjenja medijev). Pred sprostitvijo vsake serije s filtrom steriliziranega in/ali aseptično proizvedenega izdelka je treba opraviti testiranje sterilnosti na ustreznem številu vzorcev.

Metoda radiacijske sterilizacije

Metoda radiacijske sterilizacije se izvaja z obsevanjem izdelka z ionizirajočim sevanjem. To metodo lahko uporabimo za sterilizacijo zdravilnih rastlinskih surovin, pripravkov zdravilnih zelišč, zdravil rastlinskega izvora in itd.

γ-sevanje, katerega vir je lahko radioizotopski element (na primer kobalt-60) ali elektronski žarek, ki ga dovaja ustrezen pospeševalnik elektronov.

Za to metodo sterilizacije se odmerek absorpcije nastavi od
10 do 50 kGy. Drugi odmerki se lahko uporabijo, če je bilo predhodno dokazano, da izbrani režim zagotavlja potrebno in ponovljivo stopnjo smrtnosti mikroorganizmov. Uporabljeni postopki in previdnostni ukrepi morajo zagotoviti stopnjo sterilnosti največ 10 -6 .

Prednost radiacijske sterilizacije je njena nizka reaktivnost in enostavno nadzorovana doza sevanja, ki jo je mogoče natančno izmeriti. Sterilizacija s sevanjem poteka pri minimalni temperaturi, vendar pa lahko obstajajo omejitve pri uporabi nekaterih vrst steklene in plastične embalaže.

Med postopkom radiacijske sterilizacije je treba sevanje, ki ga absorbira končni izdelek, stalno spremljati z uveljavljenimi dozimetričnimi metodami, ne glede na odmerek. Dozimetri se kalibrirajo glede na standardni vir v referenčnem sevalnem objektu po prejemu od dobavitelja in nato v intervalih, ki niso daljši od enega leta.

Če je zagotovljena biološka ocena, se ta izvede z uporabo bioloških indikatorjev.

BIOLOŠKI INDIKATORJI STERILIZACIJE

Biološki indikatorji so standardizirani pripravki določenih mikroorganizmov, s katerimi ocenjujemo učinkovitost postopka sterilizacije.

Biološki indikator so običajno bakterijske spore, nanesene na inertni nosilec, kot je trak filtrirnega papirja, steklena plošča ali plastična cev. Inokulirani nosilec izoliramo tako, da preprečimo njegovo poškodbo ali kontaminacijo in hkrati zagotovimo stik sterilizacijskega sredstva z mikroorganizmi. Suspenzije spor so lahko v hermetično zaprtih ampulah.

Biološki indikatorji so pripravljeni tako, da zagotavljajo njihovo varnost pod določenimi pogoji; imeti morajo rok uporabnosti.

Iste seve bakterij, ki se uporabljajo pri proizvodnji bioloških indikatorjev, lahko cepimo neposredno v tekoči proizvod, ki ga želimo sterilizirati, ali v tekoči proizvod, podoben tistemu, ki ga nameravamo sterilizirati. V tem primeru je treba dokazati, da tekoči pripravek ne deluje zaviralno na spore, še posebej na njihovo kalitev.

Za biološki indikator so navedene naslednje značilnosti: vrsta bakterij, uporabljenih kot referenčni mikroorganizmi; številka seva v izvirni zbirki; število sposobnih spor na nosilec; vrednost D.

Vrednost D– vrednost parametra sterilizacije (trajanje ali absorbirana doza), ki zmanjša število živih mikroorganizmov na 10 % njihovega začetnega števila. Ta vrednost je smiselna za natančno določene poskusne pogoje sterilizacije. Biološki indikator mora vsebovati samo navedene mikroorganizme. Dovoljena je uporaba bioloških indikatorjev, ki vsebujejo več kot eno vrsto bakterij na enem nosilcu. Predložiti je treba podatke o gojišču in pogojih inkubacije.

Indikatorje je priporočljivo namestiti na mesta, ki so najmanj dostopna sterilizacijskemu sredstvu, predhodno določena empirično ali na podlagi predhodnih fizičnih meritev. Po izpostavitvi sterilizacijskemu sredstvu se nosilec spor prenese v hranilni medij v aseptičnih pogojih.

Dovoljena je uporaba bioloških indikatorjev industrijske proizvodnje v zaprtih ampulah s hranilnim medijem, nameščenih neposredno v embalaži, ki ščiti cepljeni nosilec.

Izbira referenčnih mikroorganizmov za biološke indikatorje se izvede ob upoštevanju naslednjih zahtev:

  • - odpornost testnega seva na določeno metodo sterilizacije mora biti višja od odpornosti vseh patogenih mikroorganizmov in drugih mikroorganizmov, ki kontaminirajo proizvod;
  • - testni sev mora biti nepatogen;
  • – preskusni sev mora biti enostaven za gojenje.

Če po inkubaciji opazimo rast referenčnih mikroorganizmov, to kaže na nezadovoljiv postopek sterilizacije.

Značilnosti uporabe bioloških indikatorjev sterilizacije

Sterilizacija z nasičeno paro pod pritiskom

Biološki indikatorji za spremljanje sterilizacije z nasičeno paro pod pritiskom se priporočajo za uporabo pri validaciji sterilizacijskih ciklov. Priporočljivo je uporabljati bacil stearothermophilus(na primer ATCC 7953, NCTC 10007, NCIMB 8157 ali CIP 52.81). Število sposobnih spor mora presegati 5 x 10 5 na nosilec. Vrednost D pri temperaturi 121 ° C mora biti več kot 1,5 minute. Ko biološki indikator 6 minut obdelujemo s paro pri temperaturi (121 ± 1) °C pod tlakom 120 kPa, je treba opazovati ohranitev preživetja sposobnih spor in 15-minutna obdelava pri isti temperaturi privede do popolna smrt referenčnih mikroorganizmov.

Zračna sterilizacija

Priporočljivo za pripravo bioloških indikatorjev bacil subtilis(na primer, var. Niger ATCC 9372, NCIMB 8058 ali CIP 77.18). Število sposobnih spor mora presegati 1 ∙ 10 5 na nosilec, vrednost D pri temperaturi 160 °C je 1 - 3 min. Vroči zrak pri temperaturah nad 220 °C se pogosto uporablja za sterilizacijo in depirogenizacijo steklene opreme. V tem primeru lahko zmanjšanje količine toplotno odpornih bakterijskih endotoksinov za 3 reda velikosti služi kot nadomestek za biološke indikatorje.

Sterilizacija s sevanjem

Biološke indikatorje lahko uporabimo za spremljanje trenutnega delovanja kot dodatno oceno učinkovitosti danega odmerka sevanja, predvsem v primeru sterilizacije s pospešenimi elektroni. Priporočljivi so spori bacil pumilus(na primer ATCC 27.142, NCTC 10327, NCIMB 10692 ali CIP 77.25). Število sposobnih spor mora presegati 1 ∙ 10 7 na nosilec. Vrednost D mora biti več kot 1,9 kGy. Preveriti je treba, da po obsevanju biološkega indikatorja z odmerkom 25 kGy (minimalna absorbirana doza) ni opaziti rasti referenčnih mikroorganizmov.

Sterilizacija s plinom

Uporaba bioloških indikatorjev je bistvena za vse postopke plinske sterilizacije, tako za validacijo cikla kot za rutinske operacije. Priporočljivo je uporabljati spore bacil subtilis(na primer, var. Niger ATCC 9372, NCIMB 8058 ali CIP 77.18) pri uporabi etilen oksida. Število sposobnih spor mora presegati 5 x 10 5 na nosilec. Parametri stabilnosti so naslednji: D je več kot 2,5 min za preskus cikla pri 600 mg/l etilen oksida, 54 °C in 60 % relativni vlažnosti. Preveriti je treba, da po 60-minutnem ciklu sterilizacije z navedenimi parametri ni opaziti rasti referenčnih mikroorganizmov, medtem ko po 15-minutnem ciklu sterilizacije pri nižji temperaturi (600 mg/l, 30 °C, 60 % vlažnost) ), ohrani se sposobnost preživetja spor.

Biološki indikator mora biti zmožen zaznati nezadostno vlago v sterilizatorju in izdelku: ko je izpostavljen etilen oksidu v koncentraciji 600 mg/l pri temperaturi 54 °C 60 minut brez vlage, mora biti sposobnost preživetja spor ohranjena. .

Podobni članki
Razpravljajte:
Kontakti O projektu in izdaji Oglaševanje na spletni strani zemljevid spletnega mesta

2022 videointercoms.ru. Mojster - Gospodinjski aparati. Razsvetljava. Obdelava kovin. Noži. Elektrika.