Манько В.М., Девришов Д.О. Фундаментальні засади. Ветеринарна імунологія

Імунологія - наука про імунітет. Вона вивчає прояви, механізми та способи управління імунітетом, а також розробляє імунологічні методи діагностики, лікування та профілактики хвороб людини та тварин.

Прийнято вважати, що початок новій науці започаткували знамениті досліди англійського лікаря Е. Дженнера (1749-1823). Він зауважив, що під час епідемій людської віспи найчастіше не хворіють на доярки. Як відомо, корови хворіють на віспу з ураженням шкіри, особливо шкіри вимені та сосків, де розвиваються віспільні пустули. У доярок, що заразилися від хворих на віспу корів, пустули утворюються на руках. Спостерігаючи ці явища, Дженнер дійшов висновку, що після зараження та перехворювання доярок коров'ячою віспою вони стають несприйнятливими до зараження людською віспою. На підтвердження своїх спостережень у травні 1796 він прищепив 8-річному хлопчику спочатку коров'ю віспу, а через 1,5 міс віспу людини, і хлопчик не захворів. Однак Дженнер не побачив у відкритому ним способі боротьби з віспою принципу запобігання іншим інфекційним хворобам. Його відкриття дало людству лише спосіб запобігання віспі.

Основоположником сучасної наукової імунології визнано Луї Пастера. У 1881 р. він повідомив, що кури при зараженні ослабленим збудником холери курей стають несприйнятливими до зараження вірулентними культурами. Зіставивши свої досліди зі спостереженнями Дженнера, Пастер сформулював основний принцип захисту від будь-якого збудника. інфекційної хвороби, Який полягає в тому, що організм після зустрічі з ослабленим збудником стає несприйнятливим (імунним) до вірулентних мікробів того ж виду. Пастер на честь першовідкривача запобіжних щеплень проти віспи Дженнера назвав ослаблені культури збудників хвороб вакцинами (від лат. vacca корова). У наступні роки Пастер виготовив вакцини і при імунізації тварин встановив наявність імунітету проти таких хвороб, як сибірка, сказ, бешиха свиней та ін. Надалі було встановлено, що імунітет можна створити при вакцинації вбитими мікроорганізмами, а також токсинами, що виділяються мікроорганізмами.

До кінця XIX і на початку XX століття було зроблено багато відкриття, що створили науковий фундамент імунології. У 1883 р. І. Мечников відкрив фагоцитоз і запровадив поняття «клітинний імунітет». У роки розвивалася і гуморальна теорія імунітету, прибічником якої був П. Ерліх. Тривала полеміка між прихильниками клітинної та гуморальної теорій імунітету сприяла формуванню імунології як науки. У 1908 р. Мечникову та Ерліху було присуджено Нобелівську премію за видатні відкриття з імунітету. У 1891 р. Е. Берінг і Ш. Кітазато вперше застосували пасивну імунізацію проти дифтерії та правця; 1900 р. К. Ландштайнер відкрив групи крові (А, В, О) у людини; у 1902 р. Ш. Ріше встановив феномен анафілаксії; 1905 р. К. Пірке ввів поняття «алергія»; у 1953 р. П. Медовар та М. Гашек незалежно один від одного відкрили феномен імунологічної толерантності; у 1958 р. Ф. Бернет запропонував клонально-селекційну теорію імунітету; в 1959 р. Ж. Досс з співр. відкрили систему антигенів гістосів помсти людини; в 1962 р. Ж, Міллер встановив роль тимусу як первинного лімфоїдного органу; в 1963 р. Б. Бенацерраф встановив гени імунореактивності, які отримали назву Ir-генів; в N975 Ц. Мільстайн і Д. Кехлер запропонували методику отримання моноклональних антитіл. Найбільшим узагальненням останніх стало виділення двох незалежних, але спільно функціонуючих клітинних популяцій в імунній відповіді Т-і В-лімфоцитів.

В результаті нових відкриттів та досягнень імунологія виросла у самостійну наукову дисципліну, що охоплює коло проблем сучасної біології, медицини та ветеринарії. До напрямів загальної імунології відносять молекулярну імунологію, імуноморфологію, імуногенетику, імунохімію, еволюційну імунологію, а до напрямів приватної імунології - імунопрофілактику інфекційних хвороб, клінічну імунологію, імунологію, репродукції та ембріогену.

Ветеринарна імунологія також розвивається за всіма провідними напрямками імунології в цілому. Особливу увагу імунології приділяють вивченню особливості імунітету у сільськогосподарських тварин та дослідженню ефективних засобівта методів їх імунного захисту. У Останніми рокамидля ветеринарної практики готують понад 180 різних біопрепаратів (вакцин, сироваток, діагностикумів).

Становленню та подальшого розвиткуветеринарної імунології в нашій країні сприяли праці найвидатніших вчених Н. Н. Гінсбурга, С. Н. Вишелеського, А. А. Володимирова, С. Г. Колесова, Я. Є. Колякова, Я. Р. Коваленко, І. І. Кулеско , Н. В. Лихачова, С. Я. Любашенка, Н. А. Міхіна, С. А. Муромцева, А. X. Саркісова, П. С. Соломкіна та багатьох інших. Перед ветеринарною імунологією поставлені великі завдання по створенню нових і вдосконаленню наявних вакцин, сироваток і гностик умів, з вивчення та профілактики імунних захворювань, з розширення досліджень в області неінфекційної імунології (вікова імунологія, імунологія розмноження, неспецифічні механізми).

На тваринах було розроблено кілька важливих моделей (in vivo), які мають експериментальну цінність і клінічну користь і можна порівняти з системами in vitro, що згадувалися раніше. Як моделі використовували інбредні лінії мишей з різними генетичними профілями; деякі з них були отримані методами генної інженерії. У тварин деяких інбредних ліній відзначається вроджена схильність до розвитку певних захворювань (наприклад, рак молочних залоз, лейкоз, аутоімунні захворювання, тяжкий комбінований імунодефіцит).

Крім того, виведені тварини з генетичними порушеннями, здатні експресувати деякі клоновані чужорідні гени (так звані трансгенні миші), або тварини, у яких задані гени не експресуються (миші з «нокаутними» генами). Такі лінії використовують із вивчення наслідків експресії певних трансгенів чи наслідків відсутності експресії гена у «нокаутних» мишей. Почнемо обговорення із тварин інбредних ліній.

Інбредні лінії

Безліч класичних експериментів в галузі імунології були проведені з використанням тварин інбредних ліній, таких як миші, щури та морські свинки. До утворення інбредної лінії зазвичай призводить селективне близькоспоріднене схрещування потомства протягом більш як 20 поколінь. Усі члени інбредної лінії тварин генетично ідентичні. Тому їх називають син генними, як і ідентичних близнюків. Імунну відповідь інбредної лінії можна вивчати без урахування варіабельності, пов'язаної з генетичними відмінностями між тваринами.

Трансплантація органів між членами інбредної лінії завжди успішна, оскільки їх антигени головного комплексу гістосумісності (МНС) ідентичні. Дійсно, знання законів трансплантації та того факту, що МНС є основним генетичним бар'єром для трансплантації, прийшло в результаті експериментів на інбредних лініях.

Експерименти з використанням інбредних ліній призвели до ідентифікації генів МНС І та ІІ класів, основною функцією яких є доставка пептидних фрагментів антигену на поверхню клітини, що дозволяє епітопам бути розпізнаними антигенспецифічними Т-лімфоцитами.

Адоптивне перенесення та пасивна імунізація

Захист від багатьох хвороб здійснюється клітинно-опосередкованим імунітетом, що забезпечується антигенспецифічними Т-клітинами, на відміну від опосередкованого антитілами (гуморального) імунітету. Різниця між цими двома гілками імунної системи добре демонструється адоптивним (запозиченим) перенесенням Т-клітин або пасивним введенням антисироватки або очищених антитіл.

Адоптивне перенесення Т-клітин зазвичай проводиться в генетично ідентичних парах донор-реципієнт (наприклад, усередині інбредної лінії) і в результаті призводить до формування довгострокового адоптивного імунітету після першого контакту з антигеном. Навпаки, пасивне перенесення сироватки, що містить антитіла, може бути здійснене без урахування бар'єрів МНС і залишається ефективним лише протягом того часу, поки перенесені антитіла зберігають активність у реципієнта. Ось чому цей тип перенесення називається пасивною імунізацією.

Миші з тяжким комбінованим імунодефіцитом

Тяжкий комбінований імунодефіцит (ТКІД)є розладом, при якому порушується дозрівання В- та Т-клітин, що призводить до формування у індивідуума недостатності механізмів лімфоцитарного захисту. У 1980 р. було виведено інбредну лінію мишей, у яких спонтанно розвинулася аутосомно-рецесивна мутація, що призводила до ТКІД. Внаслідок відсутності функціонуючих Т-і В-клітин у ТКІД-мишей приживлялися клітинні та тканинні трансплантати від мишей інших ліній чи видів. Таким ТКІД-мишам можуть бути введені людські гемопоетичні стовбурові клітини для створення ТКІД-людських химер.

У таких химерних мишей розвиваються зрілі функціональні Т-і В-клітини, які є нащадками введених людських гемопоетичних стовбурових клітин-попередників. Ця модель на тваринах стала цінним дослідницьким інструментом, оскільки дозволяє імунологам маніпулювати людською імунною системою in vivo та досліджувати розвиток різних лімфоїдних клітин. Більше того, ТКІД-людських мишей можна використовувати для тестування вакцин, що створюються, включаючи і ті з них, які допоможуть захистити людей від ВІЛ-інфекції.

Тимектомовані та безтимусні миші

Значення тимусу у розвитку зрілих Т-клітин можна продемонструвати на мишах, які в період новонародженості перенесли тимектомію, опромінення, а потім пересадку сингенного кісткового мозку. У таких мишей не розвиваються зрілі Т-лімфоцити. Також у мишей, гомозиготних за рецесивною мутацією пі/пі, не розвиваються зрілі Т-клітини, тому що мутація призводить до фенотипу, що характеризується відсутністю тимусу та волосся (звідси термін «nude» – голі). В обох ситуаціях розвиток Т-клітин може бути відновлений шляхом пересадки цим мишам епітеліальної тканини тимусу. Як і моделі з ТКІД-мишами, ці тварини моделі корисні щодо розвитку Т-лімфоцитів. Також вони використовувалися для розмноження in vivo ліній пухлинних клітин і свіжих експлантатів пухлинних від тварин інших ліній або виду, для чого необхідна відсутність Т-клітин, покликаних відкидати подібні чужорідні клітини.

Трансгенні миші та маніпуляції з генами

Трансгенні миші

Ще однією важливою моделлю на тваринах, що активно використовується в імунологічних дослідженнях, є трансгенні миші. Їх одержують шляхом введення клонованого гена (трансгену) в запліднену мишачу яйцеклітину. Потім яйцеклітини вводяться псевдовагітної миші (рис. 5.14). Рівень успішності цієї методики щодо невисокий, трансген експресують 10 – 30% потомства. Оскільки трансген впроваджується як і соматичні, і у статеві клітини, він передається потомству як менделевский ознака.

Рис. 5.14. Загальна методика отримання трансгенних мишей

Конструюючи трансген із заданим промотором, можна контролювати експресію генів. Наприклад, деякі промотори працюють лише у певних тканинах (зокрема, інсуліновий промотор працює лише у підшлунковій залозі). Інші промотори починають працювати у відповідь на біохімічні сигнали, які в деяких випадках можуть бути введені як харчова добавка (наприклад, металлотиониновый промотор починає працювати у відповідь на цинк, який можна додавати в питну воду). Трансгенні миші використовувалися для вивчення генів, які звичайно експресуються in vivo (наприклад, онкогени).

Також за допомогою трансгенів вивчалася дія окремих молекул імуноглобулінів, Т-клітинних рецепторів, молекул МНС І та ІІ класів та цитокінів. Було виведено трансгенні миші, у яких весь мишачий імуноглобуліновий локус був заміщений генами імуноглобулінів людини. Така модель використовується для вироблення "людських" антитіл у мишей. Слід зазначити, що недоліком трансгенного методу і те, що трансген вбудовується в геном випадковим чином. Це обмеження разом з тим фактом, що експресія трансгену у великій кількості в різних тканинах нефізіологічна, зобов'язує дослідників ретельно інтерпретувати результати, отримані на трансгенних мишах.

Миші з «нокаутними» генами

Іноді цікаво визначити, як видалення продукту конкретного гена вплине імунну систему. Використовуючи метод генних маніпуляцій, можна замістити нормальний ген, що мутував або пошкоджений, створивши мишу з «нокаутним» («вибитим») геном. Таким чином, на відміну від методу, який використовується для створення трансгенних мишей, при даному методі «нокаутні» миші експресують трансгени, що вбудовуються у власні специфічні гени, за допомогою процесу, названого гомологічною рекомбінацією.

Гіпотетично будь-який ген, для якого існує трансген, що мутував або пошкоджений, може бути заміщений таким шляхом. Було виведено «нокаутні» миші, у яких відсутня експресія різних важливих генів, у тому числі й тих, що кодують деякі цитокіни та молекули МНС. "Нокаутні" миші використовувалися для ідентифікації ділянок гена, необхідних для його нормального функціонування. Для цього шляхом трансгенезу назад геном впроваджували різні мутантні генні копії, що призводило (або не приводило) до відновлення функціонування гена.

Аналіз експресії генів

Мікромасиви у дослідженні експресії генів

Мікромасиви, чи генні чіпи, є потужними інструментами дослідження рівня експресії тисяч генів одночасно. Мікромасив складається з тисяч фрагментів ДНК (у кожного з яких є унікальна послідовність), прикріплених у певному порядку до скла або іншої поверхні. Ці фрагменти ДНК у формі комплементарної ДНК (кДНК; приблизно 500 - 5000 пар основ) або олігонуклеотидів (20 - 80 пар основ) можуть представляти гени з усіх частин геному. При цьому можна приготувати спеціалізовані мікромасиви, які будуть використовувати тільки ДНК генів, що досліджуються. У дослідженні використовується зразок загальної інформаційної РНК (іРНК) – продукт, який отримується в результаті транскрипції всіх активних генів.

Для проведення дослідження з мікромасивом зразок загальної іРНК клітини або тканини зазвичай тестується паралельно з контрольним зразком, необхідним для порівняння експресії генів. Наприклад, можуть порівнюватися різні типиклітин або тканин, клітини на різних стадіях диференціювання або пухлинні клітини зі своїми нормальними аналогами. Зразки, які додаються до мікромасиву, зазвичай не є іРНК; на матриці загальної (тотальної) іРНК проводять зворотну транскрипцію, а кДНК, що утворилася, потім позначають флуоресцентним матеріалом (флуорохромом). Флуорохроми різного забарвлення використовують для маркування кДНК із різних джерел.

На рис. 5.15 показано, як мікромасиви використовуються для порівняння експресії генів у популяції пухлинних лімфоїдних клітин та нормальних лімфоцитів. Червоний флуорохром був використаний як мітка експериментальних кДНК з пухлинних клітин, а зелений - для кДНК, приготованих з контрольних нормальних аналогів. Мічені кДНК наносили на чіп та залишали для гібридизації пар основ з відповідними фрагментами. До мікромасиву додавали кДНК контрольного зразка, так і експериментального, тому вони конкурували за зв'язування на поверхні мікромасиву.

Рис. 5.15. Дослідження з мікромасивами, що порівнює зразки іРНК пухлинних та нормальних лімфоцитів

Матеріал, що не утворив гібридів, змивали, залишаючи ділянки флуоресценції там, де стався збіг. Після закінчення гібридизації мікромасив сканували лазером для виявлення червоних, зелених або жовтих плям. Найбільші рівні кожного типу кДНК відбивав свій колір: червоний – кДНК експериментальних пухлинних клітин; зелений – контрольні кДНК; жовтий – однакові рівні ДНК обох зразків. Для інтерпретації результатів флуоресцентний сканер визначав точний рівень флуоресценції кожної плями на склі.

Отримані дані потім аналізувала комп'ютерна програма, яка порівнювала інформацію про флуоресценцію з генетичною базою даних визначення того, які гени надмірно або недостатньо експресуються в зразках тестованих. Характеристика розподілу та кількості зв'язування ДНК з мікромасивом потенційно може бути корисною в галузі імунології. Зокрема, для клінічної діагностики лімфоїдних пухлин, розробки препаратів (наприклад, тестування імуносупресивних препаратів, що розробляються, по їх дії на експресію цитокінових генів) і відкриття нових генів.

Висновки

1. При взаємодії антитіла та антигену ковалентні зв'язки не використовуються; задіяні слабкі сили, такі як електростатичні, гідрофобні та ван-дер-ваальсові. Отже, для достатньої взаємодії зв'язувальна ділянка антитіла та антиген повинні строго просторово відповідати один одному як ключ із замком.

2. Тільки реакція між полівалентним антигеном та щонайменше двовалентним антитілом може призвести до взаємодії, вираженої перехресним зв'язуванням молекул антигену антитілами. Ці реакції неможливі за участю гаптенів або моновалентних Fab-фрагментів.

3. Взаємодія між розчинним антитілом та нерозчинним корпускулярним антигеном призводить до аглютинації. Ступінь аглютинації залежить від співвідношення взаємодіючих антитіл та антигену. При великій концентрації антитіл аглютинація може розвинутись. Це називається прозоною. Під терміном "титр" розуміють найбільше розведення сироватки, при якому ще відбувається аглютинація, після чого при вищому розведенні вона не починається.

4. Реакція преципітації відбувається при змішуванні у правильному співвідношенні розчинного полівалентного антигену та (щонайменше) двовалентних антитіл. Вона може протікати у водному середовищі чи гелі.

5. Реакції в гелі між розчинними антигенами та антитілами можуть бути використані для якісного та кількісного аналізу антитіл або антигенів. Прикладами таких реакцій можуть стати дифузія в гелі, радіальна дифузія та імуноелектрофорез.

6. Радіоімунне дослідження є високочутливим тестом для кількісного визначення антигенів чи антитіл. У ньому використовуються радіоактивно мічені антигени або антитіла, а основою методу є конкурентне зв'язування міченого та міченого антигенів. Необхідно відокремити антиген, пов'язаний з антитілами, від незв'язаного міченого антигену. Зазвичай розподіл досягається використанням преципітації з антиімуноглобулінами.

7. Імунне дослідження на твердій фазі є методикою, яка ґрунтується на здатності багатьох білків прикріплюватися до пластику з утворенням мономолекулярного шару. Антиген наноситься на комірки планшета, додаються антитіла, потім комірки відмиваються і вимірюється наявність та кількість зв'язаних антитіл, для чого використовують антиімуноглобуліни з радіоактивною або ферментною міткою.

8. Ферментний імуносорбентний аналіз є різновидом твердофазного імунного дослідження, в якому ферменти прикріплені до антиімуноглобулінів. Кількість визначається шляхом колориметричної оцінки після додавання субстрату, що змінює колір під дією ферменту.

9. Імунофлуоресценція – це метод, при якому антиген виявляють, використовуючи імуноглобуліни, мічені флуоресцином. При прямій імунофлуоресценції антитіла до антигену несуть флуоресцентну мітку. При непрямій імунофлуоресценції антигенспецифічні антитіла не марковані, їх визначають після додавання флуоресцентно мічених антиімуноглобулінів. Проточні флуоресцентні клітинні сортери є приладами, які можна використовувати для підрахунку та сортування флуоресцентно мічених клітин.

10. У дослідженнях, що використовуються для оцінки функції лімфоцитів, зазвичай вимірюють клітинну проліферативну відповідь або ефекторні функції. Наприклад, можна досліджувати функціональний стан В-клітин шляхом вимірювання їх здатності до проліферації та продукції антитіл у відповідь на В-клітинні мітогени, такі як ЛПС або мітоген лаконоса. Т-клітини зазвичай досліджують за їх здатністю посилювати функції інших клітин (у разі CD4+-клітин) або за здатністю знищувати мішені, що мають специфічні антигени (у разі CD8+-клітин). Крім того, Т-клітини можна досліджувати, вимірюючи їхню здатність до проліферації або продукції деяких цитокінів у відповідь на дію Т-клітинних мітогенів, таких як ФГА та Кон А.

11. Моноклональні антитіла є високоспецифічними реагентами, що складаються з гомогенної популяції антитіл, ідентичних за специфічністю до певного епітопу.

Р.Койко, Д.Саншайн, Е.Бенджаміні

Ветеринарна імунологія
Книга являє собою першу у світовій літературі спробу поєднувати теоретичні положення імунології з їх практичним використанням у ветеринарній практиці. лікування хвороб, освітлена роль імунітету при нормальному фізіологічному стані організму та різних патологічних змінах

Книга призначена для наукових та практичних працівників у галузі ветеринарної та медичної імунології.

ЗМІСТ
Передмова до російського видання 3
Передмова до англійського видання 4
Частина I
ОСНОВНІ АСПЕКТИ ІМУНОЛОГІЇ
Розділ 1. Історія виникнення імунології 5
Глава 2. Імунітет та взаємини тварини з іншими організмами
довкілля 10
Глава 3. Неспецифічні механізми імунітету 13
Глава 4. Специфічний набутий імунітет 21
Глава 5. Антигени 25
Глава 6. Антитіла 31
Глава 7. Особливості реакції антиген - антитіло 52
Глава 8. Гіперчутливість при реакції антиген - антитіло 63
Розділ 9. Реакції клітинного імунітету 71
Глава 10. Утворення антитіл та початок імунної відповіді 74
Частина II
МЕТОДИ ІНДИКАЦІЇ ІМУННОГО СТАНУ І ЗАСТОСУВАННЯ ЇХ У ДІАГНОСТИЦІ ЗАХВОРЮВАННЯ
Розділ 11. Визначення імунітету тварин методами in vivo 94
Глава 12. Методи визначення н вимірювання вмісту антитіл 102
Розділ 13. Реакція нейтралізації 111
Глава 14. Реакція аглютинації 114
Розділ 15. Реакція преципітації 125
Розділ 16. Реакції з використанням мічених реагентів J35
Глава 17. Зв'язування комплементу та інші родинні реакції 145
Розділ 18. Реакції in vitro для вивчення гіперчутливості, обумовленої антитілами 156
Глава 19. Характеристика клітинного імунітету у реакціях in vitro 158
Частина III
ВАКЦИНИ ТА АНТИСИВОРОТКИ
Розділ 20. Активний імунітет 162
Розділ 21. Типи вакцин 171
Розділ 22. Вакцини проти вірусних захворювань 175
Глава 23. Вакцини проти захворювань, що викликаються рикеттсіями, мікоплазмами та бактеріями 184
Розділ 24. Вакцини для захисту від захворювань, що викликаються найпростішими
та багатоклітинними організмами 189
Розділ 25. Застосування вакцин 191
Глава 26. Пасивний імунітет та терапевтична антисироватка 217
Частина IV
ФІЗІОЛОГІЧНІ ТА ПАТОЛОГІЧНІ АСПЕКТИ СПЕЦИФІЧНИХ ІМУННИХ РЕАКЦІЙ
Глава 27. Збереження клітинної інтеграції організму 231
Глава 28. Фізіологія імунітету 240
Глава 29. Патогенні ефекти імунологічних реакцій 250
Розділ 30. Використання специфічних імунних реакцій для боротьби
з інфекційними захворюваннями 271
Додаток. Термінологія 282
Післямова 296
Предметний покажчик 303

ВЕТЕРИНАРНА МІКРОБІОЛОГІЯІ ІМУНОЛОГІЯ

для спеціальності 310800 – «Ветеринарія» з кваліфікації спеціаліста – ветеринарний лікар

Москва 2001

1. Цілі та завдання дисципліни "ветеринарна мікробіологія та імунологія"

Основна мета викладання дисципліни «Ветеринарна мікробіологія та імунологія» – формування у майбутнього ветеринарного лікаря наукового світогляду про різноманіття мікроорганізмів, про їх роль у загальнобіологічних процесах, у т.ч. при інфекціях, та у патології тварин, освоєння теоретичних основ діагностики інфекційних хвороб, принципів імунологічних досліджень, виготовлення та контролю біопрепаратів.

До завдань курсу входить вивчення студентами принципів: систематики, морфології та фізіології, широти_ поширення мікроорганізмів у природі особливостей їх біології та екології; роль мікробів у перетворенні речовин у природі та ефекти дії факторів зовнішнього середовища на прокаріотичні клітини, оволодіння основами вчення про інфекцію та імунітет, про спадковість та мінливість, освоєння методів індикації та ідентифікації патогенних для тварин бактерій та грибів, бактеріологічних серологічних, генетичних , що використовуються при діагностиці інфекційних хвороб

В результаті вивчення курсу студенти повинні знати теоретичні основи життєдіяльності мікроорганізмів, їх взаємодії один з одним та з організмом тварин, основні біологічні властивості патогенних мікробів, принципи та способи діагностики та специфічної профілактики інфекційних хвороб. Цим цілям та завданням сприяє навчально-дослідницька робота студентів СУІРС.

Отримані знання з біології та екології збудників інфекційних хвороб, інфекції та імунітету мають допомогти майбутнім ветеринарним фахівцям правильно організовувати та проводити бактеріологічні та серологічні дослідження, специфічну профілактику заразних захворювань. Для вивчення курсу «Ветеринарна мікробіологія та імунологія» студентам необхідно засвоїти розділи наступних дисциплін:

фізики (реактивний рух у живих організмів, центрифуги та їх застосування в біологічних дослідженнях, клітинні мем-

лани, роздільна здатність оптичних приладів, люмінесцентний аналіз, фотобіологічні реакції, рентгенівське випромінювання, електронний мікроскоп);

органічної хімії (вуглеводні, спирти, феноли, вуглеводи, амінокислоти та білки);

неорганічної та аналітичної хімії (дисперсні системи та розчини, приготування розведень з коефіцієнтами 2 та 10);

фізичної та колоїдної хімії (вчення про розчини, механізм фотосинтезу, стійкість колоїдних системта коагуляція, суспензії, емульсії та піни, білки);

анатомії сільськогосподарських тварин (органи крово- та лімфоутворення);

біохімії (ферменти, білки, біологічне окислення та елементи біоенергетики, будова та властивості вуглеводів, класифікація, будова та основні властивості ліпідів, будова та синтез амінокислот та нуклеопротеїдів, біологічне значення вітамінів, водний обмін та обмін мінеральних речовин);

Фізіологія, патофізіологія (транспорт поживних речовин, механізми секреції, загальнобіологічні терміни, механізм запалення, алергії, дії лізоциму, комплементу, органи та клітини імунної системи).

Звичайно, для успішнішого освоєння курсів мікробіології та імунології необхідне знання латинської мови.

Засвоєння студентами дисципліни викладачі перевіряють на лабораторних заняттях, колоквіумах (усно чи за програмою ЕОМ), на письмових контрольних та курсових роботах, заліках, а після закінчення курсів – іспитах.

Об'єднаний імунологічний форум, Санкт-Петербург 2008

ВЕТЕРИНАРНА ІМУНОЛОГІЯ

Результати застосування препарату "Гемобаланс" при корекції імунодефіцитних станів у коней

А.Б. Андрєєва

Метою наших досліджень було вивчення змін імунологічних характеристик крові лошат кобил (друга половина жереба) та корекції даних показників застосуванням препарату «Гемобаланс». Взяття крові проводили до застосування препарату (фонові значення) та після застосування препарату «Гемобаланс». Препарат вводили внутрішньом'язово за наступною схемою: 1 мл на 45 кг маси, кожні 48 годин протягом 7 днів (3 ін'єкції). Дослідження проводили на 10 кобилах у віці від 5 до 12 років, що містяться в умовах приватних конюшень Ленінградської області. З даних досліджень випливає, що в другій половині жеребу спостерігається зниження активності факторів як специфічної, так і неспецифічної резистентності організму матері, на що вказують низькі значення концентрацій імуноглобулінів, як факторів специфічного імунітету, та зниження активності неспецифічної ланки імунітету. При застосуванні комплексного препарату «Гемобаланс» відзначаються наступна динаміка змін даних показників: концентрація 1д А збільшилася на 12,71%, 1д М на 31,57%, 1д^ на 31,57%, 1д С2 на 45,5%, БАСК на 23, 19%, Лізоцимна активність на 13,12%, Фагоцитарний індекс на 43,75%, Фагоцитарне число на 50, 16%, Фагоцитарний індекс на 48, 12%. Таким чином, на підставі проведених досліджень можна зробити такі висновки:1 . Друга половина жереба супроводжується зниженням факторів неспецифічної та специфічної резистентності. 2. Застосування в даний період кобил комплексного препарату «Гемобаланс» сприяє стимулюванню неспецифічної та специфічної резистентності.

Вплив застосування препарату "Хелавіт" на показники природної резистентності собак

А.А. Бахта

ФГОУ ВПО "Санкт-Петербурзька державна академія ветеринарної медицини", Санкт-Петербург, Росія

Лізоцимна та бактерицидна активність сироватки крові є важливими показниками природно резистентності собак. Метою наших досліджень було вивчення впливу застосування препарату «Хелавіт» на БАСК, лізоцимну активність та активність фагоцитозу у собак при вторинних імунодефіцитах. Дослідження проводили на собаках із вторинними імунодефіцитами до застосування препарату «Хелавіт» та після курсу прийому даного препарату. До прийому препарату БАСК становила 66,7±2,5, після застосування збільшилася на 14,5%, активність лізоциму збільшилася на 16,65% (вихідні дані 13±1,55 оп.од.), фагоцитарна активність до досвіду становила 45 ,45±6,89,фагоцитарний індекс 5,0±1,2, фагоцитарний

число 11 ±2,5 після прийому препарату дані показники збільшилися відповідно на 23,5%; 20,0%, 25,5%. Таким чином, даний препарат має імуномодулюючу дію і може бути рекомендований при корекції імунодефіцитних станів у собак.

Імунологічна діагностика дирофіляріозу собак

Т.В. Богданова, В.І. Бойко

ГОУ ВПО «Астраханський державний університет», Астрахань, Росія

Імуномодулююча дія препарату Римолан у корів із субклінічним маститом

В. Антані1, Є. Бикова2, Л. Ємельянов1, І. Лусіс1 ветеринарний факультетЛатвійського Сільськогосподарського університету;

2Ризький Центр Репродукції, Латвія

У структурі захворюваності корів мастити займають особливе місце і, за повідомленнями Європейської асоціації тваринників, дана патологія у всіх країнах з розвиненим скотарством має тенденцію до її збільшення. Найбільшу небезпеку у своїй представляють субклінічні форми маститу, складові 95% всіх випадків запалення вимені. Вони за даними дослідників завдають великої шкоди господарствам, зменшують річний надій по стаду від 10% до 40%. У зв'язку з цим клініцисти активно вивчають стан загальної резистентності тварин, опір пошкодженого вимені до патогенного збудника та розробляють етіопатогенетичні схеми терапії із застосуванням імунотропних препаратів. У 15 корів з субклі-

ним маститом вивчено вплив препарату Римолан на клінічний стан вимені; у сироватці крові та молоці досліджено показники вродженого імунітету. Виявлено, що змінені показники гранулоцитів, рівня IgG, IgA, IgM у молоці; індекс фагоцитарної активності нейтрофілів, концентрація IgG, IgA, IgM, лейкоцитів та лімфоцитів у крові підтверджують імуномодулюючу дію препарату Рімолан при даній патології.

Перспективи клінічного застосування препарату Римолан

Я.Я. Ветра2, Е.Я. Бикова1, Л.В. Іванова2, І.А. Барене2,

Л.Я. Штале2, Л.Р. Хемій1, Н.С. Сергєєва4, І.К. Свиридова4,

Л.М. Скуінь3, І.Я. Даберте2, Л.Ю. Карпенка5, В.В. Богомолів6,

М.В. Афендік1, Т.С. Ясюк1

1Ризький центр Репродукції;

2Університет Страдиня, Рига;

3Російська Медицинська академіяпостдипломного

освіти, Москва;

4МНІОІ ім. П. А. Герцена;

5ФГОУ ВПО С.-П. ГАВМ,

Ленінградська МО Вітлабораторія

У Латвії розроблено препарат (РИМОЛАН) із клітин плаценти людини (форма ліофілізована). У процесі розробки технології авторами створені режими, що дозволяють найповніше зберегти комплекс біологічно активних речовинз обґрунтованими в експерименті in vivo імунокомпетентними властивостями Збереження комплексного природного складу при виробництві подібних лікарських форм розширює спектр застосування даних препаратів при антибактеріальній, антивірусній терапії, онко- та іншій патології. Вивчення складу Римолана виявило у ньому наявність широкого спектра цитокінів, амінокислот, гормонів, антиоксидантів. У доклінічних та клінічних дослідженнях у практиці ветеринарних лікарів доведено імунотропну дію препарату, протипухлинну активність з достовірним покращенням якості життя пацієнтів, антивірусну та антибактеріальну активність.

Застосування Ронколейкіна при вірусних респіраторних хворобах телят

Є.А. Гречухін

Однією з актуальних та найважливіших проблем у сучасному молочному тваринництві є респіраторні хвороби великої рогатої худоби вірусної етіології, такі як: інфекційний ринотрахеїт (ІРТ), параг-ріпп-3 (ПГ-3), вірусна діарея (ВД), респіраторно-синцити РС). Перед нами було поставлено завдання визначити особливості епізоотології та проаналізувати існуючі методи лікувально-профілактичних заходів. Ми випробували заходи боротьби безпосередньо узятому племінному господарстві «Рапті» Лузького району Ленінградської області. Застосовували вакцину проти ІРТ та ПГ-3 виробництва ВНДІЗЖ з дворазовою вакцинацією стельних корів у період сухостою, та дворазовою вакцинацією телят з 15 денного віку. Поряд з цим при народженні теляти вводили восьмивалентну сироватку згідно з настановою, і препарат Ронколейкін (інтерлейкін 2) у дозі 100 000 Од внутрішньом'язово на голову при народженні. У контрольній групі відмінок склав 13,7% і безпеку 79,5%, а в дослідній групі відмінок склав 3,9% і 96,2% відповідно. В результаті застосування препарату Ронколейкін відмінок від респіраторних інфекцій вірусної етіології скоротився на 9,8% і збереження відповідно зросла на 16,7%, що доводить ефективність застосування препарату.

Вплив препарату Хелавіт на показники неспецифічного захисту організму великої рогатої худоби

А.І. Єнукашвілі

Санкт-Петербурзька державна академія ветеринарної медицини, Санкт-Петербург, Росія

Мікроелементний препарат Хелавіт у своєму складі містить такі життєво необхідні елементияк Ре, Мп, Сі, 7п, Со, 5е, і у вигляді комплексу з органічним похідним бурштинової кислоти. Відмінність даного препарату - це доступна для організму форма у вигляді комплексу з біолігандами (хелатними сполуками), які подібні до транспортних білків організму, що і забезпечує високу засвоюваність мікро- і макроелементів. Синтетичні хелатокомплексні сполуки завдяки їхній активній участі в обмінних процесах надають позитивну дію на резистентність, продуктивну та відтворювальну функцію тварин. Метою досліджень було вивчення впливу препарату Хелавіт на неспецифічний захист великої рогатої худоби. Було встановлено, що цей препарат у профілактичних дозах 0,6 мл на 10 кг живої маси протягом 30 днів підвищує показники фагоцитозу та лізоцимну активність сироватки крові корів. ФА лейкоцитів у тварин контрольної групи становила 39,3±2,16%, а у піддослідних тварин – 48,7±2,27; ФІ у контрольних тварин становив 6,3±0,29, у піддослідних – 6,7±0,11. Лізоцимна активність