Manko V.M., Devrishov D.A. Základy. Veterinárna imunológia

Imunológia je veda o imunite. Študuje prejavy, mechanizmy a metódy kontroly imunity a tiež vyvíja imunologické metódy na diagnostiku, liečbu a prevenciu chorôb ľudí a zvierat.

Všeobecne sa uznáva, že základ novej vedy položili slávne pokusy anglického lekára E. Jennera (1749-1823). Všimol si, že počas epidémií ľudských kiahní dojičky najčastejšie neochorejú. Je známe, že kravy dostávajú ovčie kiahne s léziami kože, najmä kože vemena a ceckov, kde sa tvoria pustuly kiahní. Dojičky infikované ovčími kiahňami majú na rukách pustuly. Pozorujúc tieto javy, Jenner dospel k záveru, že po infekcii a zotavení dojičiek kravskými kiahňami sa stávajú imúnne voči infekcii ľudskými kiahňami. Na podporu svojich pozorovaní v máji 1796 naočkoval 8-ročného chlapca najskôr kravské kiahne a po 1,5 mesiaci ľudské kiahne a chlapec neochorel. Jenner však nevidel princíp ochrany pred inými infekčnými chorobami v spôsobe, ktorý objavil v boji proti kiahňam. Jeho objav dal ľudstvu jediný spôsob, ako zabrániť kiahňam.

Louis Pasteur je uznávaný ako zakladateľ modernej vedeckej imunológie. V roku 1881 oznámil, že kurčatá, keď sú infikované oslabeným pôvodcom cholery, sa stávajú imúnnymi voči infekcii virulentnými kultúrami. Pasteur porovnávajúc svoje experimenty s pozorovaniami Jennera sformuloval základný princíp ochrany pred akýmkoľvek patogénom. infekčná choroba, ktorá spočíva v tom, že telo sa po stretnutí s oslabeným patogénom stáva imúnnym (imúnnym) voči virulentným mikróbom rovnakého druhu. Pasteur na počesť Jennera, objaviteľa ochranných očkovaní proti kiahňam, nazval oslabené kultúry patogénov vakcínami (z latinského vacca - krava). V nasledujúcich rokoch Pasteur vyrobil vakcíny a pri imunizácii zvierat vytvoril imunitu proti chorobám ako antrax, besnota, erysipel ošípaných atď. Neskôr sa zistilo, že imunitu je možné vytvoriť očkovaním usmrtenými mikroorganizmami, ako aj toxínmi. vylučované mikroorganizmami.

Koncom 19. a začiatkom 20. storočia bolo urobených mnoho objavov, ktoré vytvorili vedecký základ imunológie. V roku 1883 objavil I. Mechnikov fagocytózu a zaviedol pojem "bunková imunita". V týchto rokoch sa rozvíjala aj humorálna teória imunity, ktorej zástancom bol P. Ehrlich. Dlhá polemika medzi zástancami bunkovej a humorálnej teórie imunity prispela k vytvoreniu imunológie ako vedy. V roku 1908 dostali Mechnikov a Erlich Nobelovu cenu za vynikajúce objavy v oblasti imunity. V roku 1891 E. Bering a S. Kitazato ako prví použili pasívnu imunizáciu proti záškrtu a tetanu; v roku 1900 objavil K. Landsteiner krvné skupiny (A, B, O) u ľudí; v roku 1902 Sh. Richet založil fenomén anafylaxie; v roku 1905 K. Pirke zaviedol pojem „alergia“; v roku 1953 P. Medovar a M. Hašek nezávisle na sebe objavili fenomén imunologickej tolerancie; v roku 1958 F. Burnet navrhol teóriu klonálnej selekcie imunity; v roku 1959 J. Doss a kol. objavil antigénny systém históz ľudskej pomsty; v roku 1962 Zh. Miller stanovil úlohu týmusu ako primárneho lymfoidného orgánu; v roku 1963 B. Benacerraf zaviedol imunoreaktívne gény, nazývané Ir-gény; v N975 navrhli C. Milstein a D. Kehler spôsob získania monoklonálnych protilátok. Najväčším zovšeobecnením posledných rokov bola identifikácia dvoch nezávislých, ale súčasne fungujúcich bunkových populácií v imunitnej odpovedi T- a B-lymfocytov.

V dôsledku nových objavov a úspechov sa imunológia rozrástla na samostatnú vednú disciplínu pokrývajúcu okruh problémov modernej biológie, medicíny a veterinárnej medicíny. Oblasti všeobecnej imunológie zahŕňajú molekulárnu imunológiu, imunomorfológiu, imunogenetiku, imunochémiu, evolučnú imunológiu a oblasti súkromnej imunológie zahŕňajú imunoprofylaxiu infekčných chorôb, klinickú imunológiu, imunológiu reprodukcie a embryogenézu, imunopatológiu, imunoonkológiu, transplantačnú imunológiu.

Veterinárna imunológia sa rozvíja aj vo všetkých vedúcich oblastiach imunológie všeobecne. Imunológia venuje osobitnú pozornosť štúdiu vlastností imunity hospodárskych zvierat a štúdiu účinnými prostriedkami a spôsoby ich imunitnej ochrany. AT posledné roky Pre veterinárnu prax je pripravených viac ako 180 rôznych biologických prípravkov (vakcíny, séra, diagnostika).

Formácia a ďalší vývoj Veterinárna imunológia u nás bola propagovaná prácami najvýznamnejších vedcov N. N. Ginsburga, S. N. Vyšelského, A. A. Vladimirova, S. G. Kolesova, Ja E. Koljakovej, Ja R. Kovalenka, I. I. Kuleska, N. V. Lichačeva, S. Ja. Lyubashenko , N. A. Mikhina, S. A. Muromceva, A. Kh. Sarkisova, P. S. Solomkin a mnohí ďalší. Veterinárna imunológia čelí veľkým výzvam pri vytváraní nových a zlepšovaní existujúcich vakcín, sér a diagnostiky, pri štúdiu a prevencii imunitných ochorení, pri rozširovaní výskumu v oblasti neinfekčnej imunológie (imunológia súvisiaca s vekom, reprodukčná imunológia, nešpecifické mechanizmy rezistencie ).

Na zvieratách bolo vyvinutých niekoľko dôležitých modelov (in vivo) s experimentálnou hodnotou a klinickou využiteľnosťou, porovnateľných so systémami in vitro uvedenými vyššie. Ako modely sa použili inbredné línie myší s rôznymi genetickými profilmi; niektoré z nich boli získané metódami genetické inžinierstvo. Zvieratá niektorých inbredných línií majú vrodenú predispozíciu k rozvoju niektorých ochorení (napr. rakovina prsníka, leukémia, autoimunitné ochorenia, ťažká kombinovaná imunodeficiencia).

Okrem toho boli vyšľachtené zvieratá s genetickými poruchami schopnými exprimovať niektoré klonované cudzie gény (tzv. transgénne myši), alebo zvieratá, u ktorých sa dané gény neprejavujú (myši s „knockoutovými“ génmi). Takéto línie sa používajú na štúdium dôsledkov expresie určitých transgénov alebo dôsledkov absencie génovej expresie u "knockout" myší. Začnime diskusiu s inbrednými líniami zvierat.

Inbredné línie

Mnoho klasických experimentov v imunológii sa uskutočnilo s použitím inbredných zvieracích línií, ako sú myši, potkany a morčatá. Vytvorenie inbrednej línie zvyčajne vedie k selektívnemu príbuzenskému kríženiu potomstva na viac ako 20 generácií. Všetci členovia inbrednej línie zvierat sú geneticky identickí. Preto sa nazývajú syngénne, ako identické dvojčatá.Imunitnú odpoveď inbrednej línie možno študovať bez zohľadnenia variability spojenej s genetickými rozdielmi medzi zvieratami.

Transplantácia orgánov medzi členmi inbrednej línie je vždy úspešná, pretože ich antigény hlavného histokompatibilného komplexu (MHC) sú identické. Poznatky o zákonitostiach transplantácie a o tom, že MHC je hlavnou genetickou bariérou transplantácie, skutočne pochádzajú z experimentov na inbredných líniách.

Experimenty využívajúce inbredné línie viedli k identifikácii génov MHC triedy I a II, ktorých hlavnou funkciou je dodanie antigénových peptidových fragmentov na povrch bunky, čo umožňuje rozpoznanie epitopov antigén-špecifickými T-lymfocytmi.

Adoptívny prenos a pasívna imunizácia

Ochrana proti mnohým ochoreniam je poskytovaná bunkami sprostredkovanou imunitou poskytovanou antigén-špecifickými T bunkami, na rozdiel od protilátkami sprostredkovanej (humorálnej) imunity. Rozdiel medzi týmito dvoma vetvami imunitného systému je dobre demonštrovaný adoptívnym (vypožičaným) prenosom T buniek alebo pasívnym podávaním antisér alebo purifikovaných protilátok.

Adoptívny prenos T buniek sa zvyčajne uskutočňuje v geneticky identických pároch darca-príjemca (napríklad v rámci inbrednej línie) a vedie k vytvoreniu dlhodobej adoptívnej imunity po prvom kontakte s antigénom. Naopak, pasívny prenos séra obsahujúceho protilátky sa môže uskutočniť bez zohľadnenia MHC bariér a zostáva účinný len dovtedy, kým prenesené protilátky zostávajú aktívne u príjemcu. Preto sa tento typ prenosu nazýva pasívna imunizácia.

Myši s ťažkou kombinovanou imunodeficienciou

Ťažká kombinovaná imunodeficiencia (SCID) je porucha, pri ktorej je narušené dozrievanie B a T buniek, čo vedie k vytvoreniu nedostatočnosti mechanizmov obranyschopnosti lymfocytov u jedinca. V roku 1980 bola vyšľachtená inbredná línia myší, u ktorých sa spontánne vyvinula autozomálne recesívna mutácia vedúca k SCID. V dôsledku nedostatku funkčných T a B buniek u SCID myší sa uchytili bunkové a tkanivové štepy z myší iných kmeňov alebo druhov. Takýmto SCID myšiam môžu byť injekčne podané ľudské hematopoetické kmeňové bunky, aby sa vytvorili ľudské SCID chiméry.

U týchto chimérických myší sa vyvinú zrelé funkčné T a B bunky, ktoré sú potomstvom injikovaných ľudských hematopoetických kmeňových progenitorových buniek. Tento zvierací model sa stal cenným výskumným nástrojom, pretože umožňuje imunológom manipulovať s ľudským imunitným systémom in vivo a skúmať vývoj rôznych lymfoidných buniek. A čo viac, ľudské myši SCID by sa mohli použiť na testovanie nových vakcín, vrátane tých, ktoré by mohli pomôcť chrániť ľudí pred infekciou HIV.

Tymektomizované a nahé myši

Dôležitosť týmusu vo vývoji zrelých T-buniek možno demonštrovať na myšiach, ktoré podstúpili tymektómiu, ožiarenie a potom syngénnu transplantáciu kostnej drene počas novorodeneckého obdobia. U týchto myší sa nevyvíjajú zrelé T-lymfocyty. U myší homozygotných pre recesívnu mutáciu pi/pi sa tiež nevyvinú zrelé T bunky, pretože výsledkom mutácie je fenotyp charakterizovaný absenciou týmusu a ochlpenia (odtiaľ termín "nahá" - nahá). V oboch situáciách môže byť vývoj T buniek obnovený transplantáciou epitelového tkaniva týmusu do týchto myší. Podobne ako SCID myšacie modely sú tieto zvieracie modely užitočné pri štúdiu vývoja T-lymfocytov. Boli tiež použité na propagáciu in vivo nádorových bunkových línií a čerstvých nádorových explantátov zo zvierat iných kmeňov alebo druhov, ktoré vyžadujú neprítomnosť T buniek na odmietnutie takýchto cudzích buniek.

Transgénne myši a génová manipulácia

Transgénne myši

Ďalším dôležitým zvieracím modelom aktívne používaným v imunologickom výskume je transgénna myš. Získavajú sa zavedením klonovaného génu (transgénu) do oplodneného vajíčka myši. Vajíčka sa potom vstreknú do pseudogravidnej myši (obrázok 5.14). Úspešnosť tejto techniky je relatívne nízka, pričom 10-30 % potomstva exprimuje transgén. Keďže transgén je zavedený do somatických aj zárodočných buniek, prenáša sa na potomstvo ako mendelovská vlastnosť.

Ryža. 5.14. Všeobecný postup na získanie transgénnych myší

Konštrukciou transgénu s daným promótorom je možné kontrolovať génovú expresiu. Napríklad niektoré promótory fungujú len v určitých tkanivách (najmä inzulínový promótor funguje len v pankrease). Iné promótory sa aktivujú v reakcii na biochemické signály, ktoré sa v niektorých prípadoch môžu zaviesť ako doplnok stravy (napríklad metalotioneínový promótor sa aktivuje v reakcii na zinok, ktorý sa môže pridať do pitná voda). Transgénne myši boli použité na štúdium génov, ktoré nie sú normálne exprimované in vivo (napr. onkogény).

Pomocou transgénov sa skúmalo aj pôsobenie jednotlivých molekúl imunoglobulínu, receptorov T-buniek, molekúl MHC I. a II. triedy a cytokínov. Boli vyšľachtené transgénne myši, v ktorých bol celý myší imunoglobulínový lokus nahradený ľudskými imunoglobulínovými génmi. Tento model sa používa na generovanie "ľudských" protilátok u myší. Treba poznamenať, že nevýhodou transgénnej metódy je, že transgén je vložený do genómu náhodne. Toto obmedzenie spolu so skutočnosťou, že expresia transgénu vo veľkých množstvách v rôznych tkanivách nie je fyziologická, núti výskumníkov veľmi opatrne interpretovať výsledky získané u transgénnych myší.

Myši s "knockout" génmi

Niekedy je zaujímavé určiť, ako odstránenie konkrétneho génového produktu ovplyvní imunitný systém. Pomocou metódy génovej manipulácie je možné nahradiť normálny gén mutovaným alebo poškodeným, čím vznikne myš s „knockout“ („knockout“) génom. Na rozdiel od metódy použitej na vytvorenie transgénnych myší, pri tejto metóde knockout myši exprimujú transgény vložené do ich vlastných špecifických génov prostredníctvom procesu nazývaného homológna rekombinácia.

Hypoteticky, každý gén, pre ktorý existuje mutovaný alebo poškodený transgén, by mohol byť nahradený týmto spôsobom. Boli vyšľachtené knockout myši, ktorým chýba expresia rôznych dôležitých génov, vrátane tých, ktoré kódujú určité cytokíny a molekuly MHC. Myši "knockout" sa použili na identifikáciu oblastí génu potrebných na to normálne fungovanie. K tomu sa transgenézou zaviedli späť do genómu rôzne kópie mutantných génov, čo viedlo (alebo neviedlo) k obnoveniu fungovania génu.

Analýza génovej expresie

Microarrays v štúdiu génovej expresie

Mikročipy alebo génové čipy sú výkonnými nástrojmi na štúdium úrovne expresie tisícok génov súčasne. Microarray sa skladá z tisícok fragmentov DNA (každý s jedinečnou sekvenciou) pripojených v špecifickom poradí na sklo alebo iný povrch. Tieto fragmenty DNA vo forme komplementárnej DNA (cDNA; približne 500-5000 párov báz) alebo oligonukleotidov (20-80 párov báz) môžu predstavovať gény zo všetkých častí genómu. V tomto prípade je možné pripraviť špecializované mikročipy, ktoré budú využívať iba DNA študovaných génov. Štúdia využíva vzorku spoločnej messenger RNA (mRNA) – produktu, ktorý je výsledkom transkripcie všetkých aktívnych génov.

Pre mikročipové štúdie sa vzorka celkovej mRNA z bunky alebo tkaniva zvyčajne testuje paralelne s kontrolnou vzorkou potrebnou na porovnanie génovej expresie. Dá sa napríklad porovnávať odlišné typy bunky alebo tkanivá, bunky v rôznych štádiách diferenciácie alebo nádorové bunky s ich normálnymi náprotivkami. Vzorky, ktoré sa pridávajú do mikročipu, zvyčajne nie sú mRNA; reverzná transkripcia sa uskutočňuje na matrici celkovej (celkovej) mRNA a výsledná cDNA sa potom označí fluorescenčným materiálom (fluorochróm). Fluorochrómy rôznych farieb sa používajú na označenie cDNA z rôznych zdrojov.

Na obr. Obrázok 5.15 ukazuje, ako sa mikročipy používajú na porovnanie génovej expresie v populácii nádorových lymfoidných buniek a normálnych lymfocytov. Červený fluorochróm sa použil ako značka pre experimentálne cDNA z nádorových buniek a zelený pre cDNA pripravené z kontrolných normálnych analógov. Značené cDNA sa aplikovali na čip a nechali sa hybridizovať páry báz so zodpovedajúcimi fragmentmi. Kontrolná aj experimentálna cDNA boli pridané do mikročipu, takže súťažili o väzbu na povrchu mikročipu.

Ryža. 5.15. Mikročipová štúdia porovnávajúca vzorky mRNA nádoru a normálnych lymfocytov

Materiál, ktorý netvoril hybridy, bol zmytý a na miestach, kde došlo k zhode, zostali fluorescenčné škvrny. Na konci hybridizácie sa microarray skenoval laserom na detekciu červenej, zelenej, príp žlté škvrny. Najvyššie hladiny každého typu cDNA odrážali jeho farbu: červená - cDNA experimentálnych nádorových buniek; zelená - kontrolná cDNA; žltá - rovnaké hladiny DNA v oboch vzorkách. Na interpretáciu výsledkov fluorescenčný skener určil presnú úroveň fluorescencie každého bodu na skle.

Výsledné údaje sa potom analyzovali počítačovým programom, ktorý porovnával informácie o fluorescencii s genetickou databázou, aby sa určilo, ktoré gény boli nadmerne alebo nedostatočne exprimované v testovaných vzorkách. Charakterizácia distribúcie a množstva väzby DNA na mikročip má potenciál byť užitočná v oblasti imunológie. Najmä na klinickú diagnostiku lymfoidných nádorov, vývoj liekov (napríklad testovanie vyvíjaných imunosupresívnych liekov na ich vplyv na expresiu cytokínových génov) a objavenie nových génov.

závery

1. Keď protilátka a antigén interagujú, nepoužívajú sa kovalentné väzby; slabé sily, ako sú elektrostatické, hydrofóbne a van der Waalsove sily. Pre dostatočnú interakciu sa teda väzobné miesto protilátky a antigénu musia priestorovo striktne zhodovať, ako kľúč so zámkom.

2. Len reakcia medzi polyvalentným antigénom a aspoň divalentnou protilátkou môže viesť k interakcii vyjadrenej zosieťovaním molekúl antigénu protilátkami. Tieto reakcie nie sú možné za účasti hapténov alebo monovalentných Fab fragmentov.

3. Interakcia medzi rozpustnou protilátkou a nerozpustným časticovým antigénom vedie k aglutinácii. Stupeň aglutinácie závisí od pomeru interagujúcich protilátok a antigénu. Pri vysokej koncentrácii protilátok sa nemusí vyvinúť aglutinácia. Tento jav sa nazýva prozóna. Pojem "titer" znamená najvyššie zriedenie séra, pri ktorom ešte dochádza k aglutinácii, po ktorom nezačína pri vyššom zriedení.

4. Precipitačná reakcia prebieha zmiešaním rozpustného polyvalentného antigénu a (aspoň) divalentných protilátok v správnom pomere. Môže prebiehať vo vodnom médiu alebo géli.

5. Gélové reakcie medzi rozpustnými antigénmi a protilátkami možno použiť na kvalitatívnu a kvantitatívnu analýzu protilátok alebo antigénov. Príkladmi takýchto reakcií sú gélová difúzia, radiálna difúzia a imunoelektroforéza.

6. Rádioimunoanalýza je vysoko citlivý test na kvantitatívne stanovenie antigénov alebo protilátok. Využíva rádioaktívne značené antigény alebo protilátky a základom metódy je kompetitívna väzba neznačených a značených antigénov. Je potrebné oddeliť antigén naviazaný na protilátky od neviazaného značeného antigénu. Typicky sa separácia dosiahne použitím zrážania s anti-imunoglobulínmi.

7. Imunoanalýza na pevnej fáze je technika, ktorá sa opiera o schopnosť mnohých proteínov pripojiť sa k plastu a vytvoriť monomolekulárnu vrstvu. Antigén sa aplikuje do jamiek tablety, pridajú sa protilátky, následne sa jamky premyjú a meria sa prítomnosť a množstvo naviazaných protilátok, na čo sa používajú antiimunoglobulíny s rádioaktívnou alebo enzýmovou značkou.

8. Enzýmová imunoanalýza je typ imunoanalýzy na pevnej fáze, v ktorej sú enzýmy naviazané na antiimunoglobulíny. Množstvo sa stanoví kolorimetrickým vyhodnotením po pridaní substrátu, ktorý pôsobením enzýmu mení farbu.

9. Imunofluorescencia je metóda, pri ktorej sa antigén zisťuje pomocou imunoglobulínov značených fluoresceínom. Pri priamej imunofluorescencii nesú protilátky proti požadovanému antigénu fluorescenčnú značku. Pri nepriamej imunofluorescencii sa protilátky špecifické pre antigén neznačia, stanovujú sa po pridaní fluorescenčne značených antiimunoglobulínov. Prietokové fluorescenčné triediče buniek sú nástroje, ktoré možno použiť na výpočet a triedenie fluorescenčne označených buniek.

10. Testy používané na vyhodnotenie funkcie lymfocytov typicky merajú bunkovú proliferatívnu odpoveď alebo efektorové funkcie. Napríklad je možné skúmať funkčný stav B buniek meraním ich schopnosti proliferovať a produkovať protilátky v reakcii na mitogény B buniek, ako je LPS alebo mitogén pokeweed. T bunky sa zvyčajne skúmajú na ich schopnosť zosilniť funkcie iných buniek (v prípade CD4+ buniek) alebo na ich schopnosť ničiť ciele so špecifickými antigénmi (v prípade CD8+ buniek). Okrem toho sa T bunky môžu skúmať meraním ich schopnosti proliferovať alebo produkovať určité cytokíny v reakcii na mitogény T buniek, ako sú PHA a Con A.

11. Monoklonálne protilátky sú vysoko špecifické činidlá pozostávajúce z homogénnej populácie protilátok, ktoré sú identické v špecificite s konkrétnym epitopom.

R. Koiko, D. Sunshine, E. Benjamini

Veterinárna imunológia
Kniha je prvým pokusom vo svetovej literatúre o spojenie teoretických princípov imunológie s ich praktickým využitím vo veterinárnej praxi, načrtáva teoretické koncepty vrodenej a získanej imunity, uvažuje o imunologických reakciách používaných pri diagnostike ochorenia, popisuje používané vakcíny a séra na prevenciu a liečbu chorôb, vyzdvihuje úlohu imunity pri normálnom fyziologickom stave organizmu a rôznych patologických zmenách

Kniha je určená vedeckým a praktickým pracovníkom v oblasti veterinárnej a lekárskej imunológie.

OBSAH
Predslov k ruskému vydaniu 3
Predslov k anglickému vydaniu 4
Časť I
HLAVNÉ ASPEKTY IMUNOLÓGIE
Kapitola 1. História vzniku imunológie 5
Kapitola 2. Imunita a vzťah zvieraťa k iným organizmom
prostredie 10
Kapitola 3. Nešpecifické mechanizmy imunity 13
Kapitola 4. Špecifická získaná imunita 21
Kapitola 5. Antigény 25
Kapitola 6 Protilátky 31
Kapitola 7. Charakteristiky reakcie antigén-protilátka 52
Kapitola 8
Kapitola 9 Reakcie bunkovej imunity 71
Kapitola 10
Časť II
METÓDY INDIKÁCIE IMUNITNÉHO STAVU A ICH POUŽITIE V DIAGNOSTIKE OCHORENIA
Kapitola 11. Stanovenie imunity zvierat metódami in vivo 94
Kapitola 12. Metódy stanovenia a merania obsahu protilátok 102
Kapitola 13 Neutralizačná reakcia 111
Kapitola 14. Aglutinačná reakcia 114
Kapitola 15
Kapitola 16
Kapitola 17. Fixácia komplementu a iné súvisiace reakcie 145
Kapitola 18
Kapitola 19. Charakterizácia bunkovej imunity v reakciách in vitro 158
Časť III
VAKCÍNY A ANTISÉRA
Kapitola 20 Aktívna imunita 162
Kapitola 21 Typy vakcín 171
Kapitola 22 vírusové ochorenia 175
Kapitola 23
Kapitola 24
a mnohobunkové organizmy 189
Kapitola 25 Vakcíny 191
Kapitola 26 Pasívna imunita a terapeutické antisérum 217
Časť IV
FYZIOLOGICKÉ A PATOLOGICKÉ ASPEKTY ŠPECIFICKÝCH IMUNITNÝCH REAKCIÍ
Kapitola 27
Kapitola 28. Fyziológia imunity 240
Kapitola 29. Patogénne účinky imunologických reakcií 250
Kapitola 30
s infekčnými chorobami 271
Aplikácia. Terminológia 282
Doslov 296
Index 303

VETERINÁRNA MIKROBIOLÓGIAA IMUNOLÓGIA

pre odbor 310800 - "Veterinárna" podľa kvalifikácie odborníka - veterinára

Moskva 2001

1. Ciele a ciele odboru "veterinárna mikrobiológia a imunológia"

Hlavným cieľom výučby odboru „Veterinárna mikrobiológia a imunológia“ je formovať u budúceho veterinárneho lekára vedecký svetonázor o diverzite mikroorganizmov, o ich úlohe vo všeobecných biologických procesoch, vr. pri infekciách a v patológii zvierat, vývoj teoretických základov pre diagnostiku infekčných chorôb, zásady imunologického výskumu, výroba a kontrola biologických produktov.

Cieľ predmetu zahŕňa štúdium princípov: systematika, morfológia a fyziológia, zemepisná šírka_distribúcia mikroorganizmov v prírode, vlastnosti ich biológie a ekológie; úloha mikróbov pri premene látok v prírode a pôsobení faktorov prostredia na prokaryotické bunky, osvojenie si základov teórie infekcie a imunity, dedičnosti a variability, zvládnutie metód indikácie a identifikácie baktérií a húb patogénnych pre živočíchy, bakteriologické sérologické, genetické a alergické štúdie používané pri diagnostike infekčných ochorení.

V dôsledku štúdia predmetu by študenti mali poznať teoretické základy životnej činnosti mikroorganizmov, ich vzájomné pôsobenie a interakciu s organizmom zvierat, základné biologické vlastnosti patogénnych mikróbov, princípy a metódy diagnostiky a špecifickej prevencie mikroorganizmov. infekčné choroby. Tieto ciele a zámery napomáha vzdelávacia a výskumná práca študentov SUIRS.

Získané poznatky z biológie a ekológie patogénov infekčných chorôb, infekcie a imunity by mali budúcim veterinárom pomôcť správne organizovať a vykonávať bakteriologické a sérologické štúdie a špecifickú prevenciu infekčných chorôb. Na štúdium predmetu „Veterinárna mikrobiológia a imunológia“ je potrebné, aby študenti zvládli sekcie nasledujúcich odborov:

fyzika (reaktívny pohon v živých organizmoch, centrifúgy a ich využitie v biologickom výskume, bunkové membrány

brány, rozlišovacia schopnosť optických prístrojov, luminiscenčná analýza, fotobiologické reakcie, röntgenové lúče, elektrónový mikroskop);

organická chémia (uhľovodíky, alkoholy, fenoly, sacharidy, aminokyseliny a bielkoviny);

anorganická a analytická chémia (dispergované systémy a roztoky, príprava riedení s koeficientmi 2 a 10);

fyzikálna a koloidná chémia (náuka roztokov, mechanizmus fotosyntézy, stabilita koloidné systémy a koagulácia, suspenzie, emulzie a peny, proteíny);

anatómia hospodárskych zvierat (orgány tvorby krvi a lymfy);

biochémia (enzýmy, bielkoviny, biologická oxidácia a prvky bioenergetiky, štruktúra a vlastnosti sacharidov, klasifikácia, štruktúra a základné vlastnosti lipidov, štruktúra a syntéza aminokyselín a nukleoproteínov, biologický význam vitamínov, metabolizmus vody a minerálov);

Fyziológia, patofyziológia (transport živín, mechanizmy sekrécie, všeobecné biologické pojmy, zápalový mechanizmus, alergie, pôsobenie lyzozýmu, komplementu, orgánov a buniek imunitného systému).

Pre úspešnejší rozvoj kurzov mikrobiológie a imunológie je samozrejme nevyhnutná znalosť latinského jazyka.

Učitelia preverujú zvládnutie disciplíny na laboratórnych hodinách, kolokviách (ústne alebo podľa počítačového programu), v písomných testoch a semestrálnych prácach, testoch a na konci kurzu - skúškach.

Spoločné imunologické fórum, Petrohrad 2008

VETERINÁRNA IMUNOLÓGIA

Výsledky použitia lieku "Hemobalance" pri korekcii stavov imunodeficiencie u koní

A.B. Andreeva

Účelom nášho výskumu bolo študovať zmeny v imunologických charakteristikách krvi gravidných kobýl (druhá polovica gravidity) a korekciu týchto ukazovateľov pomocou lieku "Hemobalance". Odber krvi bol realizovaný pred užitím lieku (základné hodnoty) a po užití lieku „Hemobalance“. Liečivo sa podávalo intramuskulárne podľa nasledujúcej schémy: 1 ml na 45 kg telesnej hmotnosti, každých 48 hodín počas 7 dní (3 injekcie). Štúdie sa uskutočnili na 10 kobylách vo veku 5 až 12 rokov chovaných v súkromných stajniach Leningradská oblasť. Z týchto štúdií vyplýva, že v druhej polovici gravidity dochádza k poklesu aktivity faktorov špecifickej aj nešpecifickej rezistencie organizmu matky, o čom svedčia nízke koncentrácie imunoglobulínov, ako faktorov špecifickej imunity, resp. zníženie aktivity väzby nešpecifickej imunity. Pri použití komplexného prípravku „Hemobalance“ je zaznamenaná nasledujúca dynamika zmien týchto ukazovateľov: koncentrácia 1d A vzrástla o 12,71 %, 1d M o 31,57 %, 1d ^ o 31,57 %, 1d C2 o 45,5 %, BASK o r. 23,19%, lyzozýmová aktivita o 13,12%, fagocytový index o 43,75%, fagocytový počet o 50,16%, fagocytový index o 48,12%.Na základe vykonaných štúdií je teda možné vyvodiť nasledovné závery:1 .Druhá polovica tehotenstva je sprevádzané poklesom faktorov nešpecifickej a špecifickej rezistencie. 2. Použitie komplexného lieku "Hemobalance" v tomto období u kobýl prispieva k stimulácii nešpecifickej a špecifickej rezistencie.

Vplyv použitia lieku "Helavit" na ukazovatele prirodzenej odolnosti psov

A.A. bakhta

FGOU VPO "St. Petersburg State Academy of Veterinary Medicine", Petrohrad, Rusko

Sérový lyzozým a baktericídne aktivity sú dôležitými indikátormi prirodzenej odolnosti psov. Účelom nášho výskumu bolo študovať vplyv použitia lieku "Helavit" na BASK, aktivitu lyzozýmov a aktivitu fagocytózy u psov so sekundárnymi imunodeficienciami. Štúdie sa uskutočnili na psoch so sekundárnymi imunodeficienciami pred použitím lieku "Helavit" a po ukončení užívania tohto lieku. Pred užitím lieku bol BASK 66,7 ± 2,5, po aplikácii sa zvýšil o 14,5 %, aktivita lyzozýmu sa zvýšila o 16,65 % (počiatočné údaje 13 ± 1,55 op. jednotiek), fagocytárna aktivita pred experimentom bola 45 ,45±6,89, fagocytárny index 5,0 ± 1,2, fagocytárne

číslo 11 ± 2,5, po užití lieku sa tieto ukazovatele zvýšili o 23,5%; 20,0 %, 25,5 %. Tento liek má teda imunomodulačný účinok a možno ho odporučiť na korekciu stavov imunodeficiencie u psov.

Imunologická diagnostika dirofilariázy u psov

T.V. Bogdanová, V.I. Bojko

GOU VPO "Astrachán Štátna univerzita», Astrachaň, Rusko

Imunomodulačný účinok Rimolanu u kráv so subklinickou mastitídou

V. Antane1, E. Bykova2, L. Emelyanov1, I. Lusis1 veterinárna fakulta Lotyšská poľnohospodárska univerzita;

2 Reprodukčné centrum Riga, Lotyšsko

V štruktúre chorobnosti kráv zaujíma mastitída osobitné miesto a podľa Európskej asociácie chovateľov hospodárskych zvierat má táto patológia tendenciu narastať vo všetkých krajinách s rozvinutým chovom dobytka. Najväčšie nebezpečenstvo predstavujú subklinické formy mastitídy, ktoré tvoria 95 % všetkých prípadov zápalu vemena. Podľa výskumníkov spôsobujú veľké škody na farmách, znižujú ročný výnos stáda z 10 % na 40 %. V tejto súvislosti lekári aktívne študujú stav všeobecnej rezistencie zvierat, odolnosť poškodeného vemena voči patogénu a vyvíjajú etiopatogenetické liečebné režimy s použitím imunotropných liekov.U 15 kráv so subklinickými

pri mastitíde sa skúmal účinok Rimolanu na klinický stav vemena; ukazovatele vrodenej imunity sa skúmali v krvnom sére a mlieku. Zistilo sa, že zmenené ukazovatele granulocytov, hladina IgG, IgA, IgM, v mlieku; index fagocytárnej aktivity neutrofilov, koncentrácia IgG, IgA, IgM, leukocytov a lymfocytov v krvi potvrdzujú imunomodulačný účinok Rimolanu pri tejto patológii.

Vyhliadky na klinické použitie Rimolanu

I.I. Vetra2, E.Ya. Bykova1, L.V. Ivanova2, I.A. Barene2,

L.Ya. Stahlé2, L.R. Khemy1, N.S. Sergeeva4, I.K. Sviridova4,

L.M. Skuin3, I.Ya. Daberte2, L.Yu. Karpenko5, V.V. bogomolov6,

M.V. Afendik1, T.S. Yasyuk1

1 Reprodukčné centrum Riga;

2Univerzita Stradins, Riga;

3 ruský Lekárska akadémia postgraduálne

vzdelanie, Moskva;

4MNIOI ich. P. A. Herzen;

5FGOU VPO S.-P. GAVM,

Leningrad MO Veterinárne laboratórium

V Lotyšsku bol vyvinutý liek (RIMOLAN) z buniek ľudskej placenty (lyofilizovaná forma). V procese vývoja technológie autori vytvorili režimy, ktoré umožňujú najúplnejšie biologické zachovanie komplexu. účinných látok s imunokompetentnými vlastnosťami podloženými v experimente in vivo. Zachovanie komplexného prírodného zloženia pri výrobe takýchto liekových foriem rozširuje rozsah použitia týchto liečiv v antibakteriálnej, antivírusovej terapii, pri onkologických a iných patológiách. Štúdium zloženia Rimolanu v ňom odhalilo prítomnosť širokého spektra cytokínov, aminokyselín, hormónov, antioxidantov. V predklinických a klinických štúdiách v praxi veterinárnych lekárov bol preukázaný imunotropný účinok lieku, protinádorová aktivita s výrazným zlepšením kvality života pacientov, antivírusová a antibakteriálna aktivita.

Použitie Roncoleukinu pri vírusových ochoreniach dýchacích ciest teliat

E.A. Grechukhin

Jedným z najnaliehavejších a najdôležitejších problémov moderného chovu dojníc sú respiračné ochorenia hovädzieho dobytka vírusovej etiológie, ako sú: infekčná rinotracheitída (IRT), paragripp-3 (PG-3), vírusová hnačka (VD), respiračná syncyciálna infekcia (RS ). Mali sme za úlohu určiť znaky epizootológie a analyzovať existujúce metódy liečby a preventívnych opatrení. Kontrolné opatrenia sme testovali na špecifickej chovnej farme „Rapti“ v okrese Luga v Leningradskej oblasti. Vakcína proti IRT a PG-3 vyrábaná spoločnosťou ARRIAH bola použitá pri dvoch vakcináciách gravidných kráv v období nasucho a dvoch vakcináciách teliat od veku 15 dní. Spolu s tým bolo pri narodení teľaťu podané osemhranné sérum podľa pokynov a liek Roncoleukin (interleukín 2) v dávke 100 000 IU intramuskulárne na hlavu pri narodení. V kontrolnej skupine bola úmrtnosť 13,7 % a miera prežitia 79,5 %, zatiaľ čo v experimentálnej skupine bola úmrtnosť 3,9 % a 96,2 %. V dôsledku použitia lieku Roncoleukin sa prípad respiračných infekcií vírusovej etiológie znížil o 9,8% a bezpečnosť sa zvýšila o 16,7%, čo dokazuje účinnosť lieku.

Vplyv Helavitu na ukazovatele nešpecifickej obranyschopnosti organizmu hovädzieho dobytka

A.I. Yenukašvili

St. Petersburg State Academy of Veterinary Medicine, Petrohrad, Rusko

Mikroelementový prípravok Helavit vo svojom zložení obsahuje také vitálne potrebné prvky ako Fe, Mn, Cu, 7n, Co, 5e a \ vo forme komplexu s organickým derivátom kyseliny jantárovej. Rozdielom tohto lieku je forma dostupná pre telo vo forme komplexu s bioligandmi (chelátové zlúčeniny), ktoré sú podobné transportným proteínom tela, čo zabezpečuje vysokú stráviteľnosť mikro- a makroprvkov. Syntetické chelátové zlúčeniny vďaka svojej aktívnej účasti na metabolických procesoch priaznivo ovplyvňujú odolnosť, produkčnú a reprodukčnú funkciu zvierat. Cieľom výskumu bolo skúmať vplyv Helavitu na nešpecifickú obranyschopnosť organizmu hovädzieho dobytka. Zistilo sa, že tento liek v profylaktických dávkach 0,6 ml na 10 kg živej hmotnosti počas 30 dní zvyšuje rýchlosť fagocytózy a lyzozýmovej aktivity krvného séra kráv. FA leukocytov u zvierat kontrolnej skupiny bola 39,3 ± 2,16 % a u pokusných zvierat - 48,7 ± 2,27; FI u kontrolných zvierat bola 6,3 ± 0,29, u pokusných zvierat - 6,7 ± 0,11. Aktivita lyzozýmu