Metode pentru determinarea ureei în sânge. Semnificația clinică și diagnostică a determinării ureei. Normă și abateri ale indicatorilor

Capacitatea de legare a fierului a serului sanguin Capacitatea de legare a fierului a serului sanguin (IBC) este un indicator care caracterizează capacitatea serului sanguin de a lega fierul. Fierul din corpul uman este în combinație cu o proteină - transferină. JSS arată

Testul imunoabsorbant enzimatic al serului sanguin (ELISA) Există trei clase de anticorpi: imunoglobuline M, A, C (JdM, JdA, JC). Acestea se acumulează în serul sanguin și secretele corpului la intervale diferite de la debutul infecției.În timpul infecției primare, prima

Indicanul în serul sanguin Indicanul se formează în ficat în timpul neutralizării indolului, o substanță otrăvitoare care apare în intestine în timpul degradarii proteinelor. De aceea, conținutul său în serul sanguin crește semnificativ în prezența proceselor putrefactive din intestine. Se reduce

Activitatea enzimelor din serul sanguin Enzimele (sau enzimele) sunt proteine ​​de natură specifică care sunt sintetizate în celule, catalizează reacții biochimice (adică, le măresc viteza) care apar în corpul nostru, dar ele însele rămân neschimbate. Poate sa

Creaginina și ureea Cel mai important pentru evaluarea gradului de încălcare a capacității de excreție a rinichilor este determinarea conținutului de creatinină și uree în sânge și urină. Aceste substanțe sunt produsele finale ale metabolismului proteic, se formează în țesuturi, circulă în

Ureea Produsul final al digestiei este metabolismul proteic. O mulțime de uree este produsă în organism și este excretată în mod constant prin urină și transpirație. Deoarece molecula de uree conține doi ioni de amoniac, dă urinei un miros de amoniac. Și când munca este întreruptă

Determinarea concentrației de uree în sânge este utilizată pe scară largă în diagnosticare, utilizată pentru a evalua severitatea procesului patologic, pentru a monitoriza evoluția bolii și pentru a evalua eficacitatea tratamentului. Cu toate acestea, nu trebuie să uităm că nivelul de uree din sânge poate fi influențat nu numai de factori patologici, ci și de factori fiziologici (natura nutriției, stresul exercitat etc.), precum și recepția medicamente. Nivelul de uree se poate schimba atât în ​​sus, cât și în jos. La procese fiziologice gradul de abatere a nivelului de uree de la normă, de regulă, este nesemnificativ, în timp ce se observă modificări semnificative în patologie, iar gradul de modificare a nivelului de uree depinde de severitatea procesului patologic.

Valori normale ale ureei în sânge

Concentrația de uree în serul sanguin al adulților sănătoși este de 2,5 - 8,3 mmol / l (660 mg / l). La femei, în comparație cu bărbații adulți, concentrația de uree în serul sanguin este de obicei mai mică. La vârstnici (peste 60 de ani), există o ușoară creștere a concentrației de uree în serul sanguin (cu aproximativ 1 mmol / l în comparație cu norma adulților sănătoși), care se datorează unei scăderi a capacității. a rinichilor pentru a concentra urina la vârstnici.

La copii, nivelul de uree este mai mic decât la adulți, cu toate acestea, la nou-născuți în primele 2-3 zile, conținutul său poate atinge nivelul unui adult (manifestarea azotemiei fiziologice din cauza catabolismului crescut pe fondul unui aport insuficient de lichide). în primele 2–3 zile de viaţă şi nivel scăzut filtrare glomerulară). În condiții de hipertermie, exicoză, cifrele de uree pot crește și mai mult. Normalizarea are loc până la sfârșitul primei săptămâni de viață. Nivelul de uree din sângele prematurilor 1 săptămână. - 1,1 - 8,9 mmol / l (6,4 - 63,5 mg / 100 ml), la nou-născuți - 1,4 - 4,3 mmol / l (8,6 - 25,7 mg / 100 ml ), la copii după perioada neonatală - 1,8 - 6,4 mmol / l ( 10,7 - 38,5 mg / 100 ml).

Creșterea nivelului de uree în sânge

O creștere a nivelului de uree din sânge se observă cu:

• consumul de cantități excesive de proteine ​​(ca urmare a sintezei crescute de uree);
• o alimentație săracă în ioni de clor (reacție compensatorie, adaptativă care vizează menținerea presiunii coloido-osmotice a sângelui);
• deshidratare a organismului: vărsături indomabile, diaree abundentă etc. (datorită reabsorbției pasive crescute în tubii renali);
• luarea anumitor medicamente: sulfonamide, cloramfenicol, tetraciclina, gentamicina, furosemid, izobarina, dopegyt, nevigramona, lasix, steroizi anabolizanti, corticosteroizi, tiroxina in cantitati mari;
• catabolism proteic excesiv: leucemie, icter parenchimatos, sever boli infecțioase, obstrucție intestinală, arsuri, dizenterie, șoc;
• încălcarea excreției de uree asociată cu boli ale rinichilor și ale tractului urinar: boală cronică de rinichi (glomerulonefrită, pielonefrită); obstrucția tractului urinar (tumori ale tractului urinar, glandei prostatei, boală de pietre la rinichi); insuficiență renală acută și cronică;
• încălcarea excreției de uree în boli și afecțiuni care nu sunt asociate cu boli ale rinichilor și ale tractului urinar: insuficiență a inimii, infarct miocardic acut; Diabet cu cetoacidoză, boala Addison și alte boli.

O creștere a nivelului de uree în sânge, asociată cu formarea sa crescută sau o scădere a filtrării sale în rinichi, ca urmare a tulburărilor hemodinamice, de regulă, nu atinge valori mari, conținutul de uree nu depășește de obicei 13. mmol/l.

Valori mari nivelurile de uree din sânge sunt observate în bolile de rinichi. Astfel, concentrația de uree în plasma sanguină a pacienților cu insuficiență renală cronică poate ajunge la 40,0 - 50,0 mmol / l. Un conținut deosebit de ridicat de uree (49,8 - 81,0 mmol / l și peste) se observă în insuficiența renală acută. În același timp, excreția de uree în urină este redusă brusc. Cu toate acestea, trebuie remarcat faptul că o creștere a ureei nu este un semn precoce de afectare a funcției renale. S-a stabilit că la început nivelul acidului uric crește, apoi ureea și creatinina, care este un simptom amenințător. În diferite boli de rinichi, gradul de creștere a conținutului de uree este determinat de natura leziunii nefronului, nivelul de intoxicație, descompunerea crescută a proteinelor în țesut (datorită restricției de proteine ​​în dieta pacienților renali) și alți factori. O creștere a conținutului de uree în sânge până la 16,0 mmol/l este combinată cu afectarea funcției renale de severitate moderată, până la 33,2 mmol/l - severă, peste 49,8 mmol/l - o tulburare foarte severă cu prognostic nefavorabil.

O creștere a conținutului de uree în sânge, însoțită de un sindrom de intoxicație, se numește uremie. În general, se crede că ureea nu este toxică și că sindromul de intoxicație care însoțește o creștere a conținutului său se datorează acumulării altor produse în organism. În același timp, trebuie avut în vedere faptul că ureea, trecând relativ ușor prin membranele plasmatice ale celulelor, fiind osmotic substanta activa, transportă apa în celulele organelor parenchimatoase. Acest lucru duce la o creștere a volumului celulelor (suprahidratare celulară) și la o încălcare a stării lor funcționale.

Scăderea nivelului de uree din sânge

O scădere a conținutului de uree din sânge este rar observată:

• în timpul sarcinii (din cauza hidremiei fiziologice);
• cu o alimentatie saraca in proteine ​​si bogata in carbohidrati, de post;
• cu administrare parenterală de lichide (din cauza hiperhidratării);
• după hemodializă;
• cu catabolism proteic redus;
• când luați STH;
• în încălcarea absorbției în intestin, boala celiacă;
• cu utilizarea crescută a proteinelor (în întâlniri târzii sarcina, la copii sub 1 an, cu acromegalie);
• cu deficiență congenitală sau lipsă de enzime implicate în ciclul ornitinei ureei;
• cu afectare hepatică deosebit de gravă (insuficiență hepatică), cauzată, în special, de otrăvirea cu fosfor, arsenic și alte otrăvuri hepatotrope; necroză acută hepatică, comă hepatică, ciroză decompensată, hepatită (se știe că ficatul are rezerve funcționale mari, capacitatea sa de dezaminare și sinteza de uree este păstrată atunci când până la 85% din țesutul său este exclus din procesele metabolice).

Literatură:

• Tsyganenko A. Ya., Zhukov V. I., Myasoedov V. V., Zavgorodniy I. V. - Biochimie clinică - Moscova, „Triada-X”, 2002
• Slepysheva V. V., Balyabina M. D., Kozlov A. V. - Metode pentru determinarea ureei
• Evaluarea clinică a testelor de laborator - editat de N. U. Titz - Moscova, „Medicina”, 1986
• Kamyshnikov V.S. - Ghidul de buzunar al medicului pentru diagnosticarea de laborator - Moscova, MEDpress-inform, 2007
• Marshall J. - Biochimie clinică - Moscova, Sankt Petersburg, „Binom”, „Dialectul Nevski”, 2000

Prelegerea #7

Tema „SINTEZA PRODUSELOR FINALE ALE METABOLISMULUI PROTEIN”.

Plan de prezentare

1. Surse de amoniac din organism. Căi de neutralizare. Sinteza ureei (ciclul ornitinei).

2. Uremia, clasificare. Determinarea KDZ a ureei în sânge și urină.

3. Formarea creatininei în organism.

4. KDZ pentru determinarea nivelului de creatinina din serul sanguin si urina.

5. Sinteza acidului uric în organism. Definiții KDZ în serul sanguin și urină.

Surse de amoniac în organism: 1.Aminoacizi.

2. Amide AK; glutamină, asparagină.

3 . Amine biogene.

4. Baze purinice.

5. baze pirimidinice.

Amoniacul este o substanță toxică pentru organism, în special pentru sistemul nervos.

Există 5 moduri de a neutraliza amoniacul din organism:

1. Biosinteza ureei în ficat.

2. Aminare reductivă în țesuturi.

3. Formarea amidelor acide în țesuturi.

4. Formarea bazelor pirimidinice în citosolul celulelor.

5. Formarea sărurilor de amoniu în rinichi.

Principala cale de neutralizare a amoniacului în organism este biosinteza ureei în ficat.

În biosinteza ureei în prima etapă este implicată carbomoil fosfat sintetaza, localizată numai în mitocondriile celulelor hepatice.

Amoniacul este livrat la ficat din creier și din alte țesuturi nu într-o formă liberă, ci sub formă de glutamina, care este hidrolizată de glutaminază în amoniac și acid glutamic. Din mușchi și intestine, amoniacul este livrat sub formă de alanină.

Biosinteza ureei (ciclul ornitinei):

· NH3 + CO2 + 2ATF = carbomoil fosfat + 2ADF.

Carbomoil fosfat + ornitină = citrulină - acest aminoacid nu este codificat de codul genetic și nu este utilizat în sinteza proteinelor

· Citrulina interacționează cu acidul L-aspartic = acid argininosuccinic, care se descompune în arginină și acid fumaric cu participarea argininosuccinat-liazei.

Arginina devine sursă de uree, după scindare, care, cu ajutorul arginazei, ornitina reapare, închizând procesul ciclic de formare a ureei.

Semnificația biologică a ciclului ornitinei:

1. Neutralizarea amoniacului din organism.

2. Reglarea echilibrului de azot în organism - atunci când o cantitate mare de proteine ​​intră în organism, viteza ciclului crește.

3. Furnizează fumarat către CTC.

4. Biosinteza aminoacizilor neesențiali prin oxalacetat.

5. Oferă oxaloacetat pentru biosinteza glucozei.

Semnificația clinică a determinării amoniacului. Determinarea amoniacului în sânge are o mare valoare prognostică în bolile hepatice. În mod normal, sângele integral conține mai puțin de 65 µmol/l. 0,5 g de amoniac sunt excretate în urină pe zi. În leziunile parenchimatoase severe, ficatul nu este capabil să neutralizeze amoniacul primit. Ca rezultat, amoniacul se acumulează în sânge. Simptomele clinice comune tulburărilor de sinteză a ureei sunt vărsăturile (la copii), aversiunea față de alimentele bogate în proteine, necoordonarea, iritabilitatea, somnolența și retardul mental. Conținutul de amoniac din urină este un indicator important al stării echilibrului acido-bazic. Cantitatea de amoniac din urină este crescută atât în ​​acidoza respiratorie, cât și în cea metabolică. O creștere a amoniacului în urină apare în condiții febrile, cu cistopielita, cu hiperfuncție a cortexului suprarenal. Hiperamoniemia apare cu 1 - deficit congenital al enzimelor de biosinteză a ureei, 2 - insuficiență hepatică, 3 - aport excesiv de proteine, 4 - sângerare intestinală.

Semnificația clinică și diagnostică a determinării ureei.

Ureea în sine este ușor toxică. Ionii de potasiu care se acumulează cu ea, derivații de guanidină (acid guanidinoacetic, metilguanidină), peptidele cu greutate moleculară medie (MSM) sunt toxice. Prin urmare, ureea este considerată un marker al intoxicației.

Deoarece ureea trece cu ușurință prin membranele celulare și Er și este o substanță activă osmotic, ea provoacă tulburări în metabolismul apă-sare, trăgând împreună cu ea apa, provocând umflarea țesuturilor, miocardului și a sistemului nervos central. O creștere de câteva ori a concentrației de uree, însoțită de un sindrom clinic de intoxicație - uremie.

uremie de retenție extrarenală: anurie reflexa, tumori si calculi la nivelul cailor urinare etc.

Uremia de producție apare cu descompunerea crescută a proteinelor - peritonită, arsuri, holeră, boli infecțioase severe, infarct miocardic acut, vărsături, diaree.

Relativ: cu dizenterie.

Deoarece ureea se formează în ficat, apoi cu icter parenchimatos, distrofie hepatică acută, ciroză, nivelul de uree scade, iar concentrația de azot rezidual este normală sau crescută.

Se observă o scădere a nivelului de uree prin încălcarea absorbției în intestin (boala celiacă), nutriție parenterală, acromegalie.

uree - componentă azot din sânge rezidual-50%;

Pe lângă uree, azotul rezidual din sânge include:

aminoacizi 25%;

creatina 5%, creatinina 2,5%;

acid uric 4%.

Azotul rezidual este crescut de uree la pacienții cu insuficiență renală (insuficiență hepatică - azotul rezidual este crescut de aminoacizi și amoniac).

În clinică, determinarea ureei este importantă în diagnosticul bolilor de rinichi. Determinarea concentrației de uree este tehnic mai simplă decât cea a azotului rezidual, iar conținutul de uree în patologia renală crește mai repede decât toate celelalte componente ale azotului rezidual.

Principiul metodei : ureea se descompune în CO 2 și NH 3 sub acțiunea enzimei ureazei, aceasta din urmă, în reacție cu salicilat de sodiu și hipoclorură de sodiu în prezența nitroprusiatului de sodiu, formează un produs colorat, a cărui intensitate a culorii este proporțională cu concentrația de uree în probă.

Reactivi si echipamente: 1) reactiv 1 – soluție de urează în tampon fosfat; soluție de salicilat de sodiu și nitroprusiat de sodiu; 2) reactiv 2 – soluție de hipoclorit de sodiu și hidroxid de sodiu; 3) probe de ser sanguin; 4) soluție de calibrare de uree cu o concentrație de 5,0 mmol/l; 5) eprubete, pipete; 6) termostat; 7) FEK.

Progres:

Se amestecă probele și se incubează timp de 5 minute la o temperatură de 37 0 C, apoi se adaugă:

După adăugarea reactivului, se amestecă 2 probe și se incubează timp de 5 minute la o temperatură de 37 0 С.

Se măsoară densitatea optică a probelor experimentale (D) și de calibrare (D c) față de proba de control la λ = 610 nm. Culoarea este stabilă timp de 2 ore.

Rezultate: D 1 =

Pentru a calcula concentrația de uree, utilizați formula:

C \u003d D 1 / D până la x 5,0 (mmol / l)

C 2 \u003d Normă: 2,5 - 8,3 mmol / l

Concluzii:

Determinarea cantitativă a ureei în urină prin reacția de culoare cu paradimetilaminobenzaldehida

Principiul metodei : ureea, interacționând cu paradimetilaminobenzaldehida într-un mediu acid, formează un compus galben-verde. Intensitatea culorii este proporțională cu concentrația de uree din probă. Densitatea optică a soluției este determinată prin fotoelectrocolorimetrie.

Reactivi si echipamente: 1) Soluție apoasă 2% de paradimetilaminobenzaldehidă (pDAB), 2) probe de urină, 3) eprubete, 4) pipete, 5) FEC.

Progres: la 0,5 ml de urină (diluată anterior de 100 de ori) adăugați 2,5 ml de 2% soluție apoasă pDAB și amestecați bine. După 15 minute, se determină densitatea optică a soluției pe FEC folosind un filtru de lumină albastră (=400 nm) și cuve cu o distanță de lucru de 10 mm. Ca soluție de referință, utilizați un control care conține 0,5 ml apă și 2,5 ml soluție apoasă 2% de pDAB. Determinați conținutul de uree al probei (mg/ml) utilizând curba de calibrare. Calculați conținutul de uree în urină

mmol/zi.

Rezultate: D1 = C1 = mg/ml

D 2 \u003d C 2 \u003d mg / ml

Formula: S.V. 1.5. 16,6 = (mmol/zi)

unde С este concentrația de uree mg/ml

(conform programului de calibrare)

B - diluarea urinei (de 100 de ori)

1,5 - diureză medie zilnică (l)

16.6 - factor de conversie în unități SI

(metoda diacetil monooximei)

Ureea este un produs format în ficat în timpul neutralizării amoniacului. Ureea este principalul produs final al metabolismului proteinelor. Aproximativ 50% din azotul rezidual din sânge non-proteic este uree.

PRINCIPIUL METODEI: ureea se formează cu diacetil monooximă într-un mediu puternic acid în prezența tiosemicarbazidei și a ionilor fier feric un compus complex de culoare roșie, a cărui intensitate a culorii îi determină concentrația.

PROGRES: luați trei eprubete: experiență, standard, control.

Puneți toate tuburile într-o baie de apă la 100°C timp de 5 minute.

Răciți și măsurați extincția față de control la 500-560 nm; cuva de 5 mm. Măsurătorile se efectuează în 15 minute.

REZULTAT:

C st \u003d 16,65 mmol / l.

REZULTAT FINAL: calculat prin formula:

C op = ----- · 16,65 = mmol/l.

Conținutul normal de uree în serul sanguin la adulți este de 2,5 - 8,33 mmol / l; în urină 333 - 582 mmol / zi. La nou-născuți în serul sanguin, conținutul normal de uree este de 3,5 - 11 mmol / l, la copiii de 2-14 ani 2,5 - 8,33 mmol / l.

O ușoară creștere a concentrației de uree în serul sanguin se observă cu nutriția excesivă a produselor proteice, odată cu îmbătrânirea.

O creștere semnificativă a concentrației de uree în serul sanguin (uremie) este observată în insuficiență renală, deshidratare (vărsături, diaree), șoc, descompunere crescută a proteinelor și sepsis.

Conținutul redus de uree în serul sanguin se observă în hepatita parenchimatoase, ciroză (o scădere bruscă a funcției hepatice de formare a ureei), eclampsie și în timpul sarcinii.

Scăderea conținutului de uree în urină se observă cu nefrită, acidoză, icter parenchimatos, ciroză hepatică

CONCLUZIE:

Data ________________

ACTIVITATEA #31

MUNCĂ AUDITORIALĂ INDEPENDENTĂ

PE TEMA „SCHIMB ŞI FUNCŢIILE AMINOACIZILOR. METABOLISMUL NUCLEOTIDILOR»

Sarcini pentru muncă independentă:

1. 1. Realizați o hartă metabolică a metabolismului aminoacizilor.

2. Marcați pe hartă:

2.1. Surse de aminoacizi în țesuturi.

2.2. Căi de transformare a aminoacizilor în țesuturi.

2.3. Enzime reglatoare ale glicolizei, metabolismul glicogenului, gluconeogeneza, calea pentozei fosfatului.

2.4. Enzime dependente de vitamine.

3. Rezolvarea și discutarea problemelor situaționale.

Data: ________________

ACTIVITATEA #33

LUCRARE № 1. DETERMINAREA CALITATIVĂ ȘI CANTITATIVĂ A BILIRUBINEI
(PRIN METODEA JENDRASIK)

JUSTIFICAREA LUCRĂRII. Odată cu distrugerea eritrocitelor (la om după 100-120 de zile), hemoglobina se descompune în celulele sistemului reticuloendotelial al măduvei osoase, splinei și ficatului. Produsul final al descompunerii hemului este bilirubina indirectă, care intră în sânge și este transportată de albumină în ficat, unde este detoxificată cu formarea bilirubinei directe.

Există două tipuri de bilirubină în serul sanguin. Forma principală este bilirubina indirectă (liberă), care nu este asociată cu acidul glucuronic și dă o reacție indirectă diazo. Sângele conține o cantitate mică de bilirubină directă (legată) - această bilirubină este asociată cu glucuronat și dă o reacție diazo directă. Suma ambilor pigmenți dă bilirubină totală.

Încălcarea metabolismului bilirubinei este însoțită de dezvoltarea icterului. În acest sens, determinarea cantitativă separată a bilirubinei totale, directe și indirecte în serul sanguin este importantă pentru diagnosticul diferențial. tipuri variate icter.

PRINCIPIUL METODEI: Reactivul diazo dă o culoare roz cu bilirubină directă. Bilirubina indirectă este transformată într-o stare solubilă prin adăugarea unui reactiv de cafeină în ser, după care bilirubina totală este determinată printr-o reacție diazo. Intensitatea culorii este direct proporțională cu concentrația de bilirubină din probă.

PROGRES: luați trei eprubete: experiența 1, 2 și control.

Se amestecă conținutul tuburilor și se incubează

la o temperatură de 18 o C.

EXPERIMENTUL 1 - fotometrie după 10 minute

Împotriva controlului

EXPERIMENTUL 2 - fotometrie după 20 de minute

Lungime de unda: 530-550 nm, cuva 5 mm.

REZULTAT:

REZULTAT FINAL: găsite pe tabelul de calibrare. Nivelul bilirubinei indirecte este determinat de diferența dintre cantitatea de bilirubină totală și cea directă.

Bilirubina directa:

C = µmol/l

Bilirubina totală:

C = µmol/l

Bilirubina indirectă:

C = µmol/l

SEMNIFICAȚIA CLINICĂ ȘI DIAGNOSTICĂ.

Conținutul normal de bilirubină totală în serul sanguin la adulți este de 5,0 - 20,5 µmol/l; bilirubină legată (directă) - 1,0 - 7,5 µmol/l; bilirubină liberă (indirectă) - 1,7 - 17,1 µmol / l.

La nou-născuți, conținutul normal de bilirubină totală în serul sanguin este de 12 - 20 µmol/l, la copiii cu vârsta între 2-14 ani 8,55 - 20,52 µmol/l.

Un conținut crescut de bilirubină totală în serul sanguin este observat cu icter la nou-născuți, leziuni ale hepatocitelor (inflamatorii, toxice), blocarea căilor biliare și boală hemolitică.

La parenchimatoase icter:

În sânge, conținutul de bilirubină directă și indirectă crește;

Bilirubina directă și urobilinogenul apar în urină.

Excreția de stercobilină cu fecale scade.

La obstructiv icter (mecanic):

În sânge, conținutul de bilirubină directă crește;

Bilirubina directă apare în urină (urină întunecată);

Nu există excreție de stercobilină (fecale acolice).

La hemolitic icter:

În sânge, conținutul de bilirubină indirectă crește;

În urină, conținutul de stercobilinogen crește;

Secreție crescută de stercobilină (fecale întunecate).

CONCLUZIE:

Data ______________

ACTIVITATEA #34

Informații similare.